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公开(公告)号：CN109486789A
公开(公告)日：2019-03-19
申请号：CN201811653120.6
申请日：2018-12-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种立体选择性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶1(PvEH1)进行饱和突变，获得对映选择性与对映归一性(即立体选择性)提高的突变酶PvEH1 Z4X4-59。PvEH1 Z4X4-59对外消旋间氯环氧苯乙烷(rac-mCSO)的最终eep，在25℃下从3.1％提高到92.3％，E值从2.6提高至26.5。
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公开(公告)号：CN108048429B
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN201810033898.0
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开一种立体选择性提高的菜豆环氧水解酶突变体及构建方法，属于酶工程技术领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶进行单向定点突变，获得对映选择性与对映归一性提高的突变酶W102L。W102L对外消旋间氯环氧苯乙烷(rac‑mCSO)的最终eep，在25℃下从3.1％提高到81.7％。与野生型相比，W102L对外消旋对氯环氧苯乙烷rac‑pCSO的E值从2.6提高至25.5，对rac‑pCSO的对映选择性提高了9.8倍。
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公开(公告)号：CN107201349A
公开(公告)日：2017-09-26
申请号：CN201710474195.7
申请日：2017-06-21
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/14 , C12P7/22 , C12Y303/02003
Abstract: 本发明公开了一种表达菜豆环氧化物水解酶的工程菌及应用，属于生物工程技术领域。本发明提供了一种环氧化物水解酶及表达该酶的重组大肠杆菌。本发明的环氧化物水解酶能够催化外消旋对氯环氧苯乙烷(rac‑pCSO)生成(R)‑对氯苯基乙二醇(pCPED)，在转化率达99.7％时产物对映体过剩值为85.1％eep。与其它植物来源的环氧化物水解酶相比与提高了10倍。
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公开(公告)号：CN107988308B
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201810033872.6
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开一种立体选择性提高的菜豆环氧水解酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶进行单向定点突变，获得对映选择性与对映归一性提高的突变酶W102L。与野生型相比，W102L对外消旋对氯环氧苯乙烷rac‑pCSO的E值从2.6提高至25.5，对rac‑pCSO的对映选择性提高了9.8倍。使用PvEH1W102L全细胞动力学拆分150mmol·L‑1的rac‑pCSO，反应4h后，可获得(R)‑对氯环氧苯乙烷的产率为45.62％(ees＝96.30％)和(R)‑对氯苯基乙二醇产率为50.91％(eep＝90.26％)。
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公开(公告)号：CN107937364B
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201810033894.2
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种对映选择性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明的突变体是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸的基础上，将第102位的色氨酸突变成了亮氨酸。本发明的突变酶PvEH1W102L的对映体比率(E值)是14.95，是野生型酶(E＝7.36)的2.03倍。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109880876B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201811620616.3
申请日：2018-12-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用菜豆环氧化物水解酶制备(R)‑间硝基苯乙二醇的方法，属于生物催化技术领域。本发明以表达有环氧化物水解酶PvEH2的大肠杆菌全细胞为催化剂，根据其针对外消旋间硝基环氧苯乙烷的优良的立体选择性特性，通过建立一种双相体系——石油醚/水，提高了底物的初始上样浓度和整个催化反应的效率，减轻了单水相体系中高浓度的间硝基环氧苯乙烷对于PvEH2活性的抑制，同时降低了底物自发水解的程度，产物邻二醇的对映体纯度(eep)可达90.2％，底物的转化率可达99.5％。
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公开(公告)号：CN109486789B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201811653120.6
申请日：2018-12-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种立体选择性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶1(PvEH1)进行饱和突变，获得对映选择性与对映归一性(即立体选择性)提高的突变酶PvEH1 Z4X4‑59。PvEH1 Z4X4‑59对外消旋间氯环氧苯乙烷(rac‑mCSO)的最终eep，在25℃下从3.1％提高到92.3％，E值从2.6提高至26.5。
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公开(公告)号：CN107988308A
公开(公告)日：2018-05-04
申请号：CN201810033872.6
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开一种立体选择性提高的菜豆环氧水解酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶进行单向定点突变，获得对映选择性与对映归一性提高的突变酶W102L。与野生型相比，W102L对外消旋对氯环氧苯乙烷rac-pCSO的E值从2.6提高至25.5，对rac-pCSO的对映选择性提高了9.8倍。使用PvEH1W102L全细胞动力学拆分150mmol·L-1的rac-pCSO，反应4h后，可获得(R)-对氯环氧苯乙烷的产率为45.62％(ees＝96.30％)和(R)-对氯苯基乙二醇产率为50.91％(eep＝90.26％)。
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公开(公告)号：CN107937364A
公开(公告)日：2018-04-20
申请号：CN201810033894.2
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种对映选择性提高的菜豆环氧化物水解酶突变体，属于基因工程和蛋白质表达领域。本发明的突变体是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸的基础上，将第102位的色氨酸突变成了亮氨酸。本发明的突变酶PvEH1W102L的对映体比率(E值)是14.95，是野生型酶(E＝7.36)的2.03倍。
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公开(公告)号：CN108559737B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201810033873.0
申请日：2018-01-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开一种立体选择性提高的菜豆环氧水解酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明通过菜豆来源的环氧水解酶进行单向定点突变，获得对映选择性与对映归一性提高的突变酶P184L。P184L对外消旋间氯环氧苯乙烷(rac‑mCSO)的最终eep，在25℃下从3.1％提高到27.3％。与野生型相比，P184L对外消旋对氯环氧苯乙烷rac‑pCSO的E值从2.6提高至20，对rac‑pCSO的对映选择性提高了7.7倍。
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