公开(公告)号：CN117887760A

公开(公告)日：2024-04-16

申请号：CN202410089040.1

申请日：2024-01-22

Applicant: 中国医学科学院北京协和医院 ,  中国医学科学院医学实验动物研究所

Inventor： 柳青 ,  马元武 ,  张旭 ,  张信哲 ,  谌浩东 ,  王高杰

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/89 ,  A01K67/0278 ,  C12N15/113 ,  C12N15/55

Abstract: 本发明提供了一种SQSTM1/p62基因新致病突变c.1143delC的敲入小鼠模型及其构建方法，所述方法包括：获得核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的gRNA1和核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的gRNA2；获得有活性的Cas9mRNA；将所述gRNA、Cas9mRNA和核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的打靶供体(doner)混合后显微注射到小鼠受精卵中，获得F0代小鼠；选择F0代阳性小鼠与野生型小鼠进行交配，获得具有稳定基因型的F1代小鼠；后筛选获得SQSTM1/p62基因突变敲入模式小鼠。该方法基因编辑效率高，可表达人SQSTM1/p62突变蛋白。

公开(公告)号：CN116042634A

公开(公告)日：2023-05-02

申请号：CN202211313920.X

申请日：2022-10-25

Applicant: 中国医学科学院医学实验动物研究所

Inventor： 马元武 ,  齐晓龙 ,  张旭 ,  董伟 ,  孔维宁 ,  张连峰

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供一种用于建立mtDNA编码基因条件敲除大鼠的方法。利用DdCBE碱基编辑工具，使大鼠mtDNA编码基因密码子TGA(编码氨基酸W)或CAA(编码氨基酸Q)转变为终止密码子TAA，导致翻译提前终止。通过CRISPR/Cas9技术将Cre依赖性表达的LSL‑DdCBE元件敲入大鼠Rosa26位点，建立mtDNA编码基因条件敲除大鼠。通过与Cre工具大鼠杂交，激活DdCBE的表达和编辑，从而实现组织或细胞特异性mtDNA编码基因的敲除。本发明针对mtDNA编码基因敲除的技术限制，通过DdCBE工具和Cre‑loxP系统的联合应用，开发一种能够在大鼠中实现条件性敲除mtDNA编码基因的方法。

公开(公告)号：CN113699160A

公开(公告)日：2021-11-26

申请号：CN202110937125.7

申请日：2021-08-16

Applicant: 中国医学科学院医学实验动物研究所

Inventor： 马元武 ,  齐晓龙 ,  张旭 ,  陈炜 ,  张连峰

IPC: C12N15/12 ,  C12Q1/6888

Abstract: 大鼠线粒体基因G14098A的突变方法及其应用。本发明利用DdCBE碱基编辑技术，依据目标突变位点，设计两条包含突变位点的TALE靶点识别序列，通过筛选DdCBE组合，将DdCBE定位到相应的目标序列以使目标碱基由G突变为A。本发明的突变方法具有高精确性和低脱靶效应。本发明通过大鼠受精卵显微注射，能够实现大鼠的线粒体基因第14098位的G突变为A。雌性突变大鼠与野生型大鼠杂交进行突变传代分析，表明突变能够稳定传代；行为学和心脏功能评价证实该大鼠模型具有人类线粒体突变疾病表型。

公开(公告)号：CN116732244A

公开(公告)日：2023-09-12

申请号：CN202310356604.9

申请日：2023-04-06

Applicant: 中国医学科学院医学实验动物研究所

Inventor： 马元武 ,  孔维宁 ,  张旭 ,  齐晓龙 ,  吕丹 ,  李克如 ,  向志光 ,  苏磊

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 基于CRISPR/Cas12a的大鼠细小病毒H‑1株的快速荧光检测，包括：针对大鼠H‑1病毒基因组保守序列，利用重组酶聚合酶扩增技术（RPA），筛选RPA特异性扩增引物对进行靶序列扩增，从而得到相应的RPA特异性扩增片段；设计靶向于所得RPA特异性扩增片段的基于CRISPR/Cas12a的crRNA；所设计的crRNA介导Cas12a蛋白靶向于所得RPA特异性扩增片段后激活Cas12a蛋白的反式切割活性，通过5’端标记荧光基团、3’端标记淬灭基团的单链DNA荧光探针将序列信息转化为用于大鼠H‑1病毒荧光检测的荧光信息。本发明实现了对SPF级大鼠H‑1病毒的高灵敏度、高特异性且可视化检测，脱离了对实验室精密仪器的依赖。

公开(公告)号：CN113699160B

公开(公告)日：2023-03-31

申请号：CN202110937125.7

申请日：2021-08-16

Applicant: 中国医学科学院医学实验动物研究所

Inventor： 马元武 ,  齐晓龙 ,  张旭 ,  陈炜 ,  张连峰

IPC: C12N15/12 ,  C12Q1/6888

Abstract: 大鼠线粒体基因G14098A的突变方法及其应用。本发明利用DdCBE碱基编辑技术，依据目标突变位点，设计两条包含突变位点的TALE靶点识别序列，通过筛选DdCBE组合，将DdCBE定位到相应的目标序列以使目标碱基由G突变为A。本发明的突变方法具有高精确性和低脱靶效应。本发明通过大鼠受精卵显微注射，能够实现大鼠的线粒体基因第14098位的G突变为A。雌性突变大鼠与野生型大鼠杂交进行突变传代分析，表明突变能够稳定传代；行为学和心脏功能评价证实该大鼠模型具有人类线粒体突变疾病表型。

公开(公告)号：CN115612689A

公开(公告)日：2023-01-17

申请号：CN202211223123.2

申请日：2022-10-08

Applicant: 中国医学科学院医学实验动物研究所

Inventor： 马元武 ,  齐晓龙 ,  张旭 ,  孔维宁 ,  吕丹 ,  张连峰

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  A01K67/027

Abstract: 大鼠线粒体基因aC(aCC)位点特异性碱基编辑及其应用。本发明利用DdCBE碱基编辑技术，针对aC(aCC)位点，在其两侧设计TALE识别靶点序列，通过筛选四种DdCBE组合方式，鉴定出具有aC(aCC)位点特异性的DdCBE组合(L1333C+R1333N)；通过大鼠受精卵显微注射，能够实现大鼠线粒体基因第007位aC靶点C·G到T·A的突变；携带该突变的F0雌性大鼠与野生型雄性大鼠杂交进行传代分析，证明获得的突变能够稳定的母系遗传；进一步的行为学和心脏功能评价证实该大鼠模型具有人类线粒体同源位点突变疾病表型。

公开(公告)号：CN207052301U

公开(公告)日：2018-02-27

申请号：CN201720624002.7

申请日：2017-06-01

Applicant: 中国医学科学院北京协和医院

Inventor： 于晓初 ,  赵玉沛 ,  王以朋 ,  黄宇光 ,  赵生秀 ,  吴欣娟 ,  常青 ,  孙学勤 ,  张旭

IPC: G16H40/00 ,  G06K17/00

Abstract: 本实用新型公开了一种医院不良事件管理系统，包括系统服务器，医疗终端、护理终端和医技终端，所述系统服务器通过有线或无线网络分别与医疗终端、护理终端和医技终端连接。通过系统服务器、医疗终端、护理终端和医技终端的有机结合，实现对医院不良事件的综合管理，避免医疗差错的再次发生，进而避免由此引起的医疗事故。