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公开(公告)号：CN104450801A
公开(公告)日：2015-03-25
申请号：CN201410759167.6
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12P7/22
Abstract: 本发明公开了一种共表达羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶的大肠杆菌系统在不对称还原制备(R)-2-氯-1-(3-氯苯基)乙醇中的应用。以含有羰基还原酶(SyS1)基因和葡萄糖脱氢酶(SyGDH)基因的共表达重组菌E.coil BL21(pETDuet-Sygdh-Sys1)为催化剂，并添加一定量的NADP+和葡萄糖，在缓冲溶液/二甲亚砜两相反应体系中实现不对称还原3-氯苯酰甲基氯高效制备(R)-2-氯-1-(3-氯苯基)乙醇。其收率为98％，产物的对映体过量(e.e.)>99％。
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公开(公告)号：CN103642747A
公开(公告)日：2014-03-19
申请号：CN201310666356.4
申请日：2013-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种重组大肠杆菌表达羰基还原酶生物制备(R)-2-溴-1-(4-硝基苯基)乙醇的方法，及其在不对称还原制备(R)-2-溴-1-(4-硝基苯基)乙醇中的应用。以表达该羰基还原酶(CBR)基因的大肠杆菌BL21(pET28a-cbr)耦合葡萄糖脱氢酶(GDH)重组大肠杆菌BL21(pET28a-gdh)为催化剂，并添加少量NAD(P)H，在有机溶剂二甲基二甲胺／水两相反应体系中实现了不对称还原2-溴-4-硝基-苯乙酮高效制备(R)-2-溴-1-(4-硝基苯基)乙醇，摩尔转化率高于95％，产物的对映体过量(e.e.)>99％。
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公开(公告)号：CN102978224A
公开(公告)日：2013-03-20
申请号：CN201210562636.6
申请日：2012-12-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种对来源于米曲霉Aspergillus oryzae的11家族的杂合木聚糖酶AEx11A进行耐热分析，通过对AEx11A结构的同源建模及其与AoXyn11A结构的比对，发现在AEx11A的N端引入了一个二硫键(Cys5-Cys32)。利用定点突变法将其5位的半胱氨酸突变为苏氨酸(C5T)，去除该二硫键，以探讨其对AEx11A热稳定性的影响，结果发现突变酶(AEx11AC5T)的Topt由突变前的75℃降为60℃、t1/270和t1/280分别由突变前的197和25min缩短为3.0和1.0min，说明N端二硫键对11家族木聚糖酶热稳定性有一定的影响。能为11家族木聚糖酶的热稳定机制的阐明、热稳定性蛋白工程的改造等奠定理论基础。
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公开(公告)号：CN104531630B
公开(公告)日：2017-07-14
申请号：CN201410752769.9
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种高对映体选择性的AuEH2G218S和AuEH2S247Y突变酶的设计与构建，通过序列同源性分析、同源建模、分子对接和动力学模拟等最终确定突变位点，利用大引物PCR技术获得突变基因命名为Aueh2G218S和Aueh2S247Y。本发明还公开了突变酶工程菌的构建以及高效表达的方法，制备的突变酶具有高对映体选择性及催化活性的特性，具有较大的工业化生产潜力。
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公开(公告)号：CN104531729A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410758084.5
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明的目的是提供一种阿魏酸酯酶A热稳定性改造、突变阿魏酸酯酶A工程菌构建以及突变阿魏酸酯酶A高效异源表达的方法。根据来源于A.usamii E001阿魏酸酯酶A(AuFaeA)的空间结构设计突变A126C和N152C，得到突变阿魏酸酯酶A：AuFaeAA126C-N152C，其成熟肽基因序列为SEQ ID NO:1，C126和C152可以形成一个二硫键。实验结果表明突变后该酶热稳定性有了明显的提高，为其它酶的改造提供新的技术路径，作为一种耐热型的酶制剂，该阿魏酸酯酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104531728A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410755394.1
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提出了一种源自宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001的一种环氧化物水解酶cDNA基因序列的克隆方法，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1，命名为Aueh1，其氨基酸序列为SEQ ID NO:2，该酶命名为AuEH1。本发明还公开了AuEH1工程菌的构建以及重组AuEH1的异源表达和活性测定的方法。以20mM消旋体环氧苯乙烷为底物，重组AuEH1工程菌全细胞催化，获得(S)-SO的对映体过量率ee>94％。AuEH1具有较高的催化活性和手性选择性，有较大的工业化生产和应用潜力及经济价值。
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公开(公告)号：CN104531630A
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201410752769.9
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/14 , C12Y303/02003
Abstract: 本发明提出了一种高对映体选择性的AuEH2G218S和AuEH2S247Y突变酶的设计与构建，通过序列同源性分析、同源建模、分子对接和动力学模拟等最终确定突变位点，利用大引物PCR技术获得突变基因命名为Aueh2G218S和Aueh2S247Y。本发明还公开了突变酶工程菌的构建以及高效表达的方法，制备的突变酶具有高高对映体选择性及催化活性的特性，具有较大的工业化生产潜力。
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公开(公告)号：CN107123844A
公开(公告)日：2017-09-01
申请号：CN201710219842.X
申请日：2017-04-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供一种基于电磁带隙(EBG)衬底的谐振器/滤波器，包括顶层金属板，底层金属板，中间介质层，周期性金属柱以及由一系列的谐振器/滤波器工作频率控制元件组成的外部控制网络。其中，周期性排列的金属柱嵌入介质层中构成周期性EBG衬底；设计在顶层金属板上的能量耦合结构由共面波导与槽线构成；频率控制元件可以是内置或外接电容器，与中心金属柱相连，共同构成谐振网络实现对频率的调谐。在此基础上，与本发明还提供一种双通带滤波器，包括两个或更多的基于EBG衬底的单带滤波器，以及由一系列频率控制元件组成的外部控制网络。通过单带滤波器间共享EBG衬底实现滤波器的小型化与高性能。
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公开(公告)号：CN104450801B
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201410759167.6
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种共表达羰基还原酶和葡萄糖脱氢酶的大肠杆菌系统在不对称还原制备(R)‑2‑氯‑1‑(3‑氯苯基)乙醇中的应用。以含有羰基还原酶(SyS1)基因和葡萄糖脱氢酶(SyGDH)基因的共表达重组菌E.coil BL21(pETDuet‑Sygdh‑Sys1)为催化剂，并添加一定量的NADP+和葡萄糖，在缓冲溶液/二甲亚砜两相反应体系中实现不对称还原3‑氯苯酰甲基氯高效制备(R)‑2‑氯‑1‑(3‑氯苯基)乙醇。其收率为98％，产物的对映体过量(e.e.)>99％。
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公开(公告)号：CN104531729B
公开(公告)日：2017-06-13
申请号：CN201410758084.5
申请日：2014-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明的目的是提供一种阿魏酸酯酶A热稳定性改造、突变阿魏酸酯酶A工程菌构建以及突变阿魏酸酯酶A高效异源表达的方法。根据来源于A.usamii E001阿魏酸酯酶A(AuFaeA)的空间结构设计突变A126C和N152C，得到突变阿魏酸酯酶A：AuFaeAA126C‑N152C，其成熟肽基因序列为SEQ ID NO:1，C126和C152可以形成一个二硫键。实验结果表明突变后该酶热稳定性有了明显的提高，为其它酶的改造提供新的技术路径，作为一种耐热型的酶制剂，该阿魏酸酯酶具有较大的工业化生产潜力和经济价值。
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