梨转录因子PyHY5及其重组表达载体和应用

    公开(公告)号:CN109810181B

    公开(公告)日:2022-04-01

    申请号:CN201910008926.8

    申请日:2019-01-04

    Abstract: 本发明公开了梨转录因子PyHY5及其重组表达载体的应用。一种分离自‘红早酥’梨具有促进梨果皮花青苷生物合成功能的转录因子PyHY5基因,其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示,其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过农杆菌介导遗传转化方法将转录因子PyHY5与PyMYB114共转化草莓和梨果实,经生物学功能验证,表明本发明克隆的PyHY5基因与其辅助因子PyMYB114共同作用促进梨果皮花青苷转运的功能。PyHY5新功能的发现,为促进梨果皮花青苷积累的分子育种提供新的基因资源,为实施绿色农业提供新的遗传资源,该遗传资源的开发利用有利于降低农业成本和实现环境友好。

    一种快速添加或替换目的基因的蛋白标签的方法

    公开(公告)号:CN111850022A

    公开(公告)日:2020-10-30

    申请号:CN202010628191.1

    申请日:2020-07-02

    Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,公开了一种快速添加或替换目的基因的蛋白标签的方法,包括引物设计、目的基因和蛋白标签片段的扩增、表达载体双酶切及重组酶处理、转化、阳性转化子检测及测序比对。本发明在目的基因和蛋白标签的序列片段上,分别设计两对引物F1、R1和F2、R2,其中F1与R2要分别和表达载体插入位置要有至少15bp的同源臂,R1与F2之间也要有至少15bp的同源臂。目的基因片段、蛋白标签和载体片段在重组酶反应后,利用大肠杆菌转化体系就可以得到同时含有目的基因和添加蛋白标签的环状质粒,该方法适用于构建各种多标签表达载体,具有简单、快速和高效等特点。

    梨果实不同发育时期荧光定量内参基因的筛选及应用

    公开(公告)号:CN107190062B

    公开(公告)日:2020-10-23

    申请号:CN201710415054.8

    申请日:2017-06-05

    Abstract: 本发明公开了梨果实不同发育时期荧光定量内参基因的筛选及应用,本发明涉及梨分子生物学研究领域。根据多个品种梨果实动态RNA‑Seq测序结果、后期实验验证及数据分析,针对性的获得了在翠冠、丰水和雪青梨果实不同发育时期中比常用的管家基因更为稳定的内参基因,最大程度地减小了由于内参基因的选择造成样品之间和样品内部的差异,能够实现对目标基因表达水平的校正和标准化,以达到对梨果实功能基因表达的精确定量。

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