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公开(公告)号：CN116199758A
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202310192142.1
申请日：2023-03-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/84 , C12N1/21 , C12N15/11 , A01H5/08 , A01H5/02 , A01H5/00 , A01H6/20 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PbrMYB24及其促进石细胞中木质素和纤维素合成应用。分离自‘砀山酥梨’的转录因子PbrMYB24基因，其核苷酸序列为SEQ IDNo.1所示。通过在梨果实中瞬时过量表达，证实了PbrMYB24可以促进果实石细胞和木质素和纤维素的积累过程；过表达PbrMYB24的转基因梨果肉愈伤组织和拟南芥花序茎中，木质素含量和纤维素含量显著增加，同时间苯三酚盐酸染色，翻红固绿染色和卡尔科弗卢尔荧光染色信号显著增强。由此证明PbrMYB24基因参与调控梨果实石细胞中木质素和纤维素的形成。
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公开(公告)号：CN114891793A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210660916.4
申请日：2022-06-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种梨CRISPRa基因转录激活系统及其应用，属于植物基因工程技术领域。包括靶基因的选择；sgRNA的设计；CRISPRa基因转录激活载体的构建；梨愈伤组织的遗传转化；愈伤组织中梨CRISPRa基因转录激活倍数的统计与分析；靶基因转录激活的愈伤组织表型鉴定与分析。本发明构建了一种高效的梨CRISPRa基因转录激活系统，并实现了梨花青苷代谢通路靶基因PybZIPa的单基因激活以及PyMYB114和PybHLH3双基因激活，PyDFR、PyANS和PyUFGT的多基因同时激活，得到了与预期相符的基因功能获得型的表型和花青苷合成结构基因的表达模式，对梨花青苷代谢通路相关靶基因进行了功能鉴定，为梨中基因功能研究和分子遗传育种提供了更高效简便的途径。
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公开(公告)号：CN112876550A
公开(公告)日：2021-06-01
申请号：CN202110159812.0
申请日：2021-02-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了梨PbrSTONE基因及其应用。一种分离自‘砀山酥梨’具有调控梨果实石细胞发育的PbrSTONE基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过在梨果实中瞬时过量表达以及基因沉默技术，证实了PbrSTONE可以改变果实石细胞和木质素的积累过程；过表达PbrSTONE的转基因拟南芥花序茎中，木质素含量及其G型单体显著增加，同时木质化束间纤维细胞层数增多，导管细胞的次生细胞壁显著加厚。由此证明PbrSTONE基因参与调控梨果实石细胞木质素的形成。
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公开(公告)号：CN109810990A
公开(公告)日：2019-05-28
申请号：CN201910008908.X
申请日：2019-01-04
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/54 , C12N9/10 , C12N15/74 , C12N1/21 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/74 , C12N15/113 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PyGSTf12及其重组表达载体和应用。一种分别分离自‘红早酥’及其绿色芽变的梨PyGSTf12和它的启动子序列差异，以此作为鉴定红绿果皮的分子标记的应用，其核苷酸序列分别如SEQ ID No.31所示和SEQ ID No.32。通过双荧光素酶报道系统，农杆菌介导瞬时遗传转化方法证明了PyGSTf12受转录因子PyHY5和PyMYB114共转化促进草莓和梨果实花青苷的积累，进而结合PyGSTf12启动子促进花青苷的转运的功能。PyGSTf12基因的发现，为促进梨果皮花青苷合成的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源，该遗传资源的开发利用有利于降低农业成本和实现环境友好。
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公开(公告)号：CN111402199B
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202010095277.2
申请日：2020-02-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公布了一种基于计算机图像处理的梨果实石细胞表型检测方法，通过采集盐酸间苯三酚染色的梨果实切面图像，对图像进行调参变成灰度值图像，使用阈值分割和提取图像轮廓，统计图像中石细胞数量、大小和面积。本发明不仅可以分析石细胞数量，还可以分析石细胞大小、面积和梨果实切面面积，进而分析出石细胞密度，相较于传统的盐酸冷冻分离法和酶解法，本方法提高了石细胞性状测量时的工作效率，丰富了石细胞性状的统计数据，降低了人工测量的误差和研究成本，对梨种质评估和育种有着深远的意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112876550B
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202110159812.0
申请日：2021-02-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了梨PbrSTONE基因及其应用。一种分离自‘砀山酥梨’具有调控梨果实石细胞发育的PbrSTONE基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过在梨果实中瞬时过量表达以及基因沉默技术，证实了PbrSTONE可以改变果实石细胞和木质素的积累过程；过表达PbrSTONE的转基因拟南芥花序茎中，木质素含量及其G型单体显著增加，同时木质化束间纤维细胞层数增多，导管细胞的次生细胞壁显著加厚。由此证明PbrSTONE基因参与调控梨果实石细胞木质素的形成。
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公开(公告)号：CN109810181B
公开(公告)日：2022-04-01
申请号：CN201910008926.8
申请日：2019-01-04
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/08 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PyHY5及其重组表达载体的应用。一种分离自‘红早酥’梨具有促进梨果皮花青苷生物合成功能的转录因子PyHY5基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过农杆菌介导遗传转化方法将转录因子PyHY5与PyMYB114共转化草莓和梨果实，经生物学功能验证，表明本发明克隆的PyHY5基因与其辅助因子PyMYB114共同作用促进梨果皮花青苷转运的功能。PyHY5新功能的发现，为促进梨果皮花青苷积累的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源，该遗传资源的开发利用有利于降低农业成本和实现环境友好。
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公开(公告)号：CN107267522A
公开(公告)日：2017-10-20
申请号：CN201710485838.8
申请日：2017-06-23
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/08
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PyMYB114及其重组表达载体和应用。一种分离自‘八月红’梨具有促进植物器官脱落功能的转录因子PyMYB114基因，其核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2所示。通过农杆菌介导遗传瞬时转化方法把PyMYB114与它的辅助因子PybHLH3共同转化到烟草叶片，草莓和梨果实，都能促进花青苷的生物合成。这些结果表明本发明克隆的PyMYB114基因具有促进花青苷生物合成的功能。PyMYB114基因的发现，为促进红皮梨花青苷生物合成的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源。
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公开(公告)号：CN116083440A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202211240351.0
申请日：2022-10-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了梨PyBBX24基因单碱基突变的应用。一种分离自‘Max Red Bartlett’梨具有促进梨果皮花青苷生物合成功能的转录因子PyBBX24C544T，核苷酸序列为SEQ ID No.1所示。经分子生物学功能验证，表明本发明克隆的PyBBX24C544T基因具有促进花青苷合成的功能，该基因在其编码区域的第544位单碱基C到T的突变与梨果皮色泽获得性变异紧密关联。该基因的发现，为分子育种提供更高效地途径，为促进花青苷合成的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源，该遗传资源的开发利用有利于提高果实品质和营养价值，降低农业成本和实现环境友好。
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