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公开(公告)号:CN103421728B
公开(公告)日:2015-05-27
申请号:CN201210205663.8
申请日:2012-06-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , A61K39/116 , A61K39/102 , A61K39/10 , A61P31/04 , C12R1/01
Abstract: 本发明属于动物细菌学和基因工程疫苗制备技术领域,具体涉及一种不含抗性标记的表达猪产毒多杀性巴氏杆菌toxA基因片段的重组支气管败血波氏杆菌菌株、含有该重组菌的疫苗,其制备方法与应用。本发明得到一株不含抗性标记的表达猪产毒多杀性巴氏杆菌toxA基因片段重组支气管败血波氏杆菌QH0814ΔaroA/toxA-N,该菌株缺失了支气管败血波氏杆菌的5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶aroA基因,该菌株含有猪产毒多杀性巴氏杆菌toxA基因片段。本发明还公开了该重组菌的制备方法及疫苗的应用。本发明的基因工程疫苗可以刺激猪产生抵抗猪产毒多杀性巴氏杆菌和猪源支气管败血波氏杆菌野毒株的保护性免疫反应,能有效防止猪产毒多杀性巴氏杆菌和猪源支气管败血波氏杆菌的双重感染。
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公开(公告)号:CN101575586A
公开(公告)日:2009-11-11
申请号:CN200910062245.6
申请日:2009-05-31
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物基因工程疫苗制备技术领域。具体涉及一种支气管败血波氏杆菌aroA(5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶)基因缺失菌株的构建,基因缺失疫苗的制备与应用。所述支气管败血波氏杆菌支气管败血波氏杆基因缺失菌株(Bordetella bronchiseptica)QH0814ΔaroA,保藏在中国典型培养物保藏中心,其保藏号为CCTCCNO:M208018,该菌株的缺失了5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶(aroA)基因全长1340bp,导致该菌株对芳香族氨基酸的代谢出现障碍。本发明利用该基因缺失菌株制备了支气管败血波氏杆菌基因缺失疫苗。本发明还公开了所述基因缺失菌株在制备支气管败血波氏杆菌基因缺失疫苗(弱毒活疫苗)的应用。
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公开(公告)号:CN100523173C
公开(公告)日:2009-08-05
申请号:CN200710063651.5
申请日:2007-02-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/31 , C12N15/70 , G01N33/543 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于动物细菌学与动物传染病学检测技术领域,具体涉及一种检测猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素抗体的ELISA试剂盒及其在防治猪进行性萎缩性鼻炎(progressive atrophic rhinitis,PAR)中的应用。该试剂盒包括盒体、盒体内包被有以纯化的表达毒素toxA基因C’端rPMT-C蛋白作为抗原的酶标板、阴、阳性标准血清、兔抗猪IgG酶标二抗、样品稀释液、底物显色A液、底物显色B液、终止液和洗涤液。还公开了一种表达猪产毒多杀性巴氏杆菌毒素toxA基因C’端rPMT-C蛋白的重组大肠菌BL21/pET28b-C2115(保藏号为CCTCC NO:M207012)的制备和rPMT-C蛋白的表达与纯化方法。本发明的试剂盒具有操作简便,诊断快速、准确,费用低等优点,适合于临床大规模对T+Pm进行血清学调查,可为PAR在猪群中的净化提供技术支撑。
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公开(公告)号:CN100503816C
公开(公告)日:2009-06-24
申请号:CN200510012147.3
申请日:2005-07-11
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N7/01 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于动物病毒基因工程技术领域,具体涉及重组伪狂犬病-猪繁殖与呼吸综合征基因工程毒株的构建、疫苗制备及应用。本发明得到一株重组伪狂犬病-猪繁殖与呼吸综合征基因工程毒株Pseudorabies virus HzauAVL-PRprrsvV-GP5mM,保藏在CCTCC,保藏编号:CCTCC-V200509。该毒株缺失了伪狂犬病毒主要毒力基因TK,不产生功能性的糖蛋白gE/gI;能同时表达猪繁殖与呼吸综合征病毒的GP5m和M蛋白抗原。该毒株可以刺激猪产生抵抗猪繁殖与呼吸综合征病毒和伪狂犬病毒的保护性免疫反应,有效防止猪繁殖与呼吸综合征病毒和伪狂犬病毒的感染。本发明的基因工程毒株可用于制备伪狂犬病-猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗。
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公开(公告)号:CN1978634A
公开(公告)日:2007-06-13
申请号:CN200510019939.3
申请日:2005-12-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/12 , C07K16/08 , G01N33/53 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种用于快速检测H5亚型禽流感病毒的乳胶凝集试剂盒。利用水溶性碳化二亚胺将抗H5亚型禽流感病毒血凝素蛋白单克隆抗体偶联到羧化聚苯乙烯胶乳颗粒的表面,建立了H5亚型禽流感病毒乳胶凝集检测方法,再辅以其它配套试剂制备了禽流感病毒H5亚型乳胶凝集检测试剂盒。禽流感病毒乳胶凝集检测试剂盒由盒体和设在盒体内的乳胶诊断试剂、样本处理液A,样本处理液B,阳性对照样品和阴性对照样品组成。本发明制备的试剂盒能够直接对H5亚型禽流感病毒进行检测,具有特异性强、灵敏度高、操作简便和诊断快速等显著优点。
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公开(公告)号:CN1303212C
公开(公告)日:2007-03-07
申请号:CN200410009157.7
申请日:2004-05-31
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物病毒学技术领域。公开了一种禽流感病毒的非结构蛋白基因NS1的cDNA序列,用该基因构建原核表达载体;将表达载体转化至大肠杆菌中得到重组菌株(Escherichia coli BL21/pET-28a-NS1);利用该菌株表达禽流感病毒非结构蛋白NS1;利用所述的表达蛋白建立酶联免疫吸附试验鉴别诊断方法,用于区分禽流感灭活疫苗免疫鸡与野毒感染鸡。本发明还涉及制备方法、鉴别诊断试剂盒及其应用。
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公开(公告)号:CN1884499A
公开(公告)日:2006-12-27
申请号:CN200610089329.5
申请日:2006-06-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/62 , A61K39/295
Abstract: 本发明属于动物病毒基因工程技术领域,具体涉及一种重组猪乙型脑炎-伪狂犬病基因工程毒株的构建、疫苗制备及应用。本发明得到一株重组猪乙型脑炎-伪狂犬病基因工程毒株Pseudorabies virus WKQ-JE-E001,保藏在CCTCC,保藏编号:CCTCC V200509。该毒株缺失了伪狂犬病毒主要毒力基因TK,不产生功能性的糖蛋白gG;能表达猪乙型脑炎病毒的E蛋白抗原。该基因工程毒株可以刺激猪产生抵抗猪乙型脑炎病毒和伪狂犬病毒的保护性免疫反应,有效防止猪乙型脑炎病毒和伪狂犬病毒的感染。本发明还公开了利用该基因工程毒株制备猪乙型脑炎-伪狂犬病基因工程疫苗及应用。
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公开(公告)号:CN1265841C
公开(公告)日:2006-07-26
申请号:CN200410000238.0
申请日:2004-01-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征的“自杀性”DNA疫苗以及该疫苗在防制猪繁殖与呼吸综合征中的应用。特征是,将猪繁殖与呼吸综合征病毒主要免疫原性基因ORF5插入“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA的BamHI位点构建而成;同时还构建了一种新的适合于制备该“自杀性”DNA疫苗的表达载体pSCA,该载体是在西门利克森林病毒复制子质粒型表达载体pSFV1的非结构蛋白基因上游引入人巨细胞病毒的立即早期启动子序列,在其多克隆位点下游引入SV40poly(A)序列。本发明的“自杀性”DNA疫苗结合了常规DNA疫苗与自主复制型RNA疫苗的优点,具有制备工艺简单、运输保存方便、安全和免疫效果好等特点。可用于猪繁殖与呼吸综合征的防制。
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公开(公告)号:CN1800374A
公开(公告)日:2006-07-12
申请号:CN200510012147.3
申请日:2005-07-11
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N7/01 , A61K39/12 , A61K39/295
Abstract: 本发明属于动物病毒基因工程技术领域,具体涉及重组伪狂犬病-猪繁殖与呼吸综合征基因工程毒株的构建、疫苗制备及应用。本发明得到一株重组伪狂犬病-猪繁殖与呼吸综合征基因工程毒株Pseudorabies virus HzauAVL-PRprrsvV-GP5mM,保藏在CCTCC,保藏编号:CCTCC-V200509。该毒株缺失了伪狂犬病毒主要毒力基因TK,不产生功能性的糖蛋白gE/gI;能同时表达猪繁殖与呼吸综合征病毒的GP5m和M蛋白抗原。该毒株可以刺激猪产生抵抗猪繁殖与呼吸综合征病毒和伪狂犬病毒的保护性免疫反应,有效防止猪繁殖与呼吸综合征病毒和伪狂犬病毒的感染。本发明的基因工程毒株可用于制备伪狂犬病-猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗。
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公开(公告)号:CN1640497A
公开(公告)日:2005-07-20
申请号:CN200410000238.0
申请日:2004-01-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征的“自杀性”DNA疫苗以及该疫苗在防制猪繁殖与呼吸综合征中的应用。特征是,将猪繁殖与呼吸综合征病毒主要免疫原性基因ORF5插入“自杀性”DNA疫苗表达载体pSCA的BamHI位点构建而成;同时还构建了一种新的适合于制备该“自杀性”DNA疫苗的表达载体pSCA,该载体是在西门利克森林病毒复制子质粒型表达载体pSFVl的非结构蛋白基因上游引入人巨细胞病毒的立即早期启动子序列,在其多克隆位点下游引入SV40 poly(A)序列。本发明的“自杀性”DNA疫苗结合了常规DNA疫苗与自主复制型RNA疫苗的优点,具有制备工艺简单、运输保存方便、安全和免疫效果好等特点。可用于猪繁殖与呼吸综合征的防制。
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