公开(公告)号：CN116732244A

公开(公告)日：2023-09-12

申请号：CN202310356604.9

申请日：2023-04-06

Applicant: 中国医学科学院医学实验动物研究所

Inventor： 马元武 ,  孔维宁 ,  张旭 ,  齐晓龙 ,  吕丹 ,  李克如 ,  向志光 ,  苏磊

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 基于CRISPR/Cas12a的大鼠细小病毒H‑1株的快速荧光检测，包括：针对大鼠H‑1病毒基因组保守序列，利用重组酶聚合酶扩增技术（RPA），筛选RPA特异性扩增引物对进行靶序列扩增，从而得到相应的RPA特异性扩增片段；设计靶向于所得RPA特异性扩增片段的基于CRISPR/Cas12a的crRNA；所设计的crRNA介导Cas12a蛋白靶向于所得RPA特异性扩增片段后激活Cas12a蛋白的反式切割活性，通过5’端标记荧光基团、3’端标记淬灭基团的单链DNA荧光探针将序列信息转化为用于大鼠H‑1病毒荧光检测的荧光信息。本发明实现了对SPF级大鼠H‑1病毒的高灵敏度、高特异性且可视化检测，脱离了对实验室精密仪器的依赖。

公开(公告)号：CN115612689A

公开(公告)日：2023-01-17

申请号：CN202211223123.2

申请日：2022-10-08

Applicant: 中国医学科学院医学实验动物研究所

Inventor： 马元武 ,  齐晓龙 ,  张旭 ,  孔维宁 ,  吕丹 ,  张连峰

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/85 ,  A01K67/027

Abstract: 大鼠线粒体基因aC(aCC)位点特异性碱基编辑及其应用。本发明利用DdCBE碱基编辑技术，针对aC(aCC)位点，在其两侧设计TALE识别靶点序列，通过筛选四种DdCBE组合方式，鉴定出具有aC(aCC)位点特异性的DdCBE组合(L1333C+R1333N)；通过大鼠受精卵显微注射，能够实现大鼠线粒体基因第007位aC靶点C·G到T·A的突变；携带该突变的F0雌性大鼠与野生型雄性大鼠杂交进行传代分析，证明获得的突变能够稳定的母系遗传；进一步的行为学和心脏功能评价证实该大鼠模型具有人类线粒体同源位点突变疾病表型。