基于CRISPR/Cas12a的大鼠细小病毒H-1株的快速荧光检测

    公开(公告)号:CN116732244A

    公开(公告)日:2023-09-12

    申请号:CN202310356604.9

    申请日:2023-04-06

    Abstract: 基于CRISPR/Cas12a的大鼠细小病毒H‑1株的快速荧光检测,包括:针对大鼠H‑1病毒基因组保守序列,利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA),筛选RPA特异性扩增引物对进行靶序列扩增,从而得到相应的RPA特异性扩增片段;设计靶向于所得RPA特异性扩增片段的基于CRISPR/Cas12a的crRNA;所设计的crRNA介导Cas12a蛋白靶向于所得RPA特异性扩增片段后激活Cas12a蛋白的反式切割活性,通过5’端标记荧光基团、3’端标记淬灭基团的单链DNA荧光探针将序列信息转化为用于大鼠H‑1病毒荧光检测的荧光信息。本发明实现了对SPF级大鼠H‑1病毒的高灵敏度、高特异性且可视化检测,脱离了对实验室精密仪器的依赖。

    大鼠线粒体基因G14098A的突变方法及其应用

    公开(公告)号:CN113699160B

    公开(公告)日:2023-03-31

    申请号:CN202110937125.7

    申请日:2021-08-16

    Abstract: 大鼠线粒体基因G14098A的突变方法及其应用。本发明利用DdCBE碱基编辑技术,依据目标突变位点,设计两条包含突变位点的TALE靶点识别序列,通过筛选DdCBE组合,将DdCBE定位到相应的目标序列以使目标碱基由G突变为A。本发明的突变方法具有高精确性和低脱靶效应。本发明通过大鼠受精卵显微注射,能够实现大鼠的线粒体基因第14098位的G突变为A。雌性突变大鼠与野生型大鼠杂交进行突变传代分析,表明突变能够稳定传代;行为学和心脏功能评价证实该大鼠模型具有人类线粒体突变疾病表型。

    用于建立mtDNA编码基因条件敲除大鼠的方法

    公开(公告)号:CN116042634A

    公开(公告)日:2023-05-02

    申请号:CN202211313920.X

    申请日:2022-10-25

    Abstract: 本发明提供一种用于建立mtDNA编码基因条件敲除大鼠的方法。利用DdCBE碱基编辑工具,使大鼠mtDNA编码基因密码子TGA(编码氨基酸W)或CAA(编码氨基酸Q)转变为终止密码子TAA,导致翻译提前终止。通过CRISPR/Cas9技术将Cre依赖性表达的LSL‑DdCBE元件敲入大鼠Rosa26位点,建立mtDNA编码基因条件敲除大鼠。通过与Cre工具大鼠杂交,激活DdCBE的表达和编辑,从而实现组织或细胞特异性mtDNA编码基因的敲除。本发明针对mtDNA编码基因敲除的技术限制,通过DdCBE工具和Cre‑loxP系统的联合应用,开发一种能够在大鼠中实现条件性敲除mtDNA编码基因的方法。

    大鼠线粒体基因G14098A的突变方法及其应用

    公开(公告)号:CN113699160A

    公开(公告)日:2021-11-26

    申请号:CN202110937125.7

    申请日:2021-08-16

    Abstract: 大鼠线粒体基因G14098A的突变方法及其应用。本发明利用DdCBE碱基编辑技术,依据目标突变位点,设计两条包含突变位点的TALE靶点识别序列,通过筛选DdCBE组合,将DdCBE定位到相应的目标序列以使目标碱基由G突变为A。本发明的突变方法具有高精确性和低脱靶效应。本发明通过大鼠受精卵显微注射,能够实现大鼠的线粒体基因第14098位的G突变为A。雌性突变大鼠与野生型大鼠杂交进行突变传代分析,表明突变能够稳定传代;行为学和心脏功能评价证实该大鼠模型具有人类线粒体突变疾病表型。

    一种转座载体及其构建方法

    公开(公告)号:CN102286514A

    公开(公告)日:2011-12-21

    申请号:CN201110203354.2

    申请日:2011-07-20

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,公开了一种转座载体及其制备方法。本发明所述转座载体融合了PB和SB两种DNA转座子的特性,能够在PB转座酶和SB转座酶条件下转座,同时整合了包括剪接受体、报告基因与真核生物抗性基因的融合基因和SV40的多聚腺苷酸加尾序列的基因捕获阅读框,用以在转座过程中实现基因的插入突变,可广泛应用于小鼠、大鼠、猪等哺乳动物的基因突变模型的建立及基因组内大规模基因功能筛选。本发明所述转座载体还包括loxp位点和Frt位点序列,可以实现转座后近距离DNA片段的条件性敲除,应用于小鼠、大鼠、猪等哺乳动物的大片段DNA序列的条件性缺失模型建立。

    一种适用于大小鼠的食物迷宫行为学测试装置

    公开(公告)号:CN217446235U

    公开(公告)日:2022-09-20

    申请号:CN202221122565.3

    申请日:2022-05-11

    Abstract: 本实用新型涉及一种适用于大小鼠的食物迷宫行为学测试装置,其包括测试装置本体、阻挡结构和遮光结构;所述测试装置本体内部为中空,所述阻挡结构设置在测试装置本体的内部,所述阻挡结构与测试装置本体可拆卸连接,所述遮光结构连接在测试装置本体的上部。本装置既可以用于检测了第一次学习结束后24h、48h和72h甚至一周时大小鼠的长时记忆。也可以采用训练结束后数分钟的成绩评估大小鼠短时记忆。同时,潜伏期和错误次数结合也可以更好的用于鉴别大小鼠的学习记忆能力差异。

Patent Agency Ranking