公开(公告)号：CN120053629A

公开(公告)日：2025-05-30

申请号：CN202510187942.3

申请日：2025-02-20

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 杨帆 ,  郑海学 ,  刘泓屹 ,  张伟 ,  李敏 ,  王良锋 ,  古涛鸣 ,  曹伟军 ,  周婷婷 ,  赵振娜

IPC: A61K39/135 ,  C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N7/00 ,  C12N15/12 ,  A61K39/125 ,  A61P31/14 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供了KRT31基因敲除的细胞系与其在促进小RNA病毒科病毒复制和/或生产小RNA病毒科病毒疫苗中的应用，属于基因工程技术领域。本发明提供了一种KRT31基因或其编码蛋白作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用。上调所述KRT31基因表达水平能够抑制小RNA病毒科病毒复制，降低所述KRT31基因表达水平能够促进小RNA病毒科病毒复制。本发明采用sgRNA敲除KRT31基因制备基因编码蛋白功能丧失的细胞系促进小RNA病毒科病毒的复制，提高病毒滴度和抗原产量，有助于高效制备小RNA病毒科病毒疫苗。

公开(公告)号：CN119979607A

公开(公告)日：2025-05-13

申请号：CN202510190001.5

申请日：2025-02-20

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 郑海学 ,  杨帆 ,  赵晓义 ,  刘泓屹 ,  曹伟军 ,  张伟 ,  王良锋 ,  古涛鸣 ,  李敏 ,  朱紫祥 ,  田宏 ,  何继军 ,  郭建宏

IPC: C12N15/85 ,  C12N7/01 ,  C12N15/57 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种稳定传代的重组口蹄疫病毒毒株及构建方法和应用，属于生物医药技术领域。本发明根据宿主细胞KRT31蛋白对FMDV的复制抑制性，通过在L蛋白中引入点突变，消除KRT31蛋白降解L蛋白及抑制FMDV复制的能力。本发明成功构建并拯救了L蛋白关键氨基酸位点突变的重组口蹄疫病毒株，突变位点能稳定遗传，且不影响口蹄疫病毒的复制，提高了病毒滴度，具有良好的生产性能，可用于制备重组口蹄疫疫苗株。

公开(公告)号：CN119979484A

公开(公告)日：2025-05-13

申请号：CN202510189224.X

申请日：2025-02-20

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 郑海学 ,  杨帆 ,  赵晓义 ,  蔡建涛 ,  曹伟军 ,  张伟 ,  刘泓屹 ,  陈治彤 ,  朱紫祥 ,  田宏 ,  何继军 ,  郭建宏

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/85 ,  C12N15/57 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明提供了一种高抗原产量的重组口蹄疫病毒株及其构建方法和应用，属于生物技术领域。一种重组口蹄疫病毒株，其中L蛋白是第108位氨基酸发生突变或缺失的突变L蛋白。本发明发现宿主蛋白RAB20过表达抑制FMDV的复制，且通过蛋白酶体通路降解L蛋白，进而抑制病毒复制；本发明通过在FMDV L蛋白中对关键氨基酸位点(108)进行突变，构建了不被宿主蛋白RAB20抑制复制的重组口蹄疫病毒株，所述重组病毒能够稳定传代，且在BHK‑21细胞上具有高病毒滴度的特性，提高了病毒滴度及抗原产量，能够用于FMDV疫苗制备，具备良好的应用前景。

公开(公告)号：CN120041452A

公开(公告)日：2025-05-27

申请号：CN202510190008.7

申请日：2025-02-20

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 杨帆 ,  郑海学 ,  张伟 ,  陈治彤 ,  曹伟军 ,  蔡建涛 ,  刘泓屹 ,  吕岳芹 ,  王伟 ,  周嘉慧 ,  孙琬珈

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N7/00 ,  C12N15/54 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明提供了POLR2H基因或其编码蛋白作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用，属于基因工程技术领域。本发明提供了一种POLR2H基因或其编码蛋白作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用。上调所述POLR2H基因表达水平能够抑制小RNA病毒科病毒复制，降低所述POLR2H基因表达水平能够促进小RNA病毒科病毒复制。本发明制备的POLR2H基因编码蛋白功能丧失细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒的复制，提高病毒滴度和抗原产量，有助于制备高效的疫苗。

公开(公告)号：CN120026026A

公开(公告)日：2025-05-23

申请号：CN202510190006.8

申请日：2025-02-20

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 杨帆 ,  郑海学 ,  陈治彤 ,  张伟 ,  曹伟军 ,  蔡建涛 ,  刘泓屹 ,  吕岳芹 ,  吴魏 ,  牛艺璇

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N7/00 ,  C12N15/12 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及CISD2基因作为靶点在调控小RNA病毒复制和/或疫苗生产中的应用，属于基因工程技术领域。本发明提供了CISD2蛋白或CISD2基因作为靶点在制备调控小RNA病毒科病毒复制产品和/或疫苗生产中的应用，通过上调CISD2基因的表达量抑制小RNA病毒科病毒的复制，降低CISD2基因的表达量促进小RNA病毒科病毒的复制。本发明提供了一种用于敲除CISD2基因的sgRNA，能够靶向敲除CISD2基因，获得CISD2基因编码蛋白功能丧失的细胞系，进一步用于小RNA病毒科病毒及其疫苗的生产，能显著促进小RNA病毒科病毒的复制，提高病毒滴度和抗原产量。

公开(公告)号：CN120026025A

公开(公告)日：2025-05-23

申请号：CN202510187919.4

申请日：2025-02-20

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 杨帆 ,  郑海学 ,  蔡建涛 ,  张伟 ,  曹伟军 ,  陈治彤 ,  刘泓屹 ,  吕岳芹 ,  孙琬珈 ,  周嘉慧 ,  董星艳

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12N7/00 ,  C12N15/12 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明涉及敲除RAB20基因的sgRNA、RAB20基因敲除细胞系及其在病毒和/或疫苗生产中的应用，属于基因工程技术领域。本发明发现在宿主细胞中过表达RAB20会抑制小RNA病毒科病毒的复制，而抑制宿主细胞中RAB20基因表达能促进小RNA病毒科病毒的复制。本发明提供了一种特异性靶向RAB20基因的sgRNA，能够特异性靶向RAB20基因，实现RAB20基因的敲除，获得RAB20基因敲除细胞系，进一步将RAB20基因敲除细胞系作为小RNA病毒科病毒及其疫苗的生产细胞系，能够显著促进小RNA病毒科病毒的复制，提高病毒滴度和抗原产量。

公开(公告)号：CN118526594A

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202410761843.7

申请日：2024-06-13

Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)

Inventor： 郑海学 ,  杨帆 ,  刘泓屹 ,  张伟 ,  李敏 ,  曹伟军 ,  陈治彤 ,  蔡建涛 ,  吕岳芹 ,  赵晓义 ,  邵文华 ,  黄梦瑶 ,  陈创伟

IPC: A61K45/00 ,  A61K48/00 ,  A61P31/14 ,  C12N15/867 ,  C12N15/113 ,  C12N5/10 ,  C12N7/00 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种TRIM7基因/蛋白为靶点在筛选抑制口蹄疫病毒复制的药物中的应用。具体为：本发明利用CRISPR/Cas9系统构建了TRIM7敲除细胞系，获得的单克隆细胞系对口蹄疫病毒具有抗性表型，能够显著抑制小RNA病毒科病毒在细胞内的复制，而且TRIM7基因的敲除并不影响宿主细胞的正常生长，为研究TRIM7基因在细胞内调控病原微生物复制的分子机制提供了研究工具和材料，也可用于抗小RNA病毒科病毒的动物育种，具有广阔的应用前景。