公开(公告)号：CN102533577A

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201010595828.8

申请日：2010-12-14

Applicant: 武汉科前动物生物制品有限责任公司 ,  华中农业大学

Inventor： 陈关平 ,  陈守文 ,  何伟 ,  金梅林 ,  冀志霞 ,  徐高原 ,  陈波 ,  韩进 ,  尹争艳 ,  康超 ,  曹毅 ,  顾伟 ,  陈焕春

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明属于农业微生物技术领域，具体涉及一种猪链球菌2型高密度发酵培养基及应用。其特征在于，按重量体积比计的组分及配比如下：胰蛋白胨0.1％～5.0％，酵母粉0.1％～5.0％，醋酸铵0.01％～2.0％，MgSO4·7H2O 0.01％～2％、K2HPO4·3H2O 0.1％～4.0％、KH2PO4 0.01％～1％、葡萄糖0.01％～2.0％；按体积比的牛血清为1％～15％，灭菌前调培养基的pH至7.4～7.8。本发明有利于猪链球菌2型生长代谢，菌体生长速度快，能获得较高菌量，培养猪链球菌2型活菌数可达到85亿。本发明的培养基原材料来源广泛，成本低廉，可有效扩增猪链球菌2型，能满足大规模生产猪链球菌2型疫苗的需要。

公开(公告)号：CN102526718A

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201010620151.9

申请日：2010-12-30

Applicant: 华中农业大学 ,  武汉科前动物生物制品有限责任公司

Inventor： 金梅林 ,  涂加钢 ,  周红波 ,  徐晓娟 ,  陈焕春

IPC: A61K39/145 ,  A61K48/00 ,  A61P31/16 ,  C12N7/01 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及动物传染病技术领域。具体涉及一种重组H5N1禽流感病毒细胞苗及应用。重组H5N1禽流感病毒细胞苗包含重组H5N1禽流感病毒rC4/W1株，该rC4/W1株保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为：CCTCC NO：V201029，该重组H5N1禽流感病毒rC4/W1株的基因组中含有如SEQ ID NO：1-8所示的禽流感病毒的8个相关基因的片段。利用反向遗传学方法拯救出重组H5N1禽流感病毒，将该重组病毒在MDCK细胞上传代至稳定并将其灭活后作为油乳灭活苗。本发明以H9N2禽流感病毒为背景，换入H5N1亚型的禽流感病毒HA和NA基因，重组病毒所有基因片段均来自禽流感病毒，具有更好的安全性。重组H5N1禽流感病毒能在MDCK细胞上传代培养，获得高增殖滴度的毒株，克服了禽流感爆发时大量鸡胚的短缺问题。

公开(公告)号：CN101392232B

公开(公告)日：2012-06-27

申请号：CN200810197553.5

申请日：2008-11-07

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  曹莎 ,  陈焕春 ,  刘子铎 ,  张承才 ,  谭亚娣

IPC: C12N1/21 ,  C07K14/195 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及动物细菌学与人畜共患传染病学技术领域。具体涉及一种显性抑制突变体F427D作为炭疽芽孢杆菌毒素抑制剂及疫苗的应用。本发明通过炭疽芽孢杆菌致死毒素基因的克隆，蛋白表达与纯化，基因定点饱和突变等方法，得到炭疽芽孢杆菌保护性抗原蛋白(即显性抑制突变体F427D)，该突变体已成功地克隆到原核表达载体pGEX-KG中，构建了重组质粒pGEX-KG-PA(F427D)。包含该重组质粒的大肠杆菌被命名为Escherichia coli DH5α/pGEX-KG-PA(F427D)，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC-M208158。本发明还公开了制备该抗原蛋白的方法，利用该抗原蛋白制备炭疽毒素抑制剂和亚单位疫苗及其应用。

公开(公告)号：CN102464716A

公开(公告)日：2012-05-23

申请号：CN201010549519.7

申请日：2010-11-16

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 曹胜波 ,  梅力 ,  李么明 ,  陈龙 ,  邵林 ,  朱碧波 ,  吴兵 ,  陈焕春

IPC: C07K16/10 ,  C12N5/20 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明属于动物病毒学与免疫学技术领域，具体涉及一种用于猪、人和蚊子中乙型脑炎病毒抗原检测的双抗体夹心ELISA试剂盒。该试剂盒的核心试剂包括乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体作为一抗，兔源多克隆抗体作为二抗。本发明公开了乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体和兔源多克隆抗体的制备及纯化方法。还公开了乙型脑炎抗原的双抗体夹心ELISA检测方法。分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：C2010114。

公开(公告)号：CN101979501A

公开(公告)日：2011-02-23

申请号：CN201010286731.9

申请日：2010-09-17

Applicant: 华中农业大学 ,  武汉科前动物生物制品有限责任公司

Inventor： 金梅林 ,  石建 ,  陈焕春 ,  黄灿辉 ,  康超 ,  郭爱珍 ,  徐高原 ,  吴斌

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  C12N15/74 ,  A61K39/116 ,  A61K39/112 ,  A61K39/09 ,  A61P31/04 ,  C12R1/42

Abstract: 本发明属于动物细菌基因工程领域，具体涉及一种不含抗性标记的表达猪链球菌2型表面抗原sao基因片段的重组猪霍乱沙门氏菌株的构建、疫苗制备及应用。获得一株无抗性标记的表达猪链球菌2型sao基因片段的重组猪霍乱沙门氏菌asd-C500/Pya-saoA，其保藏号为CCTCC NO：M2010156。该重组菌缺失了猪霍乱沙门氏菌的asd基因，含有能在该菌株中表达asd和猪链球菌2型sao基因片段的质粒pYA-saoA。本发明还公开了该重组菌株与疫苗的制备方法以及在制备猪霍乱沙门氏菌-猪链球菌2型疫苗中的应用。

公开(公告)号：CN101457215B

公开(公告)日：2010-11-17

申请号：CN200810227851.4

申请日：2008-12-01

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 肖少波 ,  徐凤琴 ,  方六荣 ,  江云波 ,  陈焕春

IPC: C12N7/01 ,  A61K39/295 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  A61P31/20 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于动物病毒基因工程技术领域，具体涉及重组猪伪狂犬病毒-猪繁殖与呼吸综合征病毒-猪圆环病毒基因工程毒株构建、疫苗制备及应用。获得一株重组猪伪狂犬病毒-猪繁殖与呼吸综合征病毒-猪圆环病毒基因工程毒株E001，缺失了伪狂犬病毒主要毒力基因TK、糖蛋白基因gG、gE和gI，不表达伪狂犬病毒的功能性糖蛋白gG和gE/gI；能同时表达猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株的GP5m/M蛋白抗原和猪繁殖与呼吸综合征病毒国内变异株GP5蛋白及猪圆环病毒的ORF2蛋白。该毒株可刺激猪产生抗伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒攻击的保护性免疫反应，有效防止伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒的感染。还公开了三价基因工程疫苗的制备与应用。

公开(公告)号：CN101736085A

公开(公告)日：2010-06-16

申请号：CN200910272782.3

申请日：2009-11-18

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  白智迪 ,  石磊 ,  胡长敏 ,  彭清洁 ,  陈焕春 ,  巴小亮 ,  任泽民

IPC: C12Q1/68 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明属于动物病原分子检测领域，涉及牛支原体的环介导等温扩增检测方法。其步骤包括：(1)引物合成：根据牛支原体特异性基因UvrC的序列设计两对特异引物；(2)培养牛支原体；(3)提取牛支原体总DNA；(4)环介导等温扩增反应和(5)环介导等温扩增反应产物分析。在凝胶成像系统的紫外灯下观察是否有梯形条带，且其中最小的一条为157bp大小，或加入SYBR Green I后，若扩增产物变为黄绿色则为牛支原体阳性，若扩增产物为棕色则为牛支原体阴性。本发明可以100％扩增到临床分离到的牛支原体，且特异性强，对呼吸道常见菌可以作鉴别检测。本发明灵敏度高，检测下限为10个拷贝的阳性质粒。1小时出结果。实用性强，不需要昂贵的精密仪器。

公开(公告)号：CN101412984A

公开(公告)日：2009-04-22

申请号：CN200810225346.6

申请日：2008-10-30

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 金梅林 ,  李冉 ,  张安定 ,  陈焕春 ,  王雅 ,  康超 ,  陈博

IPC: C12N1/21 ,  C12P21/00 ,  A61K39/09 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于家畜传染病疫苗制备技术领域。具体涉及一种猪链球菌2型三组分亚单位疫苗及其制备方法。涉及本发明的核心技术是制备了能够分泌猪链球菌2型抗原蛋白1036N，0197和enolase，表达上述抗原蛋白的重组大肠杆菌Escherichia coli BL21/pET－28a－1036N，Escherichia coli BL21/pET－28a－0197和Escherichia coli BL21/pET－28a－enolase，保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号分别为CCTCC NO：M208147；CCTCC NO：M208146和CCTCC NO：M208148。本发明还公开了适用于猪链球菌2型的三组分亚单位疫苗的制备方法及用途。

公开(公告)号：CN100455662C

公开(公告)日：2009-01-28

申请号：CN200510019939.3

申请日：2005-12-02

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 金梅林 ,  陈剑锋 ,  但汉并 ,  吴斌 ,  方六荣 ,  陈焕春

IPC: C12N5/12 ,  C07K16/08 ,  G01N33/53 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种用于快速检测H5亚型禽流感病毒的乳胶凝集试剂盒。利用水溶性碳化二亚胺将抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体偶联到羧化聚苯乙烯胶乳颗粒的表面，建立了H5亚型禽流感病毒乳胶凝集检测方法，再辅以其它配套试剂制备了禽流感病毒H5亚型乳胶凝集检测试剂盒。禽流感病毒乳胶凝集检测试剂盒由盒体和设在盒体内的乳胶诊断试剂、样本处理液A，样本处理液B，阳性对照样品和阴性对照样品组成。本发明制备的试剂盒能够直接对H5亚型禽流感病毒进行检测，具有特异性强、灵敏度高、操作简便和诊断快速等显著优点。

公开(公告)号：CN101265457A

公开(公告)日：2008-09-17

申请号：CN200710052792.7

申请日：2007-07-20

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 贝为成 ,  陈焕春 ,  刘金林 ,  周锐 ,  何启盖 ,  金梅林 ,  方六荣 ,  吴斌 ,  肖少波 ,  曹胜波

IPC: C12N1/20 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04

Abstract: 本发明属于动物细菌基因工程领域，具体涉及一种区分疫苗免疫和野毒感染动物的猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型双基因缺失突变株的构建、疫苗及应用。本发明得到一株区分疫苗免疫动物和野毒感染动物的猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型基因缺失突变株APP－7－mut01(保藏号为CCTCC NO：M207004)。该株缺失APP血清7型两个主要的毒力因子apxIIC和apxIVAN基因。突变株对猪安全，且具良好免疫原性的毒素ApxIIA和ApxIVAC蛋白，保证了疫苗的免疫效力。用突变株的疫苗免疫动物，动物体内不再产生针对Apx IVAN蛋白抗体，而野毒猪感染的产生针对ApxIVAN蛋白抗体。本发明还公开了利用该双基因缺失突变株构建，疫苗制备及应用。