-
公开(公告)号：CN115404226A
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202110582880.8
申请日：2021-05-27
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/18 , C12P19/60 , C12P19/44 , C12P33/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖合成酶用于酶法制备糖基化天然产物的方法。该方法利用低等真核来源的蔗糖合成酶和UDP‑糖基转移酶，以底物和蔗糖为原料生产糖基化产物。本发明的方法首先利用基因挖掘技术筛选得到具有UDP底物亲和力的蔗糖合成酶，并将其用于与UDP‑葡萄糖基转移酶在同一载体上共表达，然后收集生物酶粗品直接进行底物催化反应，通过新型蔗糖合成酶催化蔗糖实现UDP‑葡萄糖的高效循环，使UDP‑葡萄糖基转移酶具有持续的UDP‑葡萄糖补给催化底物糖基化。该方法与已有的双酶催化反应系统相比，转化速率快，收率高，具有重要且广泛的应用价值。
-
公开(公告)号：CN113462670A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202110967784.5
申请日：2021-08-23
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其催化合成莱鲍迪苷M的方法，所述突变体是在如SEQID NO:1所示的糖基转移酶氨基酸序列的基础上进行突变，对突变菌株诱导表达得到突变酶，以突变酶为催化剂，酶法催化20 g/LRebE合成12.8g/LRebM。突变体S195Q对莱鲍迪苷E和莱鲍迪苷D的动力学参数，突变体米氏常数分别为56.34±2.02μM和214.48±14.54μM，是野生型的1/3和2/5。将糖基转移酶突变体与蔗糖合酶偶联，实现高效催化合成莱鲍迪苷M。本实验构建糖基转移酶UGT76G1或其突变体与蔗糖合酶的重组菌株，实现高效催化合成莱鲍迪苷M。该方法是目前酶法催化合成莱鲍迪苷M实验中产量最优且绿色环保无污染。
-
公开(公告)号：CN113322219A
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN202110188213.1
申请日：2021-02-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种生物法催化合成姜黄素糖苷类化合物的方法。通过将糖基转移酶基因CaUGT2及蔗糖合成酶基因AtSUS1构建到表达载体上，导入到大肠杆菌中得到重组菌株，此重组菌株进行诱导表达后其可溶性表达量比其他植物来源糖基转移酶有所提高，可对底物姜黄素进行高效催化。所述重组质粒为pRSF‑CaUGT2‑AtSUS1，在Nco I和EcoR I插入蔗糖合成酶AtSUS1基因，在Xho I和NdeI插入糖基转移酶CaUGT2，构成共表达重组质粒pRSF‑CaUGT2‑AtSUS1，将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中得到重组菌株CaUGT2‑AtSUS1，重组菌株进行诱导表达后其糖基转移酶CaUGT2可溶性表达量比其他植物来源糖基转移酶有所提高，催化合成姜黄素糖苷类化合物转化率达到98%，催化姜黄素生成姜黄素单糖苷和姜黄素双糖苷，其水溶性优于姜黄素，解决姜黄素水溶性差的问题。底物姜黄素浓度75mM，催化底物浓度较高，更适用于工业化中食品及药品行业。
-
公开(公告)号：CN112375750A
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN202011388873.6
申请日：2020-12-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其催化合成莱鲍迪苷A的方法，所述原糖基转移酶的氨基酸序列：SEQ ID NO:1，本实验从UGT76G1的表面残基Q、N、T出发，并结合溶剂可及表面面积、B‑因子等方面数据分析结果，在所得预测的基础上，筛选出Asn196,Asn78,Asn400,Asn69,Gln72,Gln198,Gln178,Gln160,Thr319,Thr 81中的单点或多点迭代突变，最终筛选出较好的突变菌株76G1_Q72E‑N196D‑T319E的UGT‑SuSy体系，实现高效催化合成莱鲍迪苷A。将糖基转移酶UGT76G1或其突变体基因于蔗糖合酶基因连接得到重组质粒，构建双酶共表达的重组菌株。通过构建双酶系统，实现体内UDPG的再生，有效解决了昂贵糖基供体的来源问题，降低了成本，推动了生物技术工业的应用。该突变体制备简单，实现短时间高效催化合成莱鲍迪苷A，且生物酶催化方法绿色环保无污染，更适合于现在绿色工业加工生产。
-
公开(公告)号：CN112695021B
公开(公告)日：2023-02-28
申请号：CN202011392317.6
申请日：2020-12-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种α‑糖苷酶基因突变体及在制备2‑O‑α‑D‑葡萄糖基‑L‑抗坏血酸中的应用，所述α‑糖苷酶基因突变体是将第270位酪氨酸突变为苯丙氨酸，或/和将第373位色氨酸分别突变为亮氨酸，或/和将第411位甲硫氨酸突变为苯丙氨酸，或/和将第491位精氨酸突变为赖氨酸，或/和将第504位色氨酸突变为亮氨酸所得。该突变体制备简单，实现了催化生成AA‑2G的产量的提高。相同条件下，突变体比活力较原始酶明显提高，催化生成AA‑2G的产量最高可达18.9 g/L，产AA‑2G的转化率较原始酶有显著的提高。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115404226B
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202110582880.8
申请日：2021-05-27
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P19/18 , C12P19/60 , C12P19/44 , C12P33/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种蔗糖合成酶用于酶法制备糖基化天然产物的方法。该方法利用低等真核来源的蔗糖合成酶和UDP‑糖基转移酶，以底物和蔗糖为原料生产糖基化产物。本发明的方法首先利用基因挖掘技术筛选得到具有UDP底物亲和力的蔗糖合成酶，并将其用于与UDP‑葡萄糖基转移酶在同一载体上共表达，然后收集生物酶粗品直接进行底物催化反应，通过新型蔗糖合成酶催化蔗糖实现UDP‑葡萄糖的高效循环，使UDP‑葡萄糖基转移酶具有持续的UDP‑葡萄糖补给催化底物糖基化。该方法与已有的双酶催化反应系统相比，转化速率快，收率高，具有重要且广泛的应用价值。
-
公开(公告)号：CN116920091A
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202310950967.5
申请日：2023-07-31
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明提供一种光动力协同的靶向载药纳米复合物，采用BPN作药物递送载体，PMb和光敏剂作为被装载药物，通过静电吸附法构建纳米药物递送体系，所得的纳米复合物可高度靶向混合细菌生物膜，并在BPN对混合细菌生物膜的破坏前提下，结合PMb和光敏剂有效杀灭革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，从而达到消融混合细菌生物膜的目的。
-
公开(公告)号：CN113322219B
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202110188213.1
申请日：2021-02-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种生物法催化合成姜黄素糖苷类化合物的方法。通过将糖基转移酶基因CaUGT2及蔗糖合成酶基因AtSUS1构建到表达载体上，导入到大肠杆菌中得到重组菌株，此重组菌株进行诱导表达后其可溶性表达量比其他植物来源糖基转移酶有所提高，可对底物姜黄素进行高效催化。所述重组质粒为pRSF‑CaUGT2‑AtSUS1，在Nco I和EcoR I插入蔗糖合成酶AtSUS1基因，在Xho I和NdeI插入糖基转移酶CaUGT2，构成共表达重组质粒pRSF‑CaUGT2‑AtSUS1，将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中得到重组菌株CaUGT2‑AtSUS1，重组菌株进行诱导表达后其糖基转移酶CaUGT2可溶性表达量比其他植物来源糖基转移酶有所提高，催化合成姜黄素糖苷类化合物转化率达到98%，催化姜黄素生成姜黄素单糖苷和姜黄素双糖苷，其水溶性优于姜黄素，解决姜黄素水溶性差的问题。底物姜黄素浓度75mM，催化底物浓度较高，更适用于工业化中食品及药品行业。
-
公开(公告)号：CN112695023B
公开(公告)日：2022-11-18
申请号：CN202011386939.8
申请日：2020-12-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于枸杞的糖苷酶及其应用，所述糖苷酶是经过分析对比整合得到的如SEQ No.1所示氨基酸序列的α‑葡萄糖苷酶，其核苷酸序列如SEQ No.2所示，该酶能够将L‑AA转化为单一的AA‑2G，无副产物生成。本发明所述的α‑糖苷酶可工业应用，反应条件简单且时间短，并且产物单一易于纯化。本发明的α‑糖苷酶和使用该酶生产AA‑2G的方法可以为酶法生成AA‑2G提供新思路。
-
公开(公告)号：CN112375750B
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202011388873.6
申请日：2020-12-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其催化合成莱鲍迪苷A的方法，所述原糖基转移酶的氨基酸序列：SEQ ID NO:1，本实验从UGT76G1的表面残基Q、N、T出发，并结合溶剂可及表面面积、B‑因子等方面数据分析结果，在所得预测的基础上，筛选出Asn196,Asn78,Asn400,Asn69,Gln72,Gln198,Gln178,Gln160,Thr319,Thr 81中的单点或多点迭代突变，最终筛选出较好的突变菌株76G1_Q72E‑N196D‑T319E的UGT‑SuSy体系，实现高效催化合成莱鲍迪苷A。将糖基转移酶UGT76G1或其突变体基因于蔗糖合酶基因连接得到重组质粒，构建双酶共表达的重组菌株。通过构建双酶系统，实现体内UDPG的再生，有效解决了昂贵糖基供体的来源问题，降低了成本，推动了生物技术工业的应用。该突变体制备简单，实现短时间高效催化合成莱鲍迪苷A，且生物酶催化方法绿色环保无污染，更适合于现在绿色工业加工生产。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
12
records
(took 0.021 seconds)
