公开(公告)号：CN1982439A

公开(公告)日：2007-06-20

申请号：CN200510019996.1

申请日：2005-12-13

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 谭亚娣 ,  胡巧云 ,  晁彦杰 ,  钦博 ,  张桂容 ,  陈焕春 ,  张书环

IPC: C12N1/21 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于动物免疫学技术领域。公开了一种适用于牛结核检测试剂盒及其制备方法，所述的试剂盒，包含盒体、设在盒体内的V形底96孔反应板、牛结核分支杆菌野毒感染标准阳性血清、健康牛阴性血清、血清稀释液和1％致敏绵羊红细胞悬液。其中致敏绵羊红细胞悬液是由大肠杆菌表达的牛型分枝杆菌特异性分泌蛋白MPB70致敏得到的。本发明的试剂盒具有特异性强，灵敏度高，可应用于牛结核病抗体的检测。

公开(公告)号：CN101445789A

公开(公告)日：2009-06-03

申请号：CN200810197554.X

申请日：2008-11-07

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  曹莎 ,  陈焕春 ,  刘子铎 ,  张承才 ,  谭亚娣

IPC: C12N1/21 ,  C07K14/195 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及动物细菌学与人畜共患传染病学技术领域。具体涉及一种显性抑制突变体F427N作为炭疽芽孢杆菌毒素抑制剂及疫苗的应用。本发明通过炭疽芽孢杆菌致死毒素基因的克隆，蛋白表达与纯化，基因定点饱和突变等方法，得到炭疽芽孢杆菌保护性抗原蛋白(即显性抑制突变体F427N)，该突变体已成功地克隆到原核表达载体pGEX－KG中，构建了重组质粒pGEX－KG－PA(F427N)。包含该重组质粒的大肠杆菌被命名为Escherichia coli DH5α/pGEX－KG－PA(F427N)，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC－M208159。本发明还公开了制备该抗原蛋白的方法，利用该抗原蛋白制备炭疽毒素抑制剂和亚单位疫苗及其应用。

公开(公告)号：CN101392232B

公开(公告)日：2012-06-27

申请号：CN200810197553.5

申请日：2008-11-07

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  曹莎 ,  陈焕春 ,  刘子铎 ,  张承才 ,  谭亚娣

IPC: C12N1/21 ,  C07K14/195 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及动物细菌学与人畜共患传染病学技术领域。具体涉及一种显性抑制突变体F427D作为炭疽芽孢杆菌毒素抑制剂及疫苗的应用。本发明通过炭疽芽孢杆菌致死毒素基因的克隆，蛋白表达与纯化，基因定点饱和突变等方法，得到炭疽芽孢杆菌保护性抗原蛋白(即显性抑制突变体F427D)，该突变体已成功地克隆到原核表达载体pGEX-KG中，构建了重组质粒pGEX-KG-PA(F427D)。包含该重组质粒的大肠杆菌被命名为Escherichia coli DH5α/pGEX-KG-PA(F427D)，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC-M208158。本发明还公开了制备该抗原蛋白的方法，利用该抗原蛋白制备炭疽毒素抑制剂和亚单位疫苗及其应用。

公开(公告)号：CN101445789B

公开(公告)日：2011-01-26

申请号：CN200810197554.X

申请日：2008-11-07

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  曹莎 ,  陈焕春 ,  刘子铎 ,  张承才 ,  谭亚娣

IPC: C12N1/21 ,  C07K14/195 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及动物细菌学与人畜共患传染病学技术领域。具体涉及一种显性抑制突变体F427N作为炭疽芽孢杆菌毒素抑制剂及疫苗的应用。本发明通过炭疽芽孢杆菌致死毒素基因的克隆，蛋白表达与纯化，基因定点饱和突变等方法，得到炭疽芽孢杆菌保护性抗原蛋白(即显性抑制突变体F427N)，该突变体已成功地克隆到原核表达载体pGEX-KG中，构建了重组质粒pGEX-KG-PA(F427N)。包含该重组质粒的大肠杆菌被命名为Escherichia coli DH5α/pGEX-KG-PA(F427N)，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC-M208159。本发明还公开了制备该抗原蛋白的方法，利用该抗原蛋白制备炭疽毒素抑制剂和亚单位疫苗及其应用。

公开(公告)号：CN100494352C

公开(公告)日：2009-06-03

申请号：CN200610166551.0

申请日：2006-12-30

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  张书环 ,  陈焕春 ,  谭亚娣 ,  晁彦杰 ,  陈颖钰 ,  钦博 ,  吕文 ,  匡有吉

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  G01N33/544 ,  G01N33/532 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于动物细菌学与动物传染病学技术领域。具体涉及一种检测牛结核抗体的免疫胶体金试纸条及其制备方法。本发明的试纸条是由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬组装而成。在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；所述的结合垫上包被有MPB83蛋白—胶体金标记物；所述的硝酸纤维素膜上分别包被有由纯化的MPB70蛋白构成的检测线和由纯化的兔抗MPB83蛋白IgG构成的质控线。本发明还公开了牛分枝杆菌特异性抗原MPB83的制备。用于试纸条的特异性抗原之一的重组大肠杆菌Escherichia coli BL21/pET28a-MPB83保藏在CCTCC，保藏编号：CCTCC NO：M206142。本发明的试纸条具有特异性强，灵敏度高，可应用于牛结核抗体的检测。

公开(公告)号：CN101392232A

公开(公告)日：2009-03-25

申请号：CN200810197553.5

申请日：2008-11-07

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  曹莎 ,  陈焕春 ,  刘子铎 ,  张承才 ,  谭亚娣

IPC: C12N1/21 ,  C07K14/195 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及动物细菌学与人畜共患传染病学技术领域。具体涉及一种显性抑制突变体F427D作为炭疽芽孢杆菌毒素抑制剂及疫苗的应用。本发明通过炭疽芽孢杆菌致死毒素基因的克隆，蛋白表达与纯化，基因定点饱和突变等方法，得到炭疽芽孢杆菌保护性抗原蛋白(即显性抑制突变体F427D)，该突变体已成功地克隆到原核表达载体pGEX－KG中，构建了重组质粒pGEX－KG－PA(F427D)。包含该重组质粒的大肠杆菌被命名为Escherichia coli DH5α/pGEX－KG－PA(F427D)，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC－M208158。本发明还公开了制备该抗原蛋白的方法，利用该抗原蛋白制备炭疽毒素抑制剂和亚单位疫苗及其应用。

公开(公告)号：CN1995332A

公开(公告)日：2007-07-11

申请号：CN200610166551.0

申请日：2006-12-30

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  张书环 ,  陈焕春 ,  谭亚娣 ,  晁彦杰 ,  陈颖钰 ,  钦博 ,  吕文 ,  匡有吉

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/31 ,  G01N33/544 ,  G01N33/532 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于动物细菌学与动物传染病学技术领域。具体涉及一种检测牛结核抗体的免疫胶体金试纸条及其制备方法。本发明的试纸条是由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬组装而成。在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；所述的结合垫上包被有MPB83蛋白－胶体金标记物；所述的硝酸纤维素膜上分别包被有由纯化的MPB70蛋白构成的检测线和由纯化的兔抗MPB83蛋白IgG构成的质控线。本发明还公开了牛分枝杆菌特异性抗原MPB83的制备。用于试纸条的特异性抗原之一的重组大肠杆菌Escherichia coli BL21/pET28a－MPB83保藏在CCTCC，保藏编号：CCTCC NO：M206142。本发明的试纸条具有特异性强，灵敏度高，可应用于牛结核抗体的检测。