一种鉴别检测II类新城疫病毒强弱毒的焦磷酸测序方法

    公开(公告)号:CN105986045A

    公开(公告)日:2016-10-05

    申请号:CN201610118024.6

    申请日:2016-03-02

    Abstract: 本发明属于动物病原检测技术领域,涉及一种鉴别检测II类新城疫病毒强弱毒的焦磷酸测序方法,先设计可区分所有II类新城疫病毒强毒株与弱毒株的特异性RT-PCR扩增引物和焦磷酸测序引物;再提取待测样品RNA,用RT-PCR扩增引物进行扩增;通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,若扩增产物长度为218bp,则制备焦磷酸测序单链模板,进行焦磷酸测序反应,最后根据RT-PCR扩增结果和焦磷酸测序结果来判定样品中是否含有II类新城疫病毒强毒株或弱毒株;本发明应用焦磷酸测序技术,通过特定序列测定实现II类新城疫病毒强弱毒鉴定,具有高通量、低成本等特点,且所需样品量小、操作简便、结果判定标准简单,满足进行早期确诊的目的,在疫情监测、快速诊断和出入境检验检疫中具有广阔的应用前景。

    一种非洲猪瘟病毒野毒株和疫苗株鉴别检测试剂盒

    公开(公告)号:CN111876527A

    公开(公告)日:2020-11-03

    申请号:CN202010810132.6

    申请日:2020-08-13

    Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒野毒株与疫苗株鉴别检测试剂盒及其应用。本发明提供的试剂盒,包括三组引物和探针,第一组引物和探针与非洲猪瘟病毒B646L基因保守区特定序列完全配对,用于检测非洲猪瘟病毒;第二组引物和探针与非洲猪瘟病毒EP402R基因保守区特定序列完全配对,用于检测非洲猪瘟病毒野毒株;第三组引物和探针与红色荧光蛋白mCherry基因特定序列完全配对,用于检测非洲猪瘟病毒疫苗株。在三条探针上分别标记不同的荧光报告基团。本发明的非洲猪瘟病毒野毒株与疫苗株鉴别检测试剂盒,检测灵敏度高,最低可检测出浓度为100个拷贝/μL的目的DNA,特异性好,操作简单方便,能有效地将非洲猪瘟疫苗免疫动物和野毒感染动物进行区分。

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