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公开(公告)号：CN104531729B
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201410758084.5
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明的目的是提供一种阿魏酸酯酶A热稳定性改造、突变阿魏酸酯酶A工程菌构建以及突变阿魏酸酯酶A高效异源表达的方法。根据来源于A.usamii E001阿魏酸酯酶A(AuFaeA)的空间结构设计突变A126C和N152C，得到突变阿魏酸酯酶A：AuFaeAA126C‑N152C，其成熟肽基因序列为SEQ ID NO:1，C126和C152可以形成一个二硫键。实验结果表明突变后该酶热稳定性有了明显的提高，为其它酶的改造提供新的技术路径，作为一种耐热型的酶制剂，该阿魏酸酯酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN104388412A
公开(公告)日：2015-03-04
申请号：CN201410757519.4
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/2482 , C12Y302/01008
Abstract: 本发明公开了一种N端替换提高米曲霉木聚糖酶热稳定性的方法。基于高性能计算机及其相关生物学软件对Aspergillus oryzae常温木聚糖酶AoXyn11A耐热性改造的理性设计，将AoXyn11A N端41个氨基酸替换成同一家族耐热木聚糖酶TfGH11 N端42个氨基酸，获得了一种耐热杂合木聚糖酶ATX11A，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。该杂合酶基因ATx11A是采用大引物PCR技术由AoXyn11A和TfGH11基因的相应片段拼接而成的，其核苷酸序列为SEQ ID NO:2。将重组毕赤酵母GS115/ATx11A在30℃诱导72 h，期间每隔24 h添加1.0％(v/v)甲醇。表达的耐热杂合酶ATX11A的最适温度由AoXyn11A的50℃提高至65℃；在60℃处理1 h，ATX11A的半衰期由AoXyn11A的1.3 min延长至55 min。
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公开(公告)号：CN104388412B
公开(公告)日：2017-10-31
申请号：CN201410757519.4
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种N端替换提高米曲霉木聚糖酶热稳定性的方法。基于高性能计算机及其相关生物学软件对Aspergillus oryzae常温木聚糖酶AoXyn11A耐热性改造的理性设计，将AoXyn11A N端41个氨基酸替换成同一家族耐热木聚糖酶TfGH11 N端42个氨基酸，获得了一种耐热杂合木聚糖酶ATX11A，其氨基酸序列为SEQ ID NO:1。该杂合酶基因ATx11A是采用大引物PCR技术由AoXyn11A和TfGH11基因的相应片段拼接而成的，其核苷酸序列为SEQ ID NO:2。将重组毕赤酵母GS115/ATx11A在30℃诱导72 h，期间每隔24 h添加1.0％(v/v)甲醇。表达的耐热杂合酶ATX11A的最适温度由AoXyn11A的50℃提高至65℃；在60℃处理1 h，ATX11A的半衰期由AoXyn11A的1.3 min延长至55 min。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103642776A
公开(公告)日：2014-03-19
申请号：CN201310666411.X
申请日：2013-12-10
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/2482 , C12N15/815 , C12Y302/01008
Abstract: 本发明的目的是提供一种常温的木聚糖酶热稳定性改造、突变木聚糖酶工程菌构建以及突变木聚糖酶的高效表达的方法。根据来源于A.oryzae CICC40186木聚糖酶Aoxyn11A的空间结构设计突变S108C和N152C，得到突变木聚糖酶：Aoxyn11AELJ，其成熟肽基因序列为SEQ ID NO：1，108C和152C可以形成一个跨二级结构的二硫键。实验结果表明突变后该酶热稳定性有了明显的提高，作为一种耐热型的酶制剂，该木聚糖酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN104531729A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410758084.5
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明的目的是提供一种阿魏酸酯酶A热稳定性改造、突变阿魏酸酯酶A工程菌构建以及突变阿魏酸酯酶A高效异源表达的方法。根据来源于A.usamii E001阿魏酸酯酶A(AuFaeA)的空间结构设计突变A126C和N152C，得到突变阿魏酸酯酶A：AuFaeAA126C-N152C，其成熟肽基因序列为SEQ ID NO:1，C126和C152可以形成一个二硫键。实验结果表明突变后该酶热稳定性有了明显的提高，为其它酶的改造提供新的技术路径，作为一种耐热型的酶制剂，该阿魏酸酯酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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公开(公告)号：CN104404066A
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201410758070.3
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明的目的是提供一种天然二硫键与阿魏酸酯酶A功能相关性的验证方法，以及突变阿魏酸酯酶A工程菌构建、突变酶异源表达的方法。根据来源于A.usamii E001阿魏酸酯酶A(AuFaeA)的模拟空间结构设计单突变C29T、C91T和C234T，得到突变阿魏酸酯酶A：AuFaeAC29T、AuFaeAC91T和AuFaeAC234T，其成熟肽基因序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5。突变后该酶的酶活性和最适温度都有大幅下降，证明了二硫键是影响阿魏酸酯酶A功能发挥的关键因素，为其它与AuFaeA一级结构相似的A类阿魏酸酯酶的耐热性改造奠定了基础。
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公开(公告)号：CN104388451A
公开(公告)日：2015-03-04
申请号：CN201410758941.1
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明为耐热木聚糖酶(Xyl11M)基因的合成及其在毕赤酵母中的表达，涉及一种来源于嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的耐热β-1,4-内切木聚糖酶(Xyl11M)在毕赤酵母中表达、活性测定及酶学性质分析方法。其基因命名为xyl11M，它的核苷酸序列为SEQ ID NO:1，编码的蛋白质为Xyl11M，氨基酸序列为SEQ ID NO:2。所制备的重组酶的活性为157U/mL；其最适反应温度为70℃，70℃下保温60min，残余酶活为98％，表明该酶热稳定性非常好；其最适pH为6.0，在pH 5.0～8.0范围内较稳定；金属离子对该酶活性影响较小。作为一种耐热型的酶制剂，该酶具有较大的工业化应用潜力及经济价值。
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公开(公告)号：CN214596344U
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202120291727.5
申请日：2021-02-02
Applicant: 江南大学附属医院
Abstract: 本实用新型公开了一种特殊检查活动提示牌，整体组件，包括水平设置的第一外壳、第二外壳，所述第一外壳、第二外壳为圆板状，且所述第一外壳、第二外壳通过连接杆相连接，所述第二外壳表面开设有第一观察槽、第二观察槽；转动提示组件，包括转动连接在所述连接杆外壁上第一提示板，所述第一提示板底部安装有第一滑块，所述第一提示板通过第一滑块配合开设在所述第一外壳上的环形滑槽与第一外壳滑动连接，所述第一滑块侧壁上固定连接有第一压缩弹簧，所述第一压缩弹簧另一端固定连接有第一卡块；本实用新型解决了在患者比较多时医护人员劳动量较大，可能会忘记对患者做体征检查或者由于未履行注意事项而对检查结果造成影响的问题。
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