一种用于葡萄糖传感器的融合蛋白的制备方法

    公开(公告)号:CN1156573C

    公开(公告)日:2004-07-07

    申请号:CN01114379.7

    申请日:2001-07-25

    Abstract: 本发明公开了一种用于葡萄糖传感器的融合蛋白的制备方法,其步骤是:首先合成编码聚赖氨酸的DNA链,将合成的DNA链在65℃褪火形成双链的短DNA片段;其次是通过基因拼接,构建融合蛋白的表达载体pPICGLT;第三是表达载体pPICGLT经限制性内切酶StuI线性化后,用原生质体转化法转化进酵母中;第四是酵母重组子的筛选,提取酵母的基因组DNA作检测;第五是融合蛋白的表达、纯化,转化子在30℃下MM培养基中培养72小时,每24小时加一次甲醇;第六是融合蛋白与介体的连接;第七是葡萄糖传感器的制备;第八是电化学检测。本发明制备葡萄糖传感器测量线性范围宽,可达45mmol/L,且响应信号大,保存期长。

    氨酰基转运核糖核酸合成酶识别型蛋白芯片的制备方法

    公开(公告)号:CN1485434A

    公开(公告)日:2004-03-31

    申请号:CN02139106.8

    申请日:2002-09-26

    Abstract: 本发明公开了一种氨酰基转运核糖核酸(tRNA)合成酶识别型蛋白芯片的制备方法,它适用于蛋白质中基本氨基酸组分的检测。其特征在于将组成蛋白质的20种基本氨基酸对应的氨酰基转运核糖核酸合成酶(AARS)以阵列形式固定到芯片表面,再在一定条件下把20种荧光标记的转运核糖核酸固定到相应的合成酶上去,形成转运核糖核酸-氨酰基转运核糖核酸合成酶芯片。该芯片就可利用氨酰基转运核糖核酸合成酶对其相应氨基酸的特异识别作用来检测该种氨基酸在蛋白质中存在与否。最后综合20个样孔的反应情况,应用荧光扫描可检测出蛋白质中氨基酸的组成。本发明具有准确,灵敏,快速,方便的特点。

    一种用于葡萄糖传感器的融合蛋白的制备方法

    公开(公告)号:CN1328156A

    公开(公告)日:2001-12-26

    申请号:CN01114379.7

    申请日:2001-07-25

    Abstract: 本发明公开了一种用于葡萄糖传感器的融合蛋白的制备方法,其步骤是:首先合成编码聚赖氨酸的DNA链,将合成的DNA链在65℃褪火形成双链的短DNA片段;其次是通过基因拼接,构建融合蛋白的表达载体pPICGLT;第三是表达载体pPICGLT经限制性内切酶StuⅠ线性化后,用原生质体转化法转化进酵母中;第四是酵母重组子的筛选,提取酵母的基因组DNA作检测;第五是融合蛋白的表达、纯化,转化子在30℃下MM培养基中培养72小时,每24小时加一次甲醇;第六是融合蛋白与介体的连接;第七是葡萄糖传感器的制备;第八是电化学检测。本发明制备葡萄糖传感器测量线性范围宽,可达45mmol/L,且响应信号大,保存期长。

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