一种检测犬细小病毒和犬腺病毒的二重实时荧光PCR引物探针组合及应用

    公开(公告)号:CN118086590A

    公开(公告)日:2024-05-28

    申请号:CN202410355333.X

    申请日:2024-03-27

    Abstract: 本发明公开了一种检测犬细小病毒和犬腺病毒的二重实时荧光PCR引物探针组合及应用,属于生物检测技术领域。本发明根据目前犬细小病毒和犬腺病毒的特点,设计出一组检测犬细小病毒和犬腺病毒的二重实时荧光PCR引物探针组合,采用本发明的引物探针组合能够同时快速检测出目前全世界各地流行的各种类型的犬细小病毒和犬腺病毒,且灵敏度普遍高于现有技术。基于本发明引物探针组合的PCR方法可特异性检测犬细小病毒和犬腺病毒,并可根据定量结果尽快采取有效的治疗和防控措施,减少这些疾病对养犬业造成的危害,对犬传染病的防控具有重要意义。

    检测新城疫病毒抗体的多肽及其ELISA检测试剂盒

    公开(公告)号:CN110240635B

    公开(公告)日:2022-04-22

    申请号:CN201910496410.2

    申请日:2019-06-10

    Abstract: 本发明公开一种检测新城疫病毒抗体的多肽及其ELISA检测试剂盒,该试剂盒通过筛选的新城疫病毒HN蛋白的多肽包被酶标板,通过检测样品中血清抗体与多肽的结合能力,借助于辣根过氧化物酶标记的羊抗鸡Igγ的抗体,来检测血清中新城疫病毒抗体水平。该试剂盒检测禽流感病毒H5、H7、H9亚型抗体、鸡传染性法氏囊病病毒抗体、鸡传染性支气管炎病毒抗体均为阴性。该试剂盒可检测血凝抑制(HI)效价大于或等于4log2的血清,符合临床血清检测灵敏度的要求。与血凝抑制方法同时检测临床血清时,其符合率高达98.7%。且操作简便,无特殊材料要求,结果判定客观性好,不受操作人员主观判定的影响。适合作为新城疫疫苗免疫后抗体水平检测和监测的工具。

    基于Ngpiwi蛋白介导的禽多杀性巴氏杆菌基因敲除菌株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN109266593A

    公开(公告)日:2019-01-25

    申请号:CN201810970024.8

    申请日:2018-08-24

    Abstract: 本发明公开了一种基于Ngpiwi蛋白介导的禽多杀性巴氏杆菌基因敲除菌株及其构建方法和应用;所述禽多杀性巴氏杆菌基因敲除菌株为在禽多杀性巴氏杆菌基因组上缺失潜在毒力相关基因的ORF序列或部分序列的缺失菌株。该方法首先成功构建带有Ngpiwi和待缺失靶基因序列左右同源臂的重组质粒;其次将重组质粒电转入禽多杀性巴氏杆菌中,在28℃传代诱导双交换重组,PCR筛选出缺失靶基因序列的菌株,之后在42℃诱导质粒丢失,从而获得缺失潜在毒力基因相关序列的菌株。该遗传操作系统质粒较小,操作容易,应用广泛,不存在潜在的脱靶效应,敲除效率较高,无抗性基因筛选标记,为禽多杀性巴氏杆菌基因工程疫苗的研发提供了优良工具。

    nlrp3基因敲除的小鼠巨噬细胞系及构建方法

    公开(公告)号:CN106978399A

    公开(公告)日:2017-07-25

    申请号:CN201710083814.X

    申请日:2017-02-16

    Abstract: 本发明公开了一种nlrp3基因敲除的细胞系及构建方法,该方法利用CRISPR技术将染色体基因组上NLRP3的基因一个插入A而另外一个缺失AG而使得细胞完全丧失该蛋白的表达。而且该缺失细胞系形态生长速度等方面均与对照细胞无明显的差异。使用内毒素LPS能激活TNF‑α的表达,激活缺失细胞系的免疫反应,与正常细胞无显著性差异;而使用NLRP3的激活剂,其炎性小体激活的能力丧失,基本无IL‑1β的分泌。证实本发明中细胞系NLRP3功能缺失,而其它功能未受影响。综上,本发明中NLRP3缺失细胞系Nlrp3‑/‑RAW可作为研究NLRP3蛋白质功能、NLRP3炎性小体、药物负筛选的良好细胞模型。

    一种猪链球菌2型三组分亚单位疫苗及应用

    公开(公告)号:CN101412984B

    公开(公告)日:2012-05-23

    申请号:CN200810225346.6

    申请日:2008-10-30

    Abstract: 本发明属于家畜传染病疫苗制备技术领域。具体涉及一种猪链球菌2型三组分亚单位疫苗及其制备方法。涉及本发明的核心技术是制备了能够分泌猪链球菌2型抗原蛋白1036N,0197和enolase,表达上述抗原蛋白的重组大肠杆菌Escherichia coli BL21/pET-28a-1036N,Escherichia coli BL21/pET-28a-0197和Escherichia coli BL21/pET-28a-enolase,保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏编号分别为CCTCC NO:M208147;CCTCC NO:M208146和CCTCC NO:M208148。本发明还公开了适用于猪链球菌2型的三组分亚单位疫苗的制备方法及用途。

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