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公开(公告)号：CN111471662A
公开(公告)日：2020-07-31
申请号：CN202010288719.5
申请日：2020-04-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及SlEH1突变体及其在对映归一水解环氧化物中的应用，属于酶工程与生物催化领域。本发明通过番茄来源的环氧水解酶(SlEH1)的106和189位进行组合点突变，获得对映归一性提高的突变体。突变体SlEH1W106T/F189L归一性合成(R)-1,2-辛二醇的eep值提高至95.4％，相比于野生型酶提高了44.1％；并且SlEH1W106T/F189L可单次归一性合成400mmol/L(R)-1,2-辛二醇，最终得到(R)-1,2-辛二醇的eep>99.0％，总产率为82.6％，是目前报道的最佳催化剂。并且四种突变体对另外五种脂肪类环氧化物的归一性也有明显提高。
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公开(公告)号：CN109880876A
公开(公告)日：2019-06-14
申请号：CN201811620616.3
申请日：2018-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用菜豆环氧化物水解酶制备(R)-间硝基苯乙二醇的方法，属于生物催化技术领域。本发明以表达有环氧化物水解酶PvEH2的大肠杆菌全细胞为催化剂，根据其针对外消旋间硝基环氧苯乙烷的优良的立体选择性特性，通过建立一种双相体系——石油醚/水，提高了底物的初始上样浓度和整个催化反应的效率，减轻了单水相体系中高浓度的间硝基环氧苯乙烷对于PvEH2活性的抑制，同时降低了底物自发水解的程度，产物邻二醇的对映体纯度(eep)可达90.2％，底物的转化率可达99.5％。
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公开(公告)号：CN109609479B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201811633720.6
申请日：2018-12-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种对映选择性提高的宇佐美曲霉环氧化物水解酶突变体，属于酶工程和生物催化技术领域。本发明基于理性设计对宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)环氧化物水解酶(AuEH2)进行分子改造，结合基因的定点饱和突变方法，获得多个对映选择性提高的环氧化物水解酶突变体。本发明获得的9个对映选择性提高的突变体催化外消旋对甲基苯基缩水甘油醚(rac‑pMPGE)的对映体比率(E值)相比野生型，从12.7分别提高至32.4、31.1、27.8、25.8、23.5、22.4、20.2、14.1、13.6。
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公开(公告)号：CN109880876B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201811620616.3
申请日：2018-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用菜豆环氧化物水解酶制备(R)‑间硝基苯乙二醇的方法，属于生物催化技术领域。本发明以表达有环氧化物水解酶PvEH2的大肠杆菌全细胞为催化剂，根据其针对外消旋间硝基环氧苯乙烷的优良的立体选择性特性，通过建立一种双相体系——石油醚/水，提高了底物的初始上样浓度和整个催化反应的效率，减轻了单水相体系中高浓度的间硝基环氧苯乙烷对于PvEH2活性的抑制，同时降低了底物自发水解的程度，产物邻二醇的对映体纯度(eep)可达90.2％，底物的转化率可达99.5％。
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公开(公告)号：CN109486789B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201811653120.6
申请日：2018-12-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种立体选择性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶1(PvEH1)进行饱和突变，获得对映选择性与对映归一性(即立体选择性)提高的突变酶PvEH1 Z4X4‑59。PvEH1 Z4X4‑59对外消旋间氯环氧苯乙烷(rac‑mCSO)的最终eep，在25℃下从3.1％提高到92.3％，E值从2.6提高至26.5。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109609479A
公开(公告)日：2019-04-12
申请号：CN201811633720.6
申请日：2018-12-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种对映选择性提高的宇佐美曲霉环氧化物水解酶突变体，属于酶工程和生物催化技术领域。本发明基于理性设计对宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)环氧化物水解酶(AuEH2)进行分子改造，结合基因的定点饱和突变方法，获得多个对映选择性提高的环氧化物水解酶突变体。本发明获得的9个对映选择性提高的突变体催化外消旋对甲基苯基缩水甘油醚(rac-pMPGE)的对映体比率(E值)相比野生型，从12.7分别提高至32.4、31.1、27.8、25.8、23.5、22.4、20.2、14.1、13.6。
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公开(公告)号：CN109486789A
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201811653120.6
申请日：2018-12-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种立体选择性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶1(PvEH1)进行饱和突变，获得对映选择性与对映归一性(即立体选择性)提高的突变酶PvEH1 Z4X4-59。PvEH1 Z4X4-59对外消旋间氯环氧苯乙烷(rac-mCSO)的最终eep，在25℃下从3.1％提高到92.3％，E值从2.6提高至26.5。
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公开(公告)号：CN111471662B
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202010288719.5
申请日：2020-04-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及SlEH1突变体及其在对映归一水解环氧化物中的应用，属于酶工程与生物催化领域。本发明通过番茄来源的环氧水解酶(SlEH1)的106和189位进行组合点突变，获得对映归一性提高的突变体。突变体SlEH1W106T/F189L归一性合成(R)‑1,2‑辛二醇的eep值提高至95.4％，相比于野生型酶提高了44.1％；并且SlEH1W106T/F189L可单次归一性合成400mmol/L(R)‑1,2‑辛二醇，最终得到(R)‑1,2‑辛二醇的eep>99.0％，总产率为82.6％，是目前报道的最佳催化剂。并且四种突变体对另外五种脂肪类环氧化物的归一性也有明显提高。
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公开(公告)号：CN109355272B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201811621705.X
申请日：2018-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的木聚糖酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达技术领域。本发明通过定点突变和饱和突变生物技术改造木聚糖酶的分子结构，得到一株催化活性提高的木聚糖酶突变体AEx11AT98D/V124Q。突变酶的比活性及催化效率分别为AEx11A的3.04和2.74倍，而且该酶在耐高温和高热稳定性方面仍然和原酶类似。本发明解决了木聚糖酶催化活性低的限制性问题，有较大应用潜力，也为木聚糖酶的研究奠定了理论基础。
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公开(公告)号：CN109355272A
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201811621705.X
申请日：2018-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的木聚糖酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达技术领域。本发明通过定点突变和饱和突变生物技术改造木聚糖酶的分子结构，得到一株催化活性提高的木聚糖酶突变体AEx11AT98D/V124Q。突变酶的比活性及催化效率分别为AEx11A的3.04和2.74倍，而且该酶在耐高温和高热稳定性方面仍然和原酶类似。本发明解决了木聚糖酶催化活性低的限制性问题，有较大应用潜力，也为木聚糖酶的研究奠定了理论基础。
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