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公开(公告)号:CN1156573C
公开(公告)日:2004-07-07
申请号:CN01114379.7
申请日:2001-07-25
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于葡萄糖传感器的融合蛋白的制备方法,其步骤是:首先合成编码聚赖氨酸的DNA链,将合成的DNA链在65℃褪火形成双链的短DNA片段;其次是通过基因拼接,构建融合蛋白的表达载体pPICGLT;第三是表达载体pPICGLT经限制性内切酶StuI线性化后,用原生质体转化法转化进酵母中;第四是酵母重组子的筛选,提取酵母的基因组DNA作检测;第五是融合蛋白的表达、纯化,转化子在30℃下MM培养基中培养72小时,每24小时加一次甲醇;第六是融合蛋白与介体的连接;第七是葡萄糖传感器的制备;第八是电化学检测。本发明制备葡萄糖传感器测量线性范围宽,可达45mmol/L,且响应信号大,保存期长。
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公开(公告)号:CN1485617A
公开(公告)日:2004-03-31
申请号:CN02139105.X
申请日:2002-09-26
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: G01N33/50 , G01N33/576 , C12Q1/25
Abstract: 本发明公开了一种光循环放大型生物芯片检测的方法。该方法将酶循环和生物发光结合起来,通过NADH/NAD+氧化还原对在电极上的循环实现FMNH2的积累,高度积累的FMNH2与其他发光底物荧光素酶、长链的醛及氧气反应发出波长490nm的荧光,这种光维持时间长,光密度大。本发明不仅灵敏度高、成本低廉而且操作简单、适用于各类生物样品的分析,在高密度生物芯片及蛋白质芯片的开发方面有极好前景。
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公开(公告)号:CN1348993A
公开(公告)日:2002-05-15
申请号:CN01133630.7
申请日:2001-11-02
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种固相载体上校读PCR检测基因突变的方法,设计引物,经二硫化物和磷酸修饰处理后,固定于普通载玻片,进行固相PCR反应;在PCR过程中,利用DNA多聚酶的3’-5’外切酶活性,实现突变基因的固相有效扩增,PCR过程中掺入生物素,扩增产物用酶标方法进行原位检测。本发明可对同一基因多个突变发生位点进行同步检测,对多个不同基因的基因突变情况进行检查,检测速度快,灵敏度高,操作简便,成本低,可用于细菌耐药性、遗传病等的临床检测。
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公开(公告)号:CN1485434A
公开(公告)日:2004-03-31
申请号:CN02139106.8
申请日:2002-09-26
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
IPC: C12Q1/48
Abstract: 本发明公开了一种氨酰基转运核糖核酸(tRNA)合成酶识别型蛋白芯片的制备方法,它适用于蛋白质中基本氨基酸组分的检测。其特征在于将组成蛋白质的20种基本氨基酸对应的氨酰基转运核糖核酸合成酶(AARS)以阵列形式固定到芯片表面,再在一定条件下把20种荧光标记的转运核糖核酸固定到相应的合成酶上去,形成转运核糖核酸-氨酰基转运核糖核酸合成酶芯片。该芯片就可利用氨酰基转运核糖核酸合成酶对其相应氨基酸的特异识别作用来检测该种氨基酸在蛋白质中存在与否。最后综合20个样孔的反应情况,应用荧光扫描可检测出蛋白质中氨基酸的组成。本发明具有准确,灵敏,快速,方便的特点。
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公开(公告)号:CN1328156A
公开(公告)日:2001-12-26
申请号:CN01114379.7
申请日:2001-07-25
Applicant: 中国科学院武汉病毒研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于葡萄糖传感器的融合蛋白的制备方法,其步骤是:首先合成编码聚赖氨酸的DNA链,将合成的DNA链在65℃褪火形成双链的短DNA片段;其次是通过基因拼接,构建融合蛋白的表达载体pPICGLT;第三是表达载体pPICGLT经限制性内切酶StuⅠ线性化后,用原生质体转化法转化进酵母中;第四是酵母重组子的筛选,提取酵母的基因组DNA作检测;第五是融合蛋白的表达、纯化,转化子在30℃下MM培养基中培养72小时,每24小时加一次甲醇;第六是融合蛋白与介体的连接;第七是葡萄糖传感器的制备;第八是电化学检测。本发明制备葡萄糖传感器测量线性范围宽,可达45mmol/L,且响应信号大,保存期长。
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