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公开(公告)号：CN118126977A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202211535605.1
申请日：2022-12-01
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其催化合成甜茶苷衍生物Rub2G的方法，所述突变体是在原糖基转移酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1基础上进行的单突变或者组合突变，最终筛选出催化效果较好的LbUGT突变菌株_SuSy体系，实现高效催化合成甜茶苷衍生物Rub2G。通过定点突变提高了糖基转移酶LbUGT的酶活、延长了半衰期，利用该突变体实现了高效催化合成Rub2G，合成方法条件温和，操作简单，时间短，催化效率之高，产率高，具有较好的应用前景。
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公开(公告)号：CN114875054B
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202210732311.1
申请日：2022-06-24
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/54 , C12N9/10 , C12P19/56 , C12N1/21 , A23L2/60 , A23L27/30 , A23L33/105 , A61K47/26 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种酶法糖基化甜菊糖苷类化合物方法及其衍生物，在糖基转移酶存在下，将葡萄糖基供体的糖基转移到甜菊糖苷类化合物的C19连接的第一个葡萄糖基的C‑6’上和/或将葡萄糖基供体的糖基转移到甜菊糖苷类化合物的C19连接的第一个葡萄糖基的C‑2’上。糖基化衍生物与相应底物比较，甜味增加、苦味减少，提升了口感品质，是潜在的优质甜味剂，可用作食品中的天然甜味剂、膳食补充剂及药品成分等。该方法是目前酶法优化甜菊糖苷类化合物其甜味剂品质实验中产量高，效果好，方法操作简单，产品副产物极少，绿色环保无污染，生产成本低，适合于工业生产。
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公开(公告)号：CN110029118B
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN201910316885.9
申请日：2019-04-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种合成槲皮素‑4’‑葡萄糖苷的方法,将糖基转移酶UGT88A1或者其突变体的基因与蔗糖合酶基因构建含双酶体系的重组菌;将重组菌使用IPTG作为诱导剂，在16~37℃诱导12~24 h，离心收集菌泥，利用超声破碎法破碎菌体，离心收集上清，得到粗酶液；将槲皮素溶于DMSO中，加入粗酶液、蔗糖，在20‑40℃条件下反应8‑30h，使用甲醇终止反应，离心得到槲皮素‑4’‑葡萄糖糖苷。所述糖基转移酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO.1所示氨基酸序列发生突变，突变的氨基酸位点选自V18，I118，G181，S271中的一个或多个。该突变体制备简单，实现了槲皮素‑4’‑葡萄糖糖苷产量的提高。
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公开(公告)号：CN108676747B
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN201810505997.4
申请日：2018-05-24
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种包含红曲废弃菌丝体和玉米粗原料的培养基及其在培养纳豆激酶生产菌中的应用。将发酵产生的红曲废弃菌丝体进行回收，用酸性纤维素酶和复合酶水解成含有还原糖、游离氨基酸和小肽等物质的水解液；再用KOH将水解液pH调制6.5~7.5，最后用中和后的水解液配置纳豆芽孢杆菌发酵培养基。本发明的水解红曲废弃菌丝体和玉米粗原料作为纳豆激酶生产菌发酵原料，为纳豆激酶生产菌提供了丰富的氨基酸碳源，实现了废物再利用，降低了纳豆激酶生产菌培养基的成本；纳豆激酶生产菌在其发酵培养基中生长良好，显著降低了发酵法生产红曲过程中发酵废弃物的处理量，不仅提升了菌体的培养效果，而且大大提高其附加值。
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公开(公告)号：CN112695023A
公开(公告)日：2021-04-23
申请号：CN202011386939.8
申请日：2020-12-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于枸杞的糖苷酶及其应用，所述糖苷酶是经过分析对比整合得到的如SEQ No.1所示氨基酸序列的α‑葡萄糖苷酶，其核苷酸序列如SEQ No.2所示，该酶能够将L‑AA转化为单一的AA‑2G，无副产物生成。本发明所述的α‑糖苷酶可工业应用，反应条件简单且时间短，并且产物单一易于纯化。本发明的α‑糖苷酶和使用该酶生产AA‑2G的方法可以为酶法生成AA‑2G提供新思路。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106754595B
公开(公告)日：2019-10-22
申请号：CN201611142783.2
申请日：2016-12-13
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一株重组菌及其在催化莱鲍迪甙A生成莱鲍迪甙D中的应用，所述重组菌中同时含有番茄来源糖基转移酶UGTSL2基因和马铃薯来源蔗糖合酶StSUS1基因，将番茄来源糖基转移酶UGTSL2基因克隆到pRSFDuet‑1的NdeI与XhoI位点之间，构建得到重组质粒pRSFDuet‑SL2，然后再将马铃薯来源蔗糖合酶StSUS1基因克隆到pRSFDuet‑SL2的NcoI和EcoRI位点之间，构建得到重组质粒pRSFDuet‑SL2‑SUS1，将重组质粒pRSFDuet‑SL2‑SUS1转化到宿主细胞中，得到重组菌。将重组菌诱导表达后取粗酶液，加入到反应混合物中催化莱鲍迪甙A生成莱鲍迪甙D，反应中使用重组菌破碎后的粗酶液，避免了酶的分离纯化，也无需制作冻干粉，反应液中不需添加UDP或UDP‑葡萄糖和任何细胞通透剂或其他化学试剂，环境友好性更佳。莱鲍迪甙D的产率高达10.8 g/L。
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公开(公告)号：CN110029118A
公开(公告)日：2019-07-19
申请号：CN201910316885.9
申请日：2019-04-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种合成槲皮素-4’-葡萄糖苷的方法,将糖基转移酶UGT88A1或者其突变体的基因与蔗糖合酶基因连接得到重组质粒，构建含双酶体系的重组菌;将重组菌接种于100mL LB液体培养基中，25~40℃，取样，使OD600处于0.4～0.5时，使用IPTG作为诱导剂，在16~37℃，150~300r/min的条件下进行诱导12~24 h，离心收集菌泥，利用超声破碎法破碎菌体，8000r/min条件下离心收集上清，得到粗酶液；将槲皮素溶于DMSO中，加入粗酶液、蔗糖，在20-40℃条件下反应8-30h，使用甲醇终止反应，离心得到槲皮素-4’-葡萄糖糖苷。所述糖基转移酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO.1所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列，突变的氨基酸位点选自V18，I118，G181，S271中的一个或多个。该突变体制备简单，实现了槲皮素-4’-葡萄糖糖苷产量的提高。
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公开(公告)号：CN109234337A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201811073927.2
申请日：2018-09-14
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种一种槲皮素糖苷的生物合成方法,将糖基转移酶UGT73G1或者其突变体的基因与蔗糖合酶基因连接得到重组质粒，构建含双酶体系的重组菌；将重组菌接种于LB液体培养基中，25~40℃，培养至OD600达到2-3时，添加诱导剂乳糖诱导12~20h，发酵液离心收集菌体，菌体破碎，离心收集上清液得到粗酶液；将槲皮素或异槲皮素溶于DMSO中，加入粗酶液、蔗糖，反应8-30h，加入甲醇终止反应，离心得上清槲皮素-3，4’-二葡萄糖糖苷。所述糖基转移酶突变体的氨基酸序列是SEQ ID NO：1所示氨基酸序列发生突变的氨基酸序列，突变的氨基酸位点选自S151，T168，K274，T293，G361,S365,V371及F381中的一个或多个。该突变体制备简单，产量大，实现了槲皮素-3，4’二葡萄糖糖苷产量的提高。
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公开(公告)号：CN108497058A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810348219.9
申请日：2018-04-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用豆腐黄浆水发酵的生物保鲜菌剂及其在果蔬保鲜中的应用，所述生物保鲜菌剂由枯草芽孢杆菌在以豆腐黄浆水为发酵原料发酵得到的发酵液直接用作10保13C鲜FU菌/m剂l，，γ所-述聚发谷酵氨酸液浓中度菌达体到浓3度0~5达0g到/L1，×抗1菌01肽3~产2.量7×达到1.2~2g/l。该生物保鲜菌剂的获取方法与其他生物保鲜菌剂相比成本低廉更加环保，可以利用废弃质资源豆腐黄浆水，减少豆制品加工中的黄浆水自然发酵酸浆存在致病菌等安全隐患，同时发酵产物中γ-聚谷氨酸和抗菌物质含量高，因此对采后果蔬具有良好的保鲜效果且无污染，无公害具有长远的发展前景和工业化利用价值。
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公开(公告)号：CN107586594A
公开(公告)日：2018-01-16
申请号：CN201710886285.7
申请日：2017-09-27
Applicant: 南京工业大学 , 长沙湘之韵园林工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种乙醇均质辅助的牡丹籽油提取方法，将牡丹籽烘干，脱去外壳，粉碎得牡丹籽粉末；将牡丹籽粉末加入高速均质机中，按料液比1:4－1:7与乙醇溶液均质形成稳定的乳状液；调节乳状液pH至酶的最适pH，加入碱性蛋白酶进行催化提取,酶解后，离心分离得到游离油；对游离油进行真空旋蒸干燥，除去油相中残留的乙醇和水，得到牡丹籽油。本发明形成稳定的包括水、乙醇和牡丹籽粉乳状液，抑制乳化层的形成，离心后可以直接获得牡丹籽油，省去了离心后的破乳过程，简化牡丹籽油的提取工艺，提高了游离油的比例和牡丹籽油的提取效率。该工艺操作简便，经济性好，提取过程中基本无乳化层形成，游离油比例高达98%，总牡丹籽油提取率高达90%以上。
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