公开(公告)号：CN113061581A

公开(公告)日：2021-07-02

申请号：CN202110301274.4

申请日：2021-03-22

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  朱杰 ,  陈曦 ,  王琛 ,  彭清洁 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈建国

IPC: C12N7/00 ,  A61K39/265 ,  A61P31/22 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一种山羊源牛疱疹病毒1型毒株BoHV‑1/Goat/CHN/HB01/2016。该毒株分离自腹泻山羊的粪便，在体外MDBK细胞中，通过病毒毒价、一步生长曲线、噬斑大小等结果，证明该毒株的复制能力减弱。病毒的基因组全长133,971bp，GC含量高达71％，通过gC片段的比对分析，该病毒属于BoHV‑1.1亚型，其中在gB、gK、gM、VP8蛋白中存在特异性突变，可能与毒株的致病力相关。该毒株攻毒牛后，通过临床症状评分、鼻腔排毒和肺脏组织病理变化，表明毒株致病力减弱。本发明为研究BoHV‑1的致病力和跨物种传播机制奠定重要基础，同时也为临床上的疫苗研制提供了重要材料。

公开(公告)号：CN102220263B

公开(公告)日：2012-10-03

申请号：CN201110117094.7

申请日：2011-05-06

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  白智迪 ,  巴晓亮 ,  胡长敏 ,  陈颖钰 ,  彭清洁 ,  张瑞 ,  祁晶晶 ,  崔鹏 ,  陈焕春

IPC: C12N1/20 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明公开了一种牛支原体致弱菌株及其应用，其步骤是A．分离鉴定牛支原体强毒株：通过病原分离培养、PCR检测，确定其病原为牛支原体B．牛支原体弱毒株的培育：将分离到的牛支原体在体药物体培养基，于培养箱中培养，培养基从红色变成透亮的黄色。.从上一代菌液取出1μL，接种PPLO培养基，培养。C．试验表明，该代次牛支原体已充分致弱。通过形态学检测，试验结果验证了由牛支原体MbovHB0801培育的150代传代菌株MbovHB0801-150.2。D．该牛支原体致弱株MbovHB0801-150.2，CCTCCNO：M2011102。具有良好的疫苗开发前景和广阔的临床应用价值，成本低、对动物体刺激性小，产生巨大的经济效益和社会效益。

公开(公告)号：CN102220263A

公开(公告)日：2011-10-19

申请号：CN201110117094.7

申请日：2011-05-06

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  白智迪 ,  巴晓亮 ,  胡长敏 ,  陈颖钰 ,  彭清洁 ,  张瑞 ,  祁晶晶 ,  崔鹏 ,  陈焕春

IPC: C12N1/20 ,  A61K39/02 ,  A61P31/04 ,  A61P11/00 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明公开了一种牛支原体致弱菌株及其应用，其步骤是A．分离鉴定牛支原体强毒株：通过病原分离培养、PCR检测，确定其病原为牛支原体。B．牛支原体弱毒株的培育：将分离到的牛支原体在体药物体培养基，于培养箱中培养，培养基从红色变成透亮的黄色。从上一代菌液取出1μl，接种PPLO培养基，培养。C．试验表明，该代次牛支原体已充分致弱。通过形态学检测，试验结果验证了由牛支原体MbovHB0801培育的150代传代菌株MbovHB0801-150.2。D．该牛支原体致弱株MbovHB0801-150.2，CCTCC M2011102。具有良好的疫苗开发前景和广阔的临床应用价值，成本低、对动物体刺激性小，产生巨大的经济效益和社会效益。

公开(公告)号：CN101736085B

公开(公告)日：2012-10-10

申请号：CN200910272782.3

申请日：2009-11-18

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  白智迪 ,  石磊 ,  胡长敏 ,  彭清洁 ,  陈焕春 ,  巴小亮 ,  任泽民

IPC: C12Q1/68 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明属于动物病原分子检测领域，涉及牛支原体的环介导等温扩增检测方法。其步骤包括：(1)引物合成：根据牛支原体特异性基因UvrC的序列设计两对特异引物；(2)培养牛支原体；(3)提取牛支原体总DNA；(4)环介导等温扩增反应和(5)环介导等温扩增反应产物分析。在凝胶成像系统的紫外灯下观察是否有梯形条带，且其中最小的一条为157bp大小，或加入SYBR Green I后，若扩增产物变为黄绿色则为牛支原体阳性，若扩增产物为棕色则为牛支原体阴性。本发明可以100％扩增到临床分离到的牛支原体，且特异性强，对呼吸道常见菌可以作鉴别检测。本发明灵敏度高，检测下限为10个拷贝的阳性质粒。1小时出结果。实用性强，不需要昂贵的精密仪器。

公开(公告)号：CN101736085A

公开(公告)日：2010-06-16

申请号：CN200910272782.3

申请日：2009-11-18

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  白智迪 ,  石磊 ,  胡长敏 ,  彭清洁 ,  陈焕春 ,  巴小亮 ,  任泽民

IPC: C12Q1/68 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明属于动物病原分子检测领域，涉及牛支原体的环介导等温扩增检测方法。其步骤包括：(1)引物合成：根据牛支原体特异性基因UvrC的序列设计两对特异引物；(2)培养牛支原体；(3)提取牛支原体总DNA；(4)环介导等温扩增反应和(5)环介导等温扩增反应产物分析。在凝胶成像系统的紫外灯下观察是否有梯形条带，且其中最小的一条为157bp大小，或加入SYBR Green I后，若扩增产物变为黄绿色则为牛支原体阳性，若扩增产物为棕色则为牛支原体阴性。本发明可以100％扩增到临床分离到的牛支原体，且特异性强，对呼吸道常见菌可以作鉴别检测。本发明灵敏度高，检测下限为10个拷贝的阳性质粒。1小时出结果。实用性强，不需要昂贵的精密仪器。