公开(公告)号：CN104404015A

公开(公告)日：2015-03-11

申请号：CN201410758722.3

申请日：2014-12-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 李剑芳 ,  王春娟 ,  董运海 ,  邬敏辰 ,  何瑶 ,  唐诗涵

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/62 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12R1/84

CPC classification number: C12N9/2494 ,  C07K2319/00 ,  C12Y302/01078

Abstract: 本发明提出了一种新型地利用计算机技术与生物信息学方法对宇佐美曲霉Aus Man5A分子进行理性设计，并结合基因工程技术构建一种底物亲和力强、催化效率高的AusMan5A-CBM27融合酶的方法，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2，相应的基因命名为man5A-cbm27。本发明还公开了融合酶工程菌的构建以及高效表达和纯化的方法，制备的融合酶具有底物亲和力强、催化效率高的特性，具有较大的工业化应用潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN104450652B

公开(公告)日：2017-05-24

申请号：CN201410759253.7

申请日：2014-12-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 李剑芳 ,  董运海 ,  王春娟 ,  邬敏辰 ,  唐诗涵 ,  赵梅

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/10 ,  C12N15/81 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提出了一种提高β‑甘露聚糖酶催化活性方法，结合基因工程技术构建一种催化效率高的宇佐美曲霉甘露聚糖酶(AuMan5A)突变酶，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2，相应的基因命名为Auman5ALoop。本发明还公开了突变酶工程菌的构建、高效表达和纯化的方法，制备的突变酶具有底物亲和力强、催化效率高的特性，具有较大的工业化应用潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN103642826A

公开(公告)日：2014-03-19

申请号：CN201310666414.3

申请日：2013-12-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 李剑芳 ,  赵梅 ,  王春娟 ,  董运海 ,  邬敏辰

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/42 ,  C12R1/66

Abstract: 本发明涉及一种来源于宇佐美曲霉Aspergillus usamii E001的β-1，4-甘露聚糖酶基因的克隆方法，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1，命名为Auman26A。生物信息学分析表明该甘露聚糖酶属于糖苷水解酶第26家族，命名为AuMan26A，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2。本发明还公开了AuMan26A基因在毕赤酵母中异源表达、活性测定及酶学性质的分析方法，制备的重组酶热稳定性极好，具有较大的工业化生产潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN103642747A

公开(公告)日：2014-03-19

申请号：CN201310666356.4

申请日：2013-12-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 邬敏辰 ,  余涛 ,  董运海 ,  李剑芳

IPC: C12N1/21 ,  C12P7/22 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种重组大肠杆菌表达羰基还原酶生物制备(R)-2-溴-1-(4-硝基苯基)乙醇的方法，及其在不对称还原制备(R)-2-溴-1-(4-硝基苯基)乙醇中的应用。以表达该羰基还原酶(CBR)基因的大肠杆菌BL21(pET28a-cbr)耦合葡萄糖脱氢酶(GDH)重组大肠杆菌BL21(pET28a-gdh)为催化剂，并添加少量NAD(P)H，在有机溶剂二甲基二甲胺／水两相反应体系中实现了不对称还原2-溴-4-硝基-苯乙酮高效制备(R)-2-溴-1-(4-硝基苯基)乙醇，摩尔转化率高于95％，产物的对映体过量(e.e.)>99％。

公开(公告)号：CN104404109A

公开(公告)日：2015-03-11

申请号：CN201410758066.7

申请日：2014-12-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 李剑芳 ,  赵梅 ,  唐诗涵 ,  邬敏辰 ,  王春娟 ,  董运海

IPC: C12P19/14 ,  C07H3/06 ,  C07H3/04 ,  C07H1/06 ,  C08B37/00

Abstract: 本发明提供了一种酶法结合超滤工艺从魔芋精粉中制备低聚甘露糖的方法。利用重组β-甘露聚糖酶(reAuMan26A)对魔芋精粉进行酶解得到低聚甘露糖。该方法所用关键酶的催化活力较高，酶的生产和使用成本较低，生产周期短，无污染，纯化、分离步骤简便，极大地提高魔芋精粉的附加值，为进一步精制低聚甘露糖奠定理论基础，有较大的工业化生产、应用潜力和经济价值。

公开(公告)号：CN104450652A

公开(公告)日：2015-03-25

申请号：CN201410759253.7

申请日：2014-12-10

Applicant: 江南大学

Inventor： 李剑芳 ,  董运海 ,  王春娟 ,  邬敏辰 ,  唐诗涵 ,  赵梅

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  C12N15/10 ,  C12N15/81 ,  C12R1/84

CPC classification number: C12N9/2494 ,  C12Y302/01078

Abstract: 本发明提出了一种提高β-甘露聚糖酶催化活性方法，结合基因工程技术构建一种催化效率高的宇佐美曲霉甘露聚糖酶(AuMan5A)突变酶，其核苷酸序列为SEQ ID NO:1，氨基酸序列为SEQ ID NO:2，相应的基因命名为Auman5ALoop。本发明还公开了突变酶工程菌的构建、高效表达和纯化的方法，制备的突变酶具有底物亲和力强、催化效率高的特性，具有较大的工业化应用潜力和经济价值。