公开(公告)号：CN1384210A

公开(公告)日：2002-12-11

申请号：CN02115833.9

申请日：2002-05-14

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 张先恩 ,  邓教宇 ,  黄旭 ,  张治平 ,  邵文海 ,  文继开 ,  陆红兵 ,  刘强

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种基因芯片上的酶标信号检测方法。其步骤是制作基因芯片;构建芯片生化反应室,进行芯片生化反应,在反应过程中引入生物素;生化反应完成后采用碱性磷酸酶复合物进行芯片信号检测。在信号检测过程中,优化了反应条件,简化了反应步骤,提高了信号检测的稳定性和重复性。本发明核酸检测灵敏度可达0.1皮克,检测速度快,重复性和稳定性好;操作简便,成本低,易于推广应用;可进一步开发成基因芯片信号检测试剂盒。

公开(公告)号：CN1162552C

公开(公告)日：2004-08-18

申请号：CN02115833.9

申请日：2002-05-14

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所

Inventor： 张先恩 ,  邓教宇 ,  黄旭 ,  张治平 ,  邵文海 ,  文继开 ,  陆红兵 ,  刘强

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种基因芯片上的酶标信号检测方法，涉及基因芯片信号检测技术领域。其步骤是制作好有关基因芯片；进行芯片生化反应，并在反应过程中引入生物素；芯片生化反应结束后，采用碱性磷酸酶-亲和素复合物或自行制备的碱性磷酸酶-连接肽-链霉结合肽-链霉亲和素复合物进行在片信号检测。在信号检测过程中，对酶标信号检测方法的反应条件进行优化，简化反应步骤，提高了信号检测的稳定性和重复性；通过采用自行制备的碱性磷酸酶-连接肽-链霉结合肽-链霉亲和素定向交联复合物进行信号检测，提高了信号检测灵敏度。本发明适用于中、低密度基因基因芯片的信号检测。

公开(公告)号：CN1292417A

公开(公告)日：2001-04-25

申请号：CN00115952.6

申请日：2000-08-11

Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所 ,  英国伦敦帝国理工医学院

Inventor： 张先恩 ,  安东尼E·G·卡史 ,  邵文海 ,  刘虹 ,  张治平

IPC: C12N11/02 ,  C12N15/62 ,  C12N15/63

Abstract: 本发明公开了一种控制固定化酶空间取向的方法。其步骤是通过基因操纵构建和表达酶—连接肽—链霉结合肽融合蛋白,制备融合蛋白纯品,超滤浓缩,测定酶动力学;通过链霉结合肽与链霉亲和素的专一性结合,使酶分子定向固定在经链霉亲和素包被的固相载体上,其活性中心朝向反应溶液。融合蛋白为“锚—链”分子系统,其中链霉结合肽为“锚”,控制酶分子固定的方向,连接肽为“链”,能增加酶与链霉结合肽之间的分子距离,既保持两者各自空间活动的灵活性,又减小了链霉结合肽与链霉亲和素的结合反应的空间位阻,从而大大提高定向固定效率。该方法剩余酶活高,均一性好,是定向固定酶分子的一种模式方法,适合于制作高质量生物传感器、生物芯片等生物器件。