一种双酶法不对称制备(R)-2-氯-1-(3-氯苯基)乙醇的应用

    公开(公告)号:CN104450801B

    公开(公告)日:2018-04-13

    申请号:CN201410759167.6

    申请日:2014-12-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种共表达羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶的大肠杆菌系统在不对称还原制备(R)‑2‑氯‑1‑(3‑氯苯基)乙醇中的应用。以含有羰基还原酶(SyS1)基因和葡萄糖脱氢酶(SyGDH)基因的共表达重组菌E.coil BL21(pETDuet‑Sygdh‑Sys1)为催化剂,并添加一定量的NADP+和葡萄糖,在缓冲溶液/二甲亚砜两相反应体系中实现不对称还原3‑氯苯酰甲基氯高效制备(R)‑2‑氯‑1‑(3‑氯苯基)乙醇。其收率为98%,产物的对映体过量(e.e.)>99%。

    一种添加二硫键以提高阿魏酸酯酶A热稳定性的方法

    公开(公告)号:CN104531729B

    公开(公告)日:2017-06-13

    申请号:CN201410758084.5

    申请日:2014-12-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明的目的是提供一种阿魏酸酯酶A热稳定性改造、突变阿魏酸酯酶A工程菌构建以及突变阿魏酸酯酶A高效异源表达的方法。根据来源于A.usamii E001阿魏酸酯酶A(AuFaeA)的空间结构设计突变A126C和N152C,得到突变阿魏酸酯酶A:AuFaeAA126C‑N152C,其成熟肽基因序列为SEQ ID NO:1,C126和C152可以形成一个二硫键。实验结果表明突变后该酶热稳定性有了明显的提高,为其它酶的改造提供新的技术路径,作为一种耐热型的酶制剂,该阿魏酸酯酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

    一种酶法制备(S)-环氧苯乙烷的方法

    公开(公告)号:CN105969837A

    公开(公告)日:2016-09-28

    申请号:CN201610535106.0

    申请日:2016-07-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种酶法制备(S)‑环氧苯乙烷的方法,属于生物催化技术领域。本发明在正己醇/缓冲液的双相体系中,利用来源于宇佐美曲霉的环氧化物水解酶催化外消旋环氧苯乙烷的水解动力学拆分,制备(S)‑环氧苯乙烷的方法;与单相反应体系相比,动力学拆分rac‑SO的浓度从24g/L提高至120g/L;时空产率从为3.1g/L/h提高至20.3g/L/h;动力学拆分120g/Lrac‑SO制备(S)‑SO的ee值从36.8%提高至98.3%,并实现了(S)‑SO的克级制备。本发明方法工艺简单、产物的对映体纯度和得率高、催化效率高和环境友好,具有较大工业化应用前景。

    一种N端替换提高米曲霉木聚糖酶(AoXyn11A)热稳定性的方法

    公开(公告)号:CN104388412A

    公开(公告)日:2015-03-04

    申请号:CN201410757519.4

    申请日:2014-12-10

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12N9/2482 C12Y302/01008

    Abstract: 本发明公开了一种N端替换提高米曲霉木聚糖酶热稳定性的方法。基于高性能计算机及其相关生物学软件对Aspergillus oryzae常温木聚糖酶AoXyn11A耐热性改造的理性设计,将AoXyn11A N端41个氨基酸替换成同一家族耐热木聚糖酶TfGH11 N端42个氨基酸,获得了一种耐热杂合木聚糖酶ATX11A,其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。该杂合酶基因ATx11A是采用大引物PCR技术由AoXyn11A和TfGH11基因的相应片段拼接而成的,其核苷酸序列为SEQ ID NO:2。将重组毕赤酵母GS115/ATx11A在30℃诱导72 h,期间每隔24 h添加1.0%(v/v)甲醇。表达的耐热杂合酶ATX11A的最适温度由AoXyn11A的50℃提高至65℃;在60℃处理1 h,ATX11A的半衰期由AoXyn11A的1.3 min延长至55 min。

    一种截短的甘露聚糖酶的设计与制备

    公开(公告)号:CN102994531A

    公开(公告)日:2013-03-27

    申请号:CN201210562588.0

    申请日:2012-12-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种截短的甘露聚糖酶的设计与制备。本发明提出了一种催化效率和表达水平较高的dAus Man5A截短酶的设计与构建的方法,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1,氨基酸序列为SEQ ID NO:2,相应的基因命名为dAusman5A。本发明还公开了截短酶工程菌的构建以及高效表达的方法,制备的截短酶具有表达水平和催化效率高的特性,具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

Patent Agency Ranking