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公开(公告)号:CN118530349A
公开(公告)日:2024-08-23
申请号:CN202410708097.5
申请日:2024-06-03
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N5/20 , A61K39/42 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明属于免疫学领域,具体涉及一株可中和猪轮状病毒不同血清型毒株的单克隆抗体。该单克隆抗体的重链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的CDR1、氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的CDR2、氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的CDR3;单克隆抗体的轻链可变区包括氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的CDR1、氨基酸序列为RAS的CDR2、氨基酸序列如SEQ ID NO:5所示的CDR3。本发明单克隆抗体能有效中和不同血清型的PoRV毒株,抑制其对细胞的感染。
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公开(公告)号:CN112852873B
公开(公告)日:2023-03-24
申请号:CN202110154305.8
申请日:2021-02-04
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪δ冠状病毒感染性克隆质粒的构建方法,属于动物传染病防治和生物技术领域。本发明基于BAC系统和同源重组一步克隆法拯救PDCoV CHN‑HN‑2014株重组病毒的反向遗传系统,将毒株的5个基因片段一步克隆至中间载体pBAC‑M‑PDCoV中,获得包含PDCoV CHN‑HN‑2014株全长cDNA的重组质粒pBAC‑CHN‑HN‑2014,转染细胞后拯救出重组病毒rCHN‑HN‑2014,从而建立了猪δ冠状病毒反向遗传操作平台,为深入研究PDCoV的感染和致病机制奠定了基础。同时,针对目前我国还没有可用的PDCoV疫苗的实际问题,本发明的PDCoV感染性克隆平台,还可以用于研制更加安全高效的新型PDCoV基因工程疫苗,该平台还可作为活病毒载体,用于多联疫苗的研制,因此本发明对于该病毒相关的研究具有重大价值。
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公开(公告)号:CN114920817A
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202210515788.4
申请日:2022-05-12
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种猪干扰素λ4重组蛋白及其制备方法和应用。猪干扰素λ4(sIFN‑λ4)重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。将sIFN‑λ4片段连接到质粒中获得重组质粒,sIFN‑λ4的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示;将重组质粒转化大肠杆菌,然后进行菌液培养,并加入IPTG诱导,收集包涵体,溶解、纯化得到重组sIFN‑λ4蛋白。重组sIFN‑λ4蛋白能够诱导大肠杆菌、克雷伯肺炎杆菌和沙门氏菌等革兰氏阴性菌凝集从而阻断它们入侵真核细胞,同时还可以在细胞和动物机体水平抑制猪流行性腹泻病毒的感染。这些结果表明sIFN‑λ4具有阻断细菌感染和抗病毒感染的双重特性。
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公开(公告)号:CN107815440A
公开(公告)日:2018-03-20
申请号:CN201610824583.9
申请日:2016-09-14
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N7/00 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/93
CPC classification number: C12N7/00 , A61K39/12 , A61K2039/5252 , A61K2039/552 , C12N2770/20021 , C12N2770/20034
Abstract: 本发明属于动物病毒学与动物传染病学技术领域。具体涉及猪德尔塔冠状病毒株的分离、灭活疫苗的制备与应用。公开了猪德尔塔冠状病毒株的分离培养方法、灭活疫苗的制备及其应用。本发明分离的猪德尔塔冠状病毒CHN-HN-2014株保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC NO:V201650。采用本发明保藏的猪德尔塔冠状病毒制备的灭活疫苗具有良好的免疫原性,能够诱导仔猪产生较高水平的中和抗体,且能有效的保护免疫仔猪抵抗猪德尔塔冠状病毒的攻击。
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公开(公告)号:CN104862285B
公开(公告)日:2018-03-06
申请号:CN201510242555.1
申请日:2015-05-12
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明属于动物免疫学技术领域。具体涉及猪流行性腹泻病毒抗体捕获ELISA检测方法及应用。本发明以抗猪流行性腹泻病(PEDV)N蛋白的单克隆抗体包被酶标板,捕获原核表达的PEDV N蛋白作为抗原建立检测猪血清中猪流行性腹泻病毒抗体的捕获ELISA方法。本发明具有快速简便、特异灵敏等特点,适用于在体外检测猪血清中的猪流行性腹泻病毒抗体。其中分泌抗PEDV N蛋白单抗的杂交瘤细胞株N2D1保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:C2014174。本发明还公开了在体外猪流行性腹泻病毒抗体检测中的应用。
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公开(公告)号:CN103088063A
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN201110349009.X
申请日:2011-11-04
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/866 , A61K39/205 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于病毒学和基因工程技术领域,具体涉及一种表达狂犬病病毒主要免疫原性糖蛋白(RVG)的重组假型杆状病毒的构建、疫苗制备及应用。本发明得到的重组假型杆状病毒含有双表达盒,既含PPH启动子驱动RVG表达并使其展示在病毒粒子囊膜表面的昆虫细胞表达盒,又含CMV启动子驱动RVG在哺乳动物细胞中高效表达的哺乳动物细胞表达盒。用该重组杆状病毒制备的狂犬病疫苗具有亚单位疫苗和活病毒载体疫苗的双重特性。免疫小鼠后,能刺激机体产生高水平的狂犬病病毒特异性ELISA抗体、中和抗体以及IFN-γ,具有潜在的疫苗应用价值。该重组杆状病毒BV-RVG/RVG保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),其保藏编号为CCTCC NO:V201022。本发明还包含了该重组杆状病毒疫苗的制备及应用。
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公开(公告)号:CN101265457B
公开(公告)日:2011-01-26
申请号:CN200710052792.7
申请日:2007-07-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物细菌基因工程领域,具体涉及一种区分疫苗免疫和野毒感染动物的猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型双基因缺失突变株的构建、疫苗及应用。本发明得到一株区分疫苗免疫动物和野毒感染动物的猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型基因缺失突变株APP-7-mut01(保藏号为CCTCC NO:M207004)。该株缺失APP血清7型两个主要的毒力因子apxIIC和apxIVAN基因。突变株对猪安全,且具良好免疫原性的毒素ApxIIA和ApxIVAC蛋白,保证了疫苗的免疫效力。用突变株的疫苗免疫动物,动物体内不再产生针对Apx IVAN蛋白抗体,而野毒猪感染的产生针对ApxIVAN蛋白抗体。本发明还公开了利用该双基因缺失突变株构建,疫苗制备及应用。
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公开(公告)号:CN101260411B
公开(公告)日:2010-12-22
申请号:CN200710168929.5
申请日:2007-12-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/866 , C12N7/01
Abstract: 本发明属于动物基因工程技术领域,具体涉及一种重组杆状病毒载体骨架质粒的构建及应用。本发明克隆得到一种重组杆状病毒转移载体骨架质粒pFB-G-SFV,该质粒保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),保藏号为CCTCC NO:M207070。本发明还公开了质粒pFB-G-SFV在重组杆状病毒包装上的应用。
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公开(公告)号:CN101457215A
公开(公告)日:2009-06-17
申请号:CN200810227851.4
申请日:2008-12-01
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物病毒基因工程技术领域,具体涉及重组猪伪狂犬病毒-猪繁殖与呼吸综合征病毒-猪圆环病毒基因工程毒株构建、疫苗制备及应用。获得一株重组猪伪狂犬病毒-猪繁殖与呼吸综合征病毒-猪圆环病毒基因工程毒株E001,缺失了伪狂犬病毒主要毒力基因TK、糖蛋白基因gG、gE和gI,不表达伪狂犬病毒的功能性糖蛋白gG和gE/gI;能同时表达猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株的GP5m/M蛋白抗原和猪繁殖与呼吸综合征病毒国内变异株GP5蛋白及猪圆环病毒的ORF2蛋白。该毒株可刺激猪产生抗伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒攻击的保护性免疫反应,有效防止伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒的感染。还公开了三价基因工程疫苗的制备与应用。
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公开(公告)号:CN1605629A
公开(公告)日:2005-04-13
申请号:CN200310100114.5
申请日:2003-10-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及口蹄疫病毒的非结构蛋白基因3ABC;用该基因构建的原核表达载体;将该载体转化至大肠杆菌BL21而筛选得到的重组表达菌株(Escherichia coli BL21/pKG3ABC);利用该表达菌株表达口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC及其表达蛋白的纯化方法;利用表达蛋白建立的酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴别诊断方法。发明所包括的重组表达菌株Escherichia coli BL21/pKG3ABC,保藏在CCTCC,保藏日期:2003年9月12日,保藏编号:CCTCC:M203068。
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