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公开(公告)号:CN105624178B
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201410605792.5
申请日:2014-10-31
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明为一种基于荧光蛋白iRFP的双分子荧光片段互补系统及应用,以光敏色素荧光蛋白iRFP为模板,在氨基酸97‑98位将其拆分为不发荧光的氮端和碳端片段iRN97和iRC98,当这两个片段分别与相互作用的蛋白对相融合表达时,不发荧光的两个片段就可以被拉近而产生iRFP的荧光;iRN97和iRC98分别与艾滋病毒整合酶IN及细胞蛋白P75相融合表达,通过iRN97和iRC98的荧光互补,在活细胞内对IN与p75的相互作用进行研究,当药物能够抑制该蛋白‑蛋白之间的相互作用时,iRN97和iRC98则不能被拉近,从而抑制荧光的恢复。该新系统为一种简单、有效、方便的抑制蛋白相互作用的药物的评价系统。
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公开(公告)号:CN109856204A
公开(公告)日:2019-06-07
申请号:CN201910047062.0
申请日:2019-01-18
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所 , 中国科学院物理研究所
IPC: G01N27/30
Abstract: 本发明公开了一种基于电化学原位石墨烯合成的碳基电极修饰方法,使用三电极或双电极系统完成电化学处理过程,所述电化学处理为以下两种方式中的其中一种:(1)循环伏安法:三电极工作面放入支持的电解质溶液中,向碳基电极施加正电压扫描以原位获得氧化石墨烯,然后向碳基电极施加负电压扫描以原位获得还原氧化石墨烯;(2)直流电压法:三电极或双电极工作面放入支持的电解质溶液中,向碳基电极施加恒定的正直流电压进行处理以原位获得氧化石墨烯,然后向碳基电极施加恒定的负直流电压进行处理以原位获得还原氧化石墨烯。较常规(氧化)石墨烯滴涂和原位气相沉积等修饰法具有快速、简便、廉价、纯绿色合成、高可控、高重现、高稳定的特点。
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公开(公告)号:CN102230938B
公开(公告)日:2013-10-30
申请号:CN201110168589.2
申请日:2011-06-22
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: C12Q1/70
Abstract: 本发明公开了一种基于免疫磁珠富集的甲型流感病毒检测试剂盒及方法,试剂盒包括A、免疫富集反应体系组分;B、环介导的等温核酸扩增体系组分;C、抗体的制备;D、免疫磁珠的制备;E、设计甲型H1N1流感病毒的特异性引物,用于环介导的等温65ºC扩增反应。检测方法是:a、免疫富集;b、热裂解上述产物、经磁力架分离,将含有病毒核酸的上清作为环介导等温扩增反应的模板;c、环介导等温扩增反应;d、结果判定。该试剂盒具有操作简单、快速、特异性好、灵敏度高、对硬件要求低等优势,可广泛应用于各级疾病预防控制机构,流感监测网络实验室,哨点医院等对发热病人鼻咽拭子等标本的甲型H1N1流感病毒的检测和监测。
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公开(公告)号:CN101857856A
公开(公告)日:2010-10-13
申请号:CN201010187108.8
申请日:2010-05-25
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用,一种枯草芽孢杆菌脂肪酶,大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-/Lip A f10-H1(I12V/L140F/D144E),CCTCC NO:M2010058。这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,其步骤是:第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因;第二是设计3对诱变引物,通过重叠PCR将突变引入脂肪酶Lip A基因;第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(I12V/L140F/D144E);第四是在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白;第五是纯化蛋白。一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在洗涤剂工业中的应用。本发明方法易行,成本低廉,高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、能源、化工和医药等行业具有重要应用价值。
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公开(公告)号:CN101838634A
公开(公告)日:2010-09-22
申请号:CN201010187107.3
申请日:2010-05-25
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用,一种枯草芽孢杆菌脂肪酶,大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-Lip A f12-C2(R33W/L140F),CCTCC NO:M2010057。这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列,其步骤是:第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因;第二是设计二对诱变引物,通过重叠PCR法将两个突变位点依次引入脂肪酶Lip A基因;第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(R33W/L140F);第四是在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达目的蛋白;第五是纯化蛋白。一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在皮革加工中的应用。本发明方法易行,成本低廉,高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、化工和医药等行业具有重要应用价值。
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公开(公告)号:CN1156573C
公开(公告)日:2004-07-07
申请号:CN01114379.7
申请日:2001-07-25
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于葡萄糖传感器的融合蛋白的制备方法,其步骤是:首先合成编码聚赖氨酸的DNA链,将合成的DNA链在65℃褪火形成双链的短DNA片段;其次是通过基因拼接,构建融合蛋白的表达载体pPICGLT;第三是表达载体pPICGLT经限制性内切酶StuI线性化后,用原生质体转化法转化进酵母中;第四是酵母重组子的筛选,提取酵母的基因组DNA作检测;第五是融合蛋白的表达、纯化,转化子在30℃下MM培养基中培养72小时,每24小时加一次甲醇;第六是融合蛋白与介体的连接;第七是葡萄糖传感器的制备;第八是电化学检测。本发明制备葡萄糖传感器测量线性范围宽,可达45mmol/L,且响应信号大,保存期长。
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公开(公告)号:CN1384210A
公开(公告)日:2002-12-11
申请号:CN02115833.9
申请日:2002-05-14
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种基因芯片上的酶标信号检测方法。其步骤是制作基因芯片;构建芯片生化反应室,进行芯片生化反应,在反应过程中引入生物素;生化反应完成后采用碱性磷酸酶复合物进行芯片信号检测。在信号检测过程中,优化了反应条件,简化了反应步骤,提高了信号检测的稳定性和重复性。本发明核酸检测灵敏度可达0.1皮克,检测速度快,重复性和稳定性好;操作简便,成本低,易于推广应用;可进一步开发成基因芯片信号检测试剂盒。
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公开(公告)号:CN109856204A8
公开(公告)日:2019-12-13
申请号:CN201910047062.0
申请日:2019-01-18
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所 , 中国科学院生物物理研究所
IPC: G01N27/30
Abstract: 本发明公开了一种基于电化学原位石墨烯合成的碳基电极修饰方法,使用三电极或双电极系统完成电化学处理过程,所述电化学处理为以下两种方式中的其中一种:(1)循环伏安法:三电极工作面放入支持的电解质溶液中,向碳基电极施加正电压扫描以原位获得氧化石墨烯,然后向碳基电极施加负电压扫描以原位获得还原氧化石墨烯;(2)直流电压法:三电极或双电极工作面放入支持的电解质溶液中,向碳基电极施加恒定的正直流电压进行处理以原位获得氧化石墨烯,然后向碳基电极施加恒定的负直流电压进行处理以原位获得还原氧化石墨烯。较常规(氧化)石墨烯滴涂和原位气相沉积等修饰法具有快速、简便、廉价、纯绿色合成、高可控、高重现、高稳定的特点。
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公开(公告)号:CN105622732B
公开(公告)日:2019-10-25
申请号:CN201410603949.0
申请日:2014-10-30
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: C07K14/025 , C07K19/00 , C12N15/37
Abstract: 本发明公开了猴病毒40衣壳蛋白VP1在作为细胞穿膜蛋白中的应用。首先揭示了VP1是一种细胞穿透蛋白,将VP1蛋白与其他蛋白融合表达,VP1可以携带外源蛋白穿透细胞膜,进入细胞并定位于细胞质。本发明实验证实VP1蛋白可携带mCherry荧光蛋白及抑癌蛋白P53穿透细胞膜,进入细胞并定位于细胞质。本发明提供了一种简单高效的细胞转导系统,并且实现了在细胞质中的亚细胞定位,所构建的VP1‑P53蛋白还有望在肿瘤治疗等方面有潜在应用。
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公开(公告)号:CN105861418B
公开(公告)日:2019-07-16
申请号:CN201510031883.7
申请日:2015-01-22
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了猴病毒40衣壳蛋白VP1组装的病毒样颗粒在介导微米颗粒进入细胞中的应用。通过化学修饰使猴病毒40衣壳蛋白VP1组装的病毒样颗粒与无机微米颗粒结合,使其将微米颗粒包覆,可将微米颗粒带入哺乳动物细胞内,实现无机微米颗粒的细胞递送。通过包装不同功能的纳米颗粒,结合不同性质的微米颗粒,建立了一种将微米颗粒导入细胞的方法,并实现了多层级、多功能的纳米构架。在疾病的靶向诊断、靶向运输、高容量药物运载、热疗等方面有潜在应用价值。
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