一种体内检测ROP蛋白活性的方法

    公开(公告)号:CN113789343A

    公开(公告)日:2021-12-14

    申请号:CN202110904455.6

    申请日:2021-08-06

    Abstract: 本发明公开了一种体内检测ROP蛋白活性的方法,包括(1)构建融合蛋白表达载体并转化农杆菌感受态细胞;(2)植物叶片注射;(3)植物活体成像仪定性检测荧光强度;(4)酶标仪定量检测荧光素酶活性:使用酶标仪进行荧光扫描,以显示荧火素酶分解底物后产生荧光的强度来判断荧光素酶活性的强弱,从而检测目标蛋白AtROP1的活性强弱的程度。该方法基于RIC1作为ROP蛋白的下游效应子能特异地与活性形式的ROP结合这一特点,通过荧火素酶互补实验,借助烟草瞬时表达系统,利用植物活体成像仪和酶标仪进行定性定量检测荧光强度,从而实现体内检测ROP蛋白的活性。同时该方法还具有高灵敏度、可视化、可定量化和操作简单高效等特点。

    梨转录因子PbHB.G7.2及其在促进果实成熟中的应用

    公开(公告)号:CN111690046B

    公开(公告)日:2021-10-26

    申请号:CN202010632107.3

    申请日:2020-07-03

    Abstract: 本发明公开了梨转录因子PbHB.G7.2及其在促进果实成熟中的应用,属于植物基因工程技术领域,提供了一种如SEQ ID No.1所示的具有促进果实乙烯的合成,加速果实成熟过程功能的转录因子PbHB.G7.2基因。将所述梨转录因子PbHB.G7.2瞬时转化到梨果实中获得的超表达系梨果实的乙烯释放量明显高于对照系,成熟过程也加快,经生物学功能验证,表明转录因子PbHB.G7.2能够结合并激活PbACS1b启动子,提高PbACS1b基因表达水平,具有提高梨果实乙烯合成量,能够促进梨果实成熟的功能。为促进梨果实成熟的分子育种提供新的基因资源,该遗传资源的开发有利于增加农民收入和降低农业成本。

    梨苹果酸转运蛋白基因PbrTDT1及其应用

    公开(公告)号:CN112079910A

    公开(公告)日:2020-12-15

    申请号:CN202010892644.1

    申请日:2020-08-31

    Abstract: 本发明公开了一个梨苹果酸转运蛋白基因PbrTDT1及其应用,属于植物基因工程技术领域。本发明从‘砀山酥梨’果实中克隆得到一个新的苹果酸转运蛋白基因PbrTDT1,其核苷酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示,其编码的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:2所示。通过农杆菌介导遗传转化将该基因转化番茄,获得转基因植株,经生物学功能验证,转基因番茄果实中苹果酸的含量明显增加,表明本发明克隆的PbrTDT1基因具有调控果实果肉苹果酸含量的功能。本发明所述的梨TDT转运蛋白基因PbrTDT1可在果实酸度性状改良或构建高酸转基因果实中应用,并为提升植物果实品质的分子育种提供新的基因资源。

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