公开(公告)号：CN118126977A

公开(公告)日：2024-06-04

申请号：CN202211535605.1

申请日：2022-12-01

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 李艳 ,  贾红华 ,  丁佳杰 ,  潘华祎 ,  肖亮 ,  陈凯

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/54 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/56 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其催化合成甜茶苷衍生物Rub2G的方法，所述突变体是在原糖基转移酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1基础上进行的单突变或者组合突变，最终筛选出催化效果较好的LbUGT突变菌株_SuSy体系，实现高效催化合成甜茶苷衍生物Rub2G。通过定点突变提高了糖基转移酶LbUGT的酶活、延长了半衰期，利用该突变体实现了高效催化合成Rub2G，合成方法条件温和，操作简单，时间短，催化效率之高，产率高，具有较好的应用前景。

公开(公告)号：CN118440917A

公开(公告)日：2024-08-06

申请号：CN202410525070.2

申请日：2024-04-28

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 李艳 ,  贾红华 ,  陈佳杰 ,  何惠畅 ,  丁佳杰

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其催化合成人参皂苷Rg3的方法，所述突变体是在原糖基转移酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1基础上进行的单突变或者组合突变，最终筛选出催化效果较好的UGTPg29突变菌株，与SuSy形成偶联体系，实现高效催化合成人参皂苷Rg3。通过定点突变延长了糖基转移酶UGTPg29的半衰期，利用该突变体实现了高效催化合成Rg3，合成方法条件温和，操作简单，时间短，催化效率高，产率高，具有较好的应用前景。

公开(公告)号：CN118440917B

公开(公告)日：2024-12-20

申请号：CN202410525070.2

申请日：2024-04-28

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 李艳 ,  贾红华 ,  陈佳杰 ,  何惠畅 ,  丁佳杰

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P33/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其催化合成人参皂苷Rg3的方法，所述突变体是在原糖基转移酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1基础上进行的单突变或者组合突变，最终筛选出催化效果较好的UGTPg29突变菌株，与SuSy形成偶联体系，实现高效催化合成人参皂苷Rg3。通过定点突变延长了糖基转移酶UGTPg29的半衰期，利用该突变体实现了高效催化合成Rg3，合成方法条件温和，操作简单，时间短，催化效率高，产率高，具有较好的应用前景。

公开(公告)号：CN115896216A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202211451601.5

申请日：2022-11-18

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 李艳 ,  贾红华 ,  何惠畅 ,  丁佳杰 ,  陶叶慧 ,  蔡如鑫 ,  贺晓英 ,  徐娇娇

IPC: C12P19/60 ,  C12P19/18 ,  C12N9/10

Abstract: 本发明公开了一种槲皮素‑3,4'‑O‑二葡萄糖苷的合成方法及其所用到的酶，以拟南芥（Arabidopsis thaliana）来源的UGT78D2和洋葱（Allium cepa）来源的UGT73G1突变体73G1_V371A为研究对象，利用蛋白质工程手段改造UGT78D2区域选择性以及73G1_V371A可溶性表达。同时引入蔗糖合酶（Sucrose synthase，SuSy），分别与73G1_V371A和UGT78D2及其突变体构成偶联体系，实现UDPG循环再生，并对SuSy的磷酸化突变进行了比较研究。最终搭建三酶共表达催化体系S31D‑F378S‑V371A，以槲皮素和蔗糖为底物催化合成Q3,4'G，转化合成Q3,4'G的量为4.4±0.03 g/L，产槲皮素‑3,4＇‑O‑二葡萄糖苷的产量较原始酶有显著的提高。

公开(公告)号：CN118291574A

公开(公告)日：2024-07-05

申请号：CN202410422348.3

申请日：2024-04-09

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 李艳 ,  贾红华 ,  丁佳杰 ,  何惠畅 ,  陈凯

IPC: C12P33/20 ,  C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶突变体及其催化合成人参皂苷Rh2的方法，所述突变体是在原糖基转移酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:1基础上进行的单突变或者组合突变，最终筛选出催化效果较好的GuGT14突变菌株，与SuSy形成偶联体系，实现高效催化合成人参皂苷Rh2。通过定点突变提高了糖基转移酶GuGT14的酶活，利用该突变体实现了高效催化合成Rh2，合成方法条件温和，操作简单，时间短，催化效率高，产率高，具有较好的应用前景。