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公开(公告)号:CN119979613A
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202510154039.7
申请日:2025-02-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达猪源PIgR SC片段和J链的细胞系及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。所述构建方法包括:把猪源PIgR的SC片段基因和J链基因的编码序列插入慢病毒载体质粒,得到PIgR的SC片段和J链过表达的慢病毒载体质粒;将所述慢病毒载体质粒与PSPAX2和PMD2.G质粒共转染,得到重组慢病毒;将所述重组慢病毒侵染细胞,得到阳性细胞后进行扩大培养,得到所述稳定表达猪源PIgR的SC片段和J链的细胞系。本发明构建了稳定表达猪PIgR的SC片段和J链的细胞系,使基因工程技术制备SIgA抗体快捷高效。
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公开(公告)号:CN119979607A
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202510190001.5
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种稳定传代的重组口蹄疫病毒毒株及构建方法和应用,属于生物医药技术领域。本发明根据宿主细胞KRT31蛋白对FMDV的复制抑制性,通过在L蛋白中引入点突变,消除KRT31蛋白降解L蛋白及抑制FMDV复制的能力。本发明成功构建并拯救了L蛋白关键氨基酸位点突变的重组口蹄疫病毒株,突变位点能稳定遗传,且不影响口蹄疫病毒的复制,提高了病毒滴度,具有良好的生产性能,可用于制备重组口蹄疫疫苗株。
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公开(公告)号:CN119950676A
公开(公告)日:2025-05-09
申请号:CN202510314546.2
申请日:2025-03-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及抗菌肽WK‑13‑3D在制备抑制日本脑炎病毒感染药物中的应用。本发明意外发现抗菌肽WK‑13‑3D可剂量依赖性地显著降低JEV RNA的产生、抑制JEV非结构蛋白NS3的表达、显著降低感染性JEV的产量、抑制JEV粘附宿主细胞、抗病毒活性的IC50值为2.339μM,能够抑制日本脑炎病毒的感染,可作为治疗日本脑炎病毒感染的药物,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN119859619A
公开(公告)日:2025-04-22
申请号:CN202510083443.X
申请日:2025-01-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及一株NS1微管上携带绿色荧光蛋白的重组蓝舌病毒、构建方法及应用。本发明在野生型蓝舌病毒非结构蛋白NS1的第534和535位氨基酸之间插入增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因,构建获得了NS1重组蓝舌病毒BTV‑NS1‑534eGFP;所述重组蓝舌病毒BTV1‑NS1‑534eGFP能形成与野生型蓝舌病毒(BTV1‑WT)相似的病毒样微管,与BTV1‑WT的生长特性没有明显区别,并且能够正确表达增强型绿色荧光蛋白;可用于BTV感染细胞后NS1蛋白的示踪研究,同时可用于BTV的病毒中和实验及病毒含量的可视化定量检测等。
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公开(公告)号:CN119792280A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202510038950.1
申请日:2025-01-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K31/4184 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种化合物AJ2‑30在制备抗病毒药物中的应用。本发明意外发现,在培养ASFV的培养基中加入化合物AJ2‑30,能够使ASFV的复制水平降低,表明化合物AJ2‑30具有抑制ASFV复制的作用,可用于制备抗ASFV感染的药物或佐剂,用于抑制ASFV的复制,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN119753237A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202510199552.8
申请日:2025-02-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种尼帕病毒Taqman探针荧光定量PCR检测试剂盒及其应用,通过设计尼帕病毒的特异性引物及对应的荧光探针,之后利用已知病毒基因组序列选取病毒的保守基因序列,利用基因克隆技术构建含有该保守基因序列的标准重组质粒,接着在对重组质粒进行鉴定后,制备了质粒标准品,进而获得标准曲线,并对PCR方法的灵敏度、特异性和重复性进行了评估,最后将荧光定量PCR反应体系形成检测试剂盒。所述试剂盒检测操作简单、高效,可实现尼帕病毒的快速检测,且具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,可在临床核酸样品检测中广泛应用。
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公开(公告)号:CN118255903B
公开(公告)日:2025-03-11
申请号:CN202410557272.5
申请日:2024-05-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒抗体的融合抗原、制备方法及检测试剂盒。所述融合抗原由纳米荧光素酶的两个亚基LgBiT和SmBiT分别与非洲猪瘟病毒p30蛋白和Protein G的C2结构域融合表达的SmBiT/p30和LgBiT/C2组成。所述融合抗原能够与针对非洲猪瘟病毒p30蛋白的特异性抗体结合,形成功能性的荧光素酶,在底物的催化作用下发光。本发明利用纳米荧光素酶亚基结构互补形成功能性荧光素酶的原理,将其用于非洲猪瘟病毒抗体的检测具备较高的特异性和敏感性,并可在较短的时间内完成抗体的检测,为非洲猪瘟的防控和净化提供了技术手段。
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公开(公告)号:CN119574863A
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202411562087.1
申请日:2024-11-04
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N21/76 , G01N33/68 , G01N33/577 , C07K19/00 , C12N15/85
Abstract: 本发明公开一种用于非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p30抗体检测的竞争化学发光检测试剂盒及其应用。本发明利用LgBiT与HiBiT互补结合形成荧光素酶催化底物furimazine产生化学发光的原理,将ASFVp30单抗16‑5E7E8与HiBiT进行融合表达后,利用竞争化学发光法检测血清中ASFVp30抗体。本发明的试剂盒用于检测ASFVp30抗体不仅灵敏度高、特异性好,而且操作简单、反应时间短,仅需20min就能快速有效地检测出待检血清中是否含有ASFVp30抗体,在ASFV抗体检测中具有很好的应用前景,为ASF的综合防治提供了技术手段。
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公开(公告)号:CN118561991B
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202410831817.7
申请日:2024-06-26
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种特异性识别非洲猪瘟病毒的纳米抗体及其制备方法和应用。本发明提供了一种特异性识别非洲猪瘟病毒的纳米抗体KR‑2,所述纳米抗体KR‑2是通过噬菌体展示纳米抗体文库的构建和筛选获得,为重链抗体可变区片段,具有SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。本发明所述纳米抗体与K205R蛋白具有较高的亲和力,且能够特异性识别非洲猪瘟病毒,可用于非洲猪瘟的诊断、预防或治疗。
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公开(公告)号:CN119552903A
公开(公告)日:2025-03-04
申请号:CN202411487655.6
申请日:2024-10-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于但不限于基因工程技术技术领域,公开了一种布鲁氏菌效应蛋白BspE基因缺失株的构建方法及应用,利用同源重组及SacB反向筛选技术构建BspE基因缺失株,以牛种布鲁氏菌A19疫苗株菌液为模板,PCR扩增得到BspE基因上、下游同源臂,将胶回收的BspE基因上、下游同源臂进行融合PCR扩增,将获得的融合片段与pUC19‑SacB质粒进行连接、转化,获得重组质粒pUC19‑ΔBspE。将该质粒电转化至牛种布鲁氏菌A19感受态细胞,经卡那抗性及蔗糖压力筛选,PCR鉴定及测序,所得阳性转化子即为牛种布鲁氏菌BspE缺失株,该缺失疫苗毒株提高了抗菌细胞因子及特异性布鲁氏菌抗体IgG的水平,是一种新型的布鲁氏菌候选减毒疫苗毒株,具有较好的市场前景。
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