一种鉴别检测II类新城疫病毒强弱毒的焦磷酸测序方法

    公开(公告)号:CN105986045A

    公开(公告)日:2016-10-05

    申请号:CN201610118024.6

    申请日:2016-03-02

    Abstract: 本发明属于动物病原检测技术领域,涉及一种鉴别检测II类新城疫病毒强弱毒的焦磷酸测序方法,先设计可区分所有II类新城疫病毒强毒株与弱毒株的特异性RT-PCR扩增引物和焦磷酸测序引物;再提取待测样品RNA,用RT-PCR扩增引物进行扩增;通过琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物,若扩增产物长度为218bp,则制备焦磷酸测序单链模板,进行焦磷酸测序反应,最后根据RT-PCR扩增结果和焦磷酸测序结果来判定样品中是否含有II类新城疫病毒强毒株或弱毒株;本发明应用焦磷酸测序技术,通过特定序列测定实现II类新城疫病毒强弱毒鉴定,具有高通量、低成本等特点,且所需样品量小、操作简便、结果判定标准简单,满足进行早期确诊的目的,在疫情监测、快速诊断和出入境检验检疫中具有广阔的应用前景。

    一种H5和H7N9亚型高致病性禽流感病毒的检测方法

    公开(公告)号:CN109554507A

    公开(公告)日:2019-04-02

    申请号:CN201910057664.4

    申请日:2019-01-22

    Inventor: 蒋文明 刘华雷

    Abstract: 本发明提供一种同时检测和区分H5和H7N9亚型高致病性禽流感病毒的快速检测方法,分别比对了近年来分离到的H5亚型高致病性禽流感病毒和H7N9亚型高致病性禽流感病毒HA基因核苷酸序列,在其保守区设计了引物和探针,建立了针对H5和H7N9亚型高致病性禽流感病毒实时荧光定量RT-PCR核酸快速检测方法。本发明所提供的H5和H7N9亚型高致病性禽流感病毒实时荧光RT-PCR方法具有灵敏度高、检测时间短,不需要电泳等开放环节,只需一台荧光PCR仪即可在一个密闭反应管中完成两种亚型禽流感病毒的检测,且在检测过程中可实时查看反应曲线,对结果作出快速判断。

    一种检测H5和H7N9亚型高致病性禽流感病毒和H9亚型禽流感病毒的方法

    公开(公告)号:CN109722492B

    公开(公告)日:2022-12-30

    申请号:CN201910066106.4

    申请日:2019-01-24

    Inventor: 蒋文明 刘华雷

    Abstract: 本发明提供一种同时检测和区分H5和H7N9亚型高致病性禽流感病毒以及H9亚型禽流感病毒的快速检测方法,通过分析近年来分离到的H5亚型高致病性禽流感病毒、H7N9亚型高致病性禽流感病毒、H9亚型禽流感病毒HA基因核苷酸序列,在其保守区设计了引物和探针,建立了针对H5和H7N9亚型高致病性禽流感病毒以及H9亚型禽流感病毒实时荧光定量RT‑PCR核酸快速检测方法。本发明所提供的H5和H7N9亚型高致病性禽流感病毒以及H9亚型禽流感病毒实时荧光RT‑PCR方法具有灵敏度高、检测时间短,不需要电泳等开放环节,只需一台荧光PCR仪即可在一个密闭反应管中完成三种亚型禽流感病毒的检测,且在检测过程中可实时查看反应曲线,对结果作出快速判断。

    一种区分H7N9亚型禽流感病毒强弱毒的快速检测方法

    公开(公告)号:CN109680101B

    公开(公告)日:2022-05-17

    申请号:CN201910058267.9

    申请日:2019-01-22

    Inventor: 蒋文明 刘华雷

    Abstract: 本发明提供一种区分H7N9亚型禽流感病毒强弱毒的快速检测方法,通过比对了近年来分离到的H7N9亚型禽流感病毒HA和NA基因核苷酸序列,分别在其保守区设计了引物和探针,建立了可以区分H7N9亚型禽流感病毒强弱毒的实时荧光定量RT‑PCR核酸快速检测方法。本发明所提供的区分H7N9亚型禽流感病毒强弱毒的实时荧光RT‑PCR方法能够在同一反应管中检测区分出H7亚型禽流感病毒的强毒、弱毒,还能检测出N9亚型禽流感病毒。具有灵敏度高、检测时间短,不需要电泳等开放环节,只需一台荧光PCR仪即可在密闭反应管中完成,且在检测过程中可实时查看反应曲线,对结果作出快速判断。

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