-
公开(公告)号：CN114875054A
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202210732311.1
申请日：2022-06-24
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/54 , C12N9/10 , C12P19/56 , C12N1/21 , A23L2/60 , A23L27/30 , A23L33/105 , A61K47/26 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种酶法糖基化甜菊糖苷类化合物方法及其衍生物，在糖基转移酶存在下，将葡萄糖基供体的糖基转移到甜菊糖苷类化合物的C19连接的第一个葡萄糖基的C‑6’上和/或将葡萄糖基供体的糖基转移到甜菊糖苷类化合物的C19连接的第一个葡萄糖基的C‑2’上。糖基化衍生物与相应底物比较，甜味增加、苦味减少，提升了口感品质，是潜在的优质甜味剂，可用作食品中的天然甜味剂、膳食补充剂及药品成分等。该方法是目前酶法优化甜菊糖苷类化合物其甜味剂品质实验中产量高，效果好，方法操作简单，产品副产物极少，绿色环保无污染，生产成本低，适合于工业生产。
-
公开(公告)号：CN115404226B
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202110582880.8
申请日：2021-05-27
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/18 , C12P19/60 , C12P19/44 , C12P33/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖合成酶用于酶法制备糖基化天然产物的方法。该方法利用低等真核来源的蔗糖合成酶和UDP‑糖基转移酶，以底物和蔗糖为原料生产糖基化产物。本发明的方法首先利用基因挖掘技术筛选得到具有UDP底物亲和力的蔗糖合成酶，并将其用于与UDP‑葡萄糖基转移酶在同一载体上共表达，然后收集生物酶粗品直接进行底物催化反应，通过新型蔗糖合成酶催化蔗糖实现UDP‑葡萄糖的高效循环，使UDP‑葡萄糖基转移酶具有持续的UDP‑葡萄糖补给催化底物糖基化。该方法与已有的双酶催化反应系统相比，转化速率快，收率高，具有重要且广泛的应用价值。
-
公开(公告)号：CN109750072B
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN201910095404.6
申请日：2019-01-31
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种酶法制备莱鲍迪苷E的方法，该方法利用番茄来源UDP‑糖基转移酶和马铃薯来源蔗糖合成酶，以甜菊甙为原料一步糖基化反应生产莱鲍迪苷E，同时采用定点突变技术，改造UDP‑糖基转移酶，进一步提高莱鲍迪苷E的产率。本发明的方法无需添加UDP‑葡萄糖和UDP，利用粗提液中UDP及额外添加的蔗糖在蔗糖合成酶分解作用下获得UDP‑葡萄糖作为糖基化反应的原材料，建立双酶循环反应体系，有效催化甜菊甙生产莱鲍迪苷E。其中，莱鲍迪苷E产率可达65%以上；后期通过定点突变技术，经筛选获得N358F有益突变体，其催化莱鲍迪苷E产率提高，最高可达85%以上。与已有的莱鲍迪苷E制备方法相比，工艺步骤简单，成本低廉，且产率高，具有重要的应用价值。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109750071A
公开(公告)日：2019-05-14
申请号：CN201910095402.7
申请日：2019-01-31
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种生物催化合成莱鲍迪苷M的方法，首先，利用番茄来源UDP-糖基转移酶和马铃薯来源蔗糖合成酶，以甜菊甙为原料糖基化反应合成莱鲍迪苷E；随后，利用甜叶菊来源UDP-糖基转移酶和马铃薯来源蔗糖合成酶，以莱鲍迪苷E为原料进一步糖基化反应合成莱鲍迪苷M。本发明的方法利用分子克隆技术，获得异源表达UDP-糖基转移酶和蔗糖合成酶的大肠杆菌基因工程菌，经发酵产酶后以细胞粗提液直接进行催化反应，利用粗提液中UDP及额外添加的蔗糖在蔗糖合成酶分解作用下获得UDP-葡萄糖作为糖基化反应的原材料，建立双酶循环反应体系，有效催化甜菊甙生产莱鲍迪苷M。原料成本更为低廉，工艺步骤简单，具有重要的应用价值。
-
公开(公告)号：CN118126977A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202211535605.1
申请日：2022-12-01
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其催化合成甜茶苷衍生物Rub2G的方法，所述突变体是在原糖基转移酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1基础上进行的单突变或者组合突变，最终筛选出催化效果较好的LbUGT突变菌株_SuSy体系，实现高效催化合成甜茶苷衍生物Rub2G。通过定点突变提高了糖基转移酶LbUGT的酶活、延长了半衰期，利用该突变体实现了高效催化合成Rub2G，合成方法条件温和，操作简单，时间短，催化效率之高，产率高，具有较好的应用前景。
-
公开(公告)号：CN114875054B
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202210732311.1
申请日：2022-06-24
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/54 , C12N9/10 , C12P19/56 , C12N1/21 , A23L2/60 , A23L27/30 , A23L33/105 , A61K47/26 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种酶法糖基化甜菊糖苷类化合物方法及其衍生物，在糖基转移酶存在下，将葡萄糖基供体的糖基转移到甜菊糖苷类化合物的C19连接的第一个葡萄糖基的C‑6’上和/或将葡萄糖基供体的糖基转移到甜菊糖苷类化合物的C19连接的第一个葡萄糖基的C‑2’上。糖基化衍生物与相应底物比较，甜味增加、苦味减少，提升了口感品质，是潜在的优质甜味剂，可用作食品中的天然甜味剂、膳食补充剂及药品成分等。该方法是目前酶法优化甜菊糖苷类化合物其甜味剂品质实验中产量高，效果好，方法操作简单，产品副产物极少，绿色环保无污染，生产成本低，适合于工业生产。
-
公开(公告)号：CN115404226A
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202110582880.8
申请日：2021-05-27
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/18 , C12P19/60 , C12P19/44 , C12P33/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖合成酶用于酶法制备糖基化天然产物的方法。该方法利用低等真核来源的蔗糖合成酶和UDP‑糖基转移酶，以底物和蔗糖为原料生产糖基化产物。本发明的方法首先利用基因挖掘技术筛选得到具有UDP底物亲和力的蔗糖合成酶，并将其用于与UDP‑葡萄糖基转移酶在同一载体上共表达，然后收集生物酶粗品直接进行底物催化反应，通过新型蔗糖合成酶催化蔗糖实现UDP‑葡萄糖的高效循环，使UDP‑葡萄糖基转移酶具有持续的UDP‑葡萄糖补给催化底物糖基化。该方法与已有的双酶催化反应系统相比，转化速率快，收率高，具有重要且广泛的应用价值。
-
公开(公告)号：CN109750072A
公开(公告)日：2019-05-14
申请号：CN201910095404.6
申请日：2019-01-31
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种酶法制备莱鲍迪苷E的方法，该方法利用番茄来源UDP-糖基转移酶和马铃薯来源蔗糖合成酶，以甜菊甙为原料一步糖基化反应生产莱鲍迪苷E，同时采用定点突变技术，改造UDP-糖基转移酶，进一步提高莱鲍迪苷E的产率。本发明的方法无需添加UDP-葡萄糖和UDP，利用粗提液中UDP及额外添加的蔗糖在蔗糖合成酶分解作用下获得UDP-葡萄糖作为糖基化反应的原材料，建立双酶循环反应体系，有效催化甜菊甙生产莱鲍迪苷E。其中，莱鲍迪苷E产率可达65%以上；后期通过定点突变技术，经筛选获得N358F有益突变体，其催化莱鲍迪苷E产率提高，最高可达85%以上。与已有的莱鲍迪苷E制备方法相比，工艺步骤简单，成本低廉，且产率高，具有重要的应用价值。
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
8
records
(took 0.018 seconds)
