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公开(公告)号：CN101857856A
公开(公告)日：2010-10-13
申请号：CN201010187108.8
申请日：2010-05-25
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用，一种枯草芽孢杆菌脂肪酶，大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-/Lip A f10-H1(I12V/L140F/D144E)，CCTCC NO：M2010058。这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，其步骤是：第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因；第二是设计3对诱变引物，通过重叠PCR将突变引入脂肪酶Lip A基因；第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(I12V/L140F/D144E)；第四是在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白；第五是纯化蛋白。一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在洗涤剂工业中的应用。本发明方法易行，成本低廉，高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、能源、化工和医药等行业具有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN101838634A
公开(公告)日：2010-09-22
申请号：CN201010187107.3
申请日：2010-05-25
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用，一种枯草芽孢杆菌脂肪酶，大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-Lip A f12-C2(R33W/L140F)，CCTCC NO：M2010057。这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，其步骤是：第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因；第二是设计二对诱变引物，通过重叠PCR法将两个突变位点依次引入脂肪酶Lip A基因；第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(R33W/L140F)；第四是在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达目的蛋白；第五是纯化蛋白。一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在皮革加工中的应用。本发明方法易行，成本低廉，高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、化工和医药等行业具有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN101838634B
公开(公告)日：2012-04-25
申请号：CN201010187107.3
申请日：2010-05-25
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用，一种枯草芽孢杆菌脂肪酶，大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-Lip A f12-C2(R33W/L140F)，CCTCC NO：M2010057。这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，其步骤是：第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因；第二是设计二对诱变引物，通过重叠PCR法将两个突变位点依次引入脂肪酶Lip A基因；第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(R33W/L140F)；第四是在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达目的蛋白；第五是纯化蛋白。一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在皮革加工中的应用。本发明方法易行，成本低廉，高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、化工和医药等行业具有重要应用价值。
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公开(公告)号：CN101857856B
公开(公告)日：2012-02-01
申请号：CN201010187108.8
申请日：2010-05-25
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种枯草芽孢杆菌脂肪酶及制备方法和应用，一种枯草芽孢杆菌脂肪酶，大肠杆菌(Escherichia coli)BL21/pET28a-/Lip A f10-H1(I12V/L140F/D144E)，CCTCC NO：M2010058。这种高活力脂肪酶突变体的编码基因具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，其编码的蛋白具有SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列，其步骤是：第一是通过PCR扩增出枯草芽孢杆菌脂肪酶Lip A结构基因；第二是设计3对诱变引物，通过重叠PCR将突变引入脂肪酶Lip A基因；第三获得高活力脂肪酶产生菌BL21(DE3)/Lip A(I12V/L140F/D144E)；第四是在大肠杆菌中诱导表达目的蛋白；第五是纯化蛋白。一种枯草芽孢杆菌脂肪酶在洗涤剂工业中的应用。本发明方法易行，成本低廉，高酶活脂肪酶突变株蛋白在食品、能源、化工和医药等行业具有重要应用价值。
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