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公开(公告)号：CN108048429B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201810033898.0
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开一种立体选择性提高的菜豆环氧水解酶突变体及构建方法，属于酶工程技术领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶进行单向定点突变，获得对映选择性与对映归一性提高的突变酶W102L。W102L对外消旋间氯环氧苯乙烷(rac‑mCSO)的最终eep，在25℃下从3.1％提高到81.7％。与野生型相比，W102L对外消旋对氯环氧苯乙烷rac‑pCSO的E值从2.6提高至25.5，对rac‑pCSO的对映选择性提高了9.8倍。
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公开(公告)号：CN107177563A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201710474276.7
申请日：2017-06-21
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0006 , C12N15/70 , C12P7/42 , C12Y101/01028
Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌来源的D‑乳酸脱氢酶及其应用，属于生物工程技术领域。本发明提供了一种D‑乳酸脱氢酶，并实现了该基因的异源表达。通过构建含有该基因的重组质粒pET‑28a(+)‑LcldhD,将其转化至大肠杆菌中，获得了含有表达质粒pET‑28a(+)‑LcldhD的重组大肠杆菌E.coli/LcldhD。以10mmol/L苯丙酮酸为底物，重组LcLDHD工程菌全细胞催化，反应40min，获得D‑PLA的浓度为9.91mmol/L，底物转化率为99.1％，eep为98.3％。表现出了较高的催化活性，有明显的应用潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN108559734B
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN201810033895.7
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的L‑乳酸脱氢酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明在L‑乳酸脱氢酶基础上，通过定点突变生物技术改造L‑乳酸脱氢酶分子结构，得到一株L‑乳酸脱氢酶大肠杆菌工程菌，突变酶比酶活提高5.2倍，催化活性提高3.8倍。本发明解决了L‑乳酸脱氢酶催化活性低的限制性问题，为L‑乳酸脱氢酶分子改造提供了一条新的思路。
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公开(公告)号：CN108034644B
公开(公告)日：2020-03-06
申请号：CN201810033897.6
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的L‑乳酸脱氢酶突变体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明在L‑乳酸脱氢酶基础上，通过定点突变生物技术改造L‑乳酸脱氢酶分子结构，得到一株L‑乳酸脱氢酶大肠杆菌工程菌，突变酶比酶活提高6.1倍，催化活性提高4.2倍。本发明解决了L‑乳酸脱氢酶催化活性低的限制性问题，为L‑乳酸脱氢酶分子改造提供了一条新的思路。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108034644A
公开(公告)日：2018-05-15
申请号：CN201810033897.6
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的L‑乳酸脱氢酶突变体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明在L‑乳酸脱氢酶基础上，通过定点突变生物技术改造L‑乳酸脱氢酶分子结构，得到一株L‑乳酸脱氢酶大肠杆菌工程菌，突变酶比酶活提高6.1倍，催化活性提高4.2倍。本发明解决了L‑乳酸脱氢酶催化活性低的限制性问题，为L‑乳酸脱氢酶分子改造提供了一条新的思路。
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公开(公告)号：CN108559734A
公开(公告)日：2018-09-21
申请号：CN201810033895.7
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的L-乳酸脱氢酶突变体及其应用，属于基因工程技术领域。本发明在L-乳酸脱氢酶基础上，通过定点突变生物技术改造L-乳酸脱氢酶分子结构，得到一株L-乳酸脱氢酶大肠杆菌工程菌，突变酶比酶活提高5.2倍，催化活性提高3.8倍。本发明解决了L-乳酸脱氢酶催化活性低的限制性问题，为L-乳酸脱氢酶分子改造提供了一条新的思路。
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公开(公告)号：CN108048429A
公开(公告)日：2018-05-18
申请号：CN201810033898.0
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/2497 , C12N15/75
Abstract: 本发明公开一种立体选择性提高的菜豆环氧水解酶突变体及构建方法，属于酶工程技术领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶进行单向定点突变，获得对映选择性与对映归一性提高的突变酶W102L。W102L对外消旋间氯环氧苯乙烷(rac‑mCSO)的最终eep，在25℃下从3.1％提高到81.7％。与野生型相比，W102L对外消旋对氯环氧苯乙烷rac‑pCSO的E值从2.6提高至25.5，对rac‑pCSO的对映选择性提高了9.8倍。
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公开(公告)号：CN107164341A
公开(公告)日：2017-09-15
申请号：CN201710474277.1
申请日：2017-06-21
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0006 , C12N15/66 , C12N15/70 , C12P7/42 , C12Y101/01
Abstract: 本发明公开了一种植物乳杆菌来源的苯丙酮酸还原酶及应用，属于生物工程技术领域。本发明首次筛选获得了一种具有催化苯丙酮酸产生苯乳酸活性的苯丙酮酸还原酶，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明将该酶在大肠杆菌BL21中成功克隆表达，并应用于全细胞催化苯丙酮酸产生苯乳酸。使催化反应经过5h后，底物的转化率达到98.38％，ee值为99.9％。
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公开(公告)号：CN107177564A
公开(公告)日：2017-09-19
申请号：CN201710474462.0
申请日：2017-06-21
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0006 , C12N15/70 , C12P7/42 , C12Y101/01027
Abstract: 本发明公开了一种干酪乳杆菌来源的L‑乳酸脱氢酶及其应用，属于生物工程技术领域。本发明提供了一种新的乳酸脱氢酶，并实现了该基因的异源表达。通过构建含有该基因的重组质粒pET‑22b(+)‑Lcldh1,将其转化至大肠杆菌中，获得了含有表达质粒pET‑22b(+)‑Lcldh1的重组大肠杆菌E.coli/Lcldh1。以10mmol/L苯丙酮酸为底物，重组LcLDH1工程菌全细胞催化，反应1h，获得L‑PLA的浓度为8.59mmol/L，产率为85.9％，eep>99％。纯化后LcLDH1的比活力达到294.2U/mg，表现出了较高的催化活性和对映选择性，有明显的应用潜力和经济价值。
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