公开(公告)号：CN119776589A

公开(公告)日：2025-04-08

申请号：CN202510199563.6

申请日：2025-02-24

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 朱启运 ,  杨鹏飞 ,  徐帅 ,  凌东奇 ,  柳煊博

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种基于RT‑RPA和CRISPR/Cas12a的烈性病毒核酸快速检测体系、试剂盒及其使用方法。所述烈性病毒为刚果热病毒、裂谷热病毒、尼帕病毒或亨德拉病毒；所述检测体系包括RT‑RPA等温扩增体系和CRISPR/Cas12a反式切割检测体系；所述RT‑RPA等温扩增体系包括基于病毒核酸设计的RT‑RPA正向引物和反向引物；所述CRISPR/Cas12a反式切割检测体系包括基于病毒核酸设计的crRNA序列。所述试剂盒包括所述RT‑RPA等温扩增体系和CRISPR/Cas12a反式切割检测体系。本发明首次基于RT‑RPA和CRISPR/Cas12a系统检测四种烈性病毒核酸，具有特异性强、灵敏度高、简单快速、不依赖复杂大型仪器等优点，可在临床样品检测中广泛应用。

公开(公告)号：CN119753237A

公开(公告)日：2025-04-04

申请号：CN202510199552.8

申请日：2025-02-24

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 朱启运 ,  杨鹏飞 ,  徐帅 ,  凌东奇 ,  柳煊博

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种尼帕病毒Taqman探针荧光定量PCR检测试剂盒及其应用，通过设计尼帕病毒的特异性引物及对应的荧光探针，之后利用已知病毒基因组序列选取病毒的保守基因序列，利用基因克隆技术构建含有该保守基因序列的标准重组质粒，接着在对重组质粒进行鉴定后，制备了质粒标准品，进而获得标准曲线，并对PCR方法的灵敏度、特异性和重复性进行了评估，最后将荧光定量PCR反应体系形成检测试剂盒。所述试剂盒检测操作简单、高效，可实现尼帕病毒的快速检测，且具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，可在临床核酸样品检测中广泛应用。

公开(公告)号：CN119799981A

公开(公告)日：2025-04-11

申请号：CN202510199553.2

申请日：2025-02-24

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 朱启运 ,  杨鹏飞 ,  徐帅 ,  凌东奇 ,  柳煊博

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种亨德拉病毒Taqman探针荧光定量PCR检测试剂盒及其应用，通过设计亨德拉病毒的特异性引物及对应的荧光探针，之后利用已知病毒基因组序列选取病毒的保守基因序列，利用基因克隆技术构建含有该保守基因序列的标准重组质粒，接着在对重组质粒进行鉴定后，制备了质粒标准品，进而获得标准曲线，并对PCR方法的灵敏度、特异性和重复性进行了评估，最后将荧光定量PCR反应体系形成检测试剂盒。所述试剂盒检测操作简单、高效，可实现亨德拉病毒的快速检测，且具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，可在临床核酸样品检测中广泛应用。