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公开(公告)号：CN119433100A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202411666160.X
申请日：2024-11-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本申请提供了一种基于多重荧光定量PCR的登革热病毒分型检测试剂盒及其检测方法，属于分子诊断生物学技术领域。其中，多重荧光定量PCR的登革热病毒分型检测试剂盒包括多重PCR反应液、登革热病毒阳性质控和阴性对照；多重PCR反应液包括分别用于检测登革热病毒I型、登革热病毒II型、登革热病毒III型、登革热病毒IV型的四条特异性探针和四对特异性引物。基于该试剂盒，通过对样品进行处理、配制反应体系、进行PCR扩增、读取荧光信号并进行定量分析等步骤，即可简便高效地实现精准定量检测登革热病毒分型及其拷贝数。并且，本申请通过优化荧光探针的设计和检测流程，显著提高了检测的灵敏度和准确性。
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公开(公告)号：CN119464568A
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202411666305.6
申请日：2024-11-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本申请提供了一种蚊媒病毒多重荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法。其中，检测试剂盒包括多重PCR反应液、阳性质控和阴性对照；所述多重PCR反应液包括分别用于检测登革热病毒、日本乙型脑炎病毒、寨卡病毒、西尼罗病毒的四条特异性探针和四对特异性引物；检测方法包括待测样品的提取、待检药品PCR混合液的配制、PCR扩增以及荧光信号的读取。通过上述方式，本申请能够对登革热病毒、日本乙型脑炎病毒、寨卡病毒、西尼罗病毒进行特异性识别，通过结合标准曲线，即可对登革热病毒、日本乙型脑炎病毒、寨卡病毒、西尼罗病毒进行定量检测，且检测效率高、可以稳定实施、操作简便快速，检测速度快，具有较高的检测准确度和灵敏度。
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公开(公告)号：CN118085088A
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202410084179.7
申请日：2024-01-19
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/28 , C12N15/12 , G01N33/577
Abstract: 本发明提供了一种抗猪CD14单克隆抗体的制备方法及其应用。本发明通过原核表达并纯化猪CD14蛋白作为抗原对小鼠进行免疫试验，并在免疫试验结束后对小鼠血清效价进行检测，筛选出血清效价最高的小鼠；再将骨髓瘤细胞与筛选出的血清效价最高的小鼠的免疫脾细胞进行融合，通过ELISA和间接免疫荧光法筛选出阳性杂交瘤细胞进行亚克隆后，最终获得能够稳定分泌猪CD14蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株。将杂交瘤细胞株CD14‑3G12注射小鼠腹腔后，收取腹水单克隆抗体CD14‑3G12，该抗体在免疫印迹检测中与猪内源性CD14分子有良好反应性；该抗体可用于免疫荧光和免疫组织化学检测猪淋巴结中相关细胞。
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公开(公告)号：CN117466997A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202310543885.9
申请日：2023-05-15
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明提供了一种具有中和活性的西尼罗病毒单克隆抗体及其制备方法与应用。本发明通过将灭活西尼罗病毒作为抗原对小鼠进行免疫试验，并在免疫试验过程中对小鼠血清的中和效价进行监测，筛选出血清中和效价最高的小鼠；再将骨髓瘤细胞SP2/0与筛选出的血清中和效价最高的小鼠的免疫脾细胞进行融合，筛选出阳性杂交瘤细胞进行亚克隆后，进一步通过中和试验对杂交瘤细胞株进行筛选，最终获得能够分泌具有中和活性的西尼罗病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株C9‑G11‑F3。该杂交瘤细胞株C9‑G11‑F3分泌的单克隆抗体不仅具有中和西尼罗病毒的能力，同时具有针对乙型脑炎病毒的交叉保护能力，具有较高的研究意义和应用价值。
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公开(公告)号：CN102464716A
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010549519.7
申请日：2010-11-16
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于动物病毒学与免疫学技术领域，具体涉及一种用于猪、人和蚊子中乙型脑炎病毒抗原检测的双抗体夹心ELISA试剂盒。该试剂盒的核心试剂包括乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体作为一抗，兔源多克隆抗体作为二抗。本发明公开了乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体和兔源多克隆抗体的制备及纯化方法。还公开了乙型脑炎抗原的双抗体夹心ELISA检测方法。分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：C2010114。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118685363A
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202410814256.X
申请日：2024-06-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/37 , C12N15/65 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一种永生化猪肺成纤维细胞系及其构建方法和应用。采用慢病毒系统将SV40LT基因导入原代细胞构建永生化细胞系。构建的SV40LT质粒携带mCherry荧光标记，不仅能够直观指示基因的导入，而且能够作为流式筛选标记，运用流式细胞术将细胞进行富集，进而获得效果良好的永生化细胞系。利用该方法构建的永生化猪肺成纤维细胞系节约了原代猪肺成纤维细胞的分离成本，避免了不同批次细胞的质量差异，提高了研究结果的重复性和准确性。运用相关病毒感染所述永生化猪肺成纤维细胞系，结果显示，永生化猪肺成纤维细胞系能够被猪伪狂犬病毒、乙型脑炎病毒和流感病毒感染，可作为相关猪病的防治及致病机制的细胞研究工具。
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公开(公告)号：CN118147084A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410084251.6
申请日：2024-01-19
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/28 , G01N33/577 , G01N33/68
Abstract: 本发明提供了一种杂交瘤细胞株及其分泌的抗猪CD172a单克隆抗体与应用。本发明通过制备高纯度的猪CD172a蛋白对小鼠进行免疫，并在免疫完成后筛选出血清效价最高的小鼠，将该小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合，采用ELISA和间接免疫荧光法筛选出阳性杂交瘤细胞进行亚克隆，制备了能够产生抗猪CD172a单克隆抗体的杂交瘤细胞株CD172a‑1F11，制备了特异性强、具备良好CD172a蛋白结合能力且易于生产的抗猪CD172a单克隆抗体。通过上述方式，本发明获得的抗猪CD172a单克隆抗体能和猪肺泡巨噬细胞中天然的CD172a蛋白发生特异性反应，可应用于免疫印迹、免疫组织化学检测和免疫荧光检测。
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公开(公告)号：CN118006560A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410121214.8
申请日：2024-01-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/28 , G01N33/68 , G01N33/577
Abstract: 本发明提供了一种杂交瘤细胞株及其分泌的抗猪CADM1单克隆抗体与应用。本发明通过制备高纯度的猪CADM1蛋白对小鼠进行免疫，并在免疫完成后筛选出血清效价最高的小鼠；再将骨髓瘤细胞Sp2/0与筛选出的血清效价最高的小鼠的脾细胞进行融合，采用ELISA和间接免疫荧光法筛选出阳性杂交瘤细胞进行亚克隆，得到能产生抗猪CADM1单克隆抗体的杂交瘤细胞株CADM1‑2C7以及特异性强、具备良好CADM1蛋白结合能力且易于生产的抗猪CADM1单克隆抗体。通过上述方式，本发明获得的抗猪CADM1单克隆抗体能和猪的组织或细胞中天然的CADM1蛋白发生特异性反应，可应用于免疫印迹、免疫组织化学检测和免疫荧光检测。
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公开(公告)号：CN103045544B
公开(公告)日：2015-01-14
申请号：CN201110314717.X
申请日：2011-10-17
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: Y02A50/394
Abstract: 本发明属于动物病毒学和动物基因工程技术领域，具体涉及一种表达西尼罗河病毒prM蛋白和E蛋白的重组假型杆状病毒Bac-G-prM/E的构建、疫苗制备及应用。本发明得到一种表达西尼罗河病毒prM蛋白和E蛋白的重组假型杆状病毒Bac-G-prM/E，该重组假型杆状病毒保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)保藏号为CCTCC NO：V201130。本发明还公开了重组假型杆状病毒的制备及在制备预防西尼罗河病毒疫苗中的应用。本发明为预防西尼罗河病毒提供了新型基因工程疫苗。
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公开(公告)号：CN102464716B
公开(公告)日：2013-10-30
申请号：CN201010549519.7
申请日：2010-11-16
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于动物病毒学与免疫学技术领域，具体涉及一种用于猪、人和蚊子中乙型脑炎病毒抗原检测的双抗体夹心ELISA试剂盒。该试剂盒的核心试剂包括乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体作为一抗，兔源多克隆抗体作为二抗。本发明公开了乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体和兔源多克隆抗体的制备及纯化方法。还公开了乙型脑炎抗原的双抗体夹心ELISA检测方法。分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：C2010114。
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