一种基于免疫磁珠富集的甲型流感病毒检测试剂盒及方法

    公开(公告)号:CN102230938B

    公开(公告)日:2013-10-30

    申请号:CN201110168589.2

    申请日:2011-06-22

    Abstract: 本发明公开了一种基于免疫磁珠富集的甲型流感病毒检测试剂盒及方法,试剂盒包括A、免疫富集反应体系组分;B、环介导的等温核酸扩增体系组分;C、抗体的制备;D、免疫磁珠的制备;E、设计甲型H1N1流感病毒的特异性引物,用于环介导的等温65ºC扩增反应。检测方法是:a、免疫富集;b、热裂解上述产物、经磁力架分离,将含有病毒核酸的上清作为环介导等温扩增反应的模板;c、环介导等温扩增反应;d、结果判定。该试剂盒具有操作简单、快速、特异性好、灵敏度高、对硬件要求低等优势,可广泛应用于各级疾病预防控制机构,流感监测网络实验室,哨点医院等对发热病人鼻咽拭子等标本的甲型H1N1流感病毒的检测和监测。

    一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN101857856A

    公开(公告)日:2010-10-13

    申请号:CN201010187108.8

    申请日:2010-05-25

    Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用,一种枯草芽孢杆菌脂肪酶,大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-/Lip A f10-H1(I12V/L140F/D144E),CCTCC NO:M2010058。这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,其步骤是:第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因;第二是设计3对诱变引物,通过重叠PCR将突变引入脂肪酶Lip A基因;第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(I12V/L140F/D144E);第四是在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白;第五是纯化蛋白。一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在洗涤剂工业中的应用。本发明方法易行,成本低廉,高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、能源、化工和医药等行业具有重要应用价值。

    一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用

    公开(公告)号:CN101838634A

    公开(公告)日:2010-09-22

    申请号:CN201010187107.3

    申请日:2010-05-25

    Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用,一种枯草芽孢杆菌脂肪酶,大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-Lip A f12-C2(R33W/L140F),CCTCC NO:M2010057。这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,其步骤是:第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因;第二是设计二对诱变引物,通过重叠PCR法将两个突变位点依次引入脂肪酶Lip A基因;第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(R33W/L140F);第四是在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达目的蛋白;第五是纯化蛋白。一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在皮革加工中的应用。本发明方法易行,成本低廉,高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、化工和医药等行业具有重要应用价值。

    一种用于葡萄糖传感器的融合蛋白的制备方法

    公开(公告)号:CN1156573C

    公开(公告)日:2004-07-07

    申请号:CN01114379.7

    申请日:2001-07-25

    Abstract: 本发明公开了一种用于葡萄糖传感器的融合蛋白的制备方法,其步骤是:首先合成编码聚赖氨酸的DNA链,将合成的DNA链在65℃褪火形成双链的短DNA片段;其次是通过基因拼接,构建融合蛋白的表达载体pPICGLT;第三是表达载体pPICGLT经限制性内切酶StuI线性化后,用原生质体转化法转化进酵母中;第四是酵母重组子的筛选,提取酵母的基因组DNA作检测;第五是融合蛋白的表达、纯化,转化子在30℃下MM培养基中培养72小时,每24小时加一次甲醇;第六是融合蛋白与介体的连接;第七是葡萄糖传感器的制备;第八是电化学检测。本发明制备葡萄糖传感器测量线性范围宽,可达45mmol/L,且响应信号大,保存期长。

    一种基因芯片上的酶标信号检测方法

    公开(公告)号:CN1384210A

    公开(公告)日:2002-12-11

    申请号:CN02115833.9

    申请日:2002-05-14

    Abstract: 本发明公开了一种基因芯片上的酶标信号检测方法。其步骤是制作基因芯片;构建芯片生化反应室,进行芯片生化反应,在反应过程中引入生物素;生化反应完成后采用碱性磷酸酶复合物进行芯片信号检测。在信号检测过程中,优化了反应条件,简化了反应步骤,提高了信号检测的稳定性和重复性。本发明核酸检测灵敏度可达0.1皮克,检测速度快,重复性和稳定性好;操作简便,成本低,易于推广应用;可进一步开发成基因芯片信号检测试剂盒。

    有机磷农药降解菌及其制备方法

    公开(公告)号:CN1329138A

    公开(公告)日:2002-01-02

    申请号:CN01128319.X

    申请日:2001-08-07

    Abstract: 本发明公开了一种有机磷农药降解菌及其制备方法。该微生物是假单胞菌WBC-3菌株,CCTCCNO.M201027,该菌的16SrDNA序列号为GenBank AccessionNo.AY040872。制备该菌株的步骤是首先将含有有机磷农药污染土样配制成菌悬液,悬液接种含甲基对硫磷的无机盐培养基;其次是将上述菌悬液接入培养基中,培养至对数生长期;第三是上述培养菌液用平板稀释法进行分离纯化;第四是经生理生化鉴定,确定上述菌株是假单胞菌,保存于LB斜面,使用前外加甲基对硫磷的培养基进行驯化。本发明筛选的菌株降解性能稳定,降解酶系丰富,降解底物范围广,能完全降解对硫磷等有机磷农药,适合在果蔬农药去毒。

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