重组猪伪狂犬病毒-猪繁殖与呼吸综合征病毒-猪圆环病毒基因工程毒株及应用

    公开(公告)号:CN101457215A

    公开(公告)日:2009-06-17

    申请号:CN200810227851.4

    申请日:2008-12-01

    Abstract: 本发明属于动物病毒基因工程技术领域,具体涉及重组猪伪狂犬病毒-猪繁殖与呼吸综合征病毒-猪圆环病毒基因工程毒株构建、疫苗制备及应用。获得一株重组猪伪狂犬病毒-猪繁殖与呼吸综合征病毒-猪圆环病毒基因工程毒株E001,缺失了伪狂犬病毒主要毒力基因TK、糖蛋白基因gG、gE和gI,不表达伪狂犬病毒的功能性糖蛋白gG和gE/gI;能同时表达猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株的GP5m/M蛋白抗原和猪繁殖与呼吸综合征病毒国内变异株GP5蛋白及猪圆环病毒的ORF2蛋白。该毒株可刺激猪产生抗伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒攻击的保护性免疫反应,有效防止伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒的感染。还公开了三价基因工程疫苗的制备与应用。

    重组猪伪狂犬病毒-猪繁殖与呼吸综合征病毒-猪圆环病毒基因工程毒株及应用

    公开(公告)号:CN101457215B

    公开(公告)日:2010-11-17

    申请号:CN200810227851.4

    申请日:2008-12-01

    Abstract: 本发明属于动物病毒基因工程技术领域,具体涉及重组猪伪狂犬病毒-猪繁殖与呼吸综合征病毒-猪圆环病毒基因工程毒株构建、疫苗制备及应用。获得一株重组猪伪狂犬病毒-猪繁殖与呼吸综合征病毒-猪圆环病毒基因工程毒株E001,缺失了伪狂犬病毒主要毒力基因TK、糖蛋白基因gG、gE和gI,不表达伪狂犬病毒的功能性糖蛋白gG和gE/gI;能同时表达猪繁殖与呼吸综合征病毒经典毒株的GP5m/M蛋白抗原和猪繁殖与呼吸综合征病毒国内变异株GP5蛋白及猪圆环病毒的ORF2蛋白。该毒株可刺激猪产生抗伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒攻击的保护性免疫反应,有效防止伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒的感染。还公开了三价基因工程疫苗的制备与应用。

    一种PRRSV的四重荧光定量RT-PCR检测引物组及检测方法

    公开(公告)号:CN116144836B

    公开(公告)日:2023-08-18

    申请号:CN202211143428.2

    申请日:2022-09-20

    Abstract: 本发明公开了一种PRRSV的四重荧光定量RT‑PCR检测引物组及检测方法,所述检测引物组包括用于鉴别PRRSV1和PRRSV2的引物对(PRRSV‑F/R)和2种探针(PRRSV1‑P/PRRSV2‑P),以及用于鉴别PRRSV2亚型CA‑PRRSV、HP‑PRRSV和N‑PRRSV的引物对(CA‑NSP2‑F/R、HP‑NSP2‑F/R)和2种探针(CA‑NSP2‑P/HP‑NSP2‑P);基于该检测引物组开发的四重荧光定量RT‑PCR检测方法能够在短时间内确定PRRSV病毒的类型、多重感染以及毒株丰度,且具有良好的特异性、灵敏度、重复性和稳定性,可用于动物各脏器、血液、口鼻拭子、环境样等低微含量样品的检测,为预防猪群中PRRSV的传播提供了新的工具。

    一种PRRSV的四重荧光定量RT-PCR检测引物组及检测方法

    公开(公告)号:CN116144836A

    公开(公告)日:2023-05-23

    申请号:CN202211143428.2

    申请日:2022-09-20

    Abstract: 本发明公开了一种PRRSV的四重荧光定量RT‑PCR检测引物组及检测方法,所述检测引物组包括用于鉴别PRRSV1和PRRSV2的引物对(PRRSV‑F/R)和2种探针(PRRSV1‑P/PRRSV2‑P),以及用于鉴别PRRSV2亚型CA‑PRRSV、HP‑PRRSV和N‑PRRSV的引物对(CA‑NSP2‑F/R、HP‑NSP2‑F/R)和2种探针(CA‑NSP2‑P/HP‑NSP2‑P);基于该检测引物组开发的四重荧光定量RT‑PCR检测方法能够在短时间内确定PRRSV病毒的类型、多重感染以及毒株丰度,且具有良好的特异性、灵敏度、重复性和稳定性,可用于动物各脏器、血液、口鼻拭子、环境样等低微含量样品的检测,为预防猪群中PRRSV的传播提供了新的工具。

    一种修饰的猪圆环病毒2型ORF2基因及应用

    公开(公告)号:CN101092631B

    公开(公告)日:2010-04-14

    申请号:CN200710099886.X

    申请日:2007-05-31

    Abstract: 本发明属于动物基因工程与动物病毒学技术领域。具体涉及一种修饰的猪圆环病毒2型ORF2基因及其应用。其特征在于,将人组织纤维蛋白溶酶原激活剂的信号肽序列替换天然ORF2基因N-端的41个氨基酸,并缺失ORF2基因终止子,在其C端融合禽流感病毒HA基因跨膜区序列而获得的一种修饰型ORF2基因,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。表达所述基因的真核质粒pcDNA-spORF2Δ41TM的大肠杆菌DH5α/pcDNA-spORF2Δ41TM,保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC),其保藏号为CCTCC NO:M207069。本发明还公开了该基因与质粒在制备猪断奶多系统衰竭综合症疫苗中的应用。

    人工合成的修饰型高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因及应用

    公开(公告)号:CN101392261A

    公开(公告)日:2009-03-25

    申请号:CN200810048768.0

    申请日:2008-08-12

    Abstract: 本发明属于动物病毒学与动物传染病学技术领域,具体涉及一种人工合成的修饰型高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆及作为疫苗的应用。特征是,将人工合成的编码辅助性T淋巴细胞表位的核苷酸序列插入ORF5的中和表位和覆盖表位间,将中和表位两端的糖基化位点(N30、N34、N35和N51)进行消除,并把ORF5基因的密码子改造为猪体嗜好的密码子而获得,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所示。该修饰基因包含在真核表达质粒pcDNA3.1-SynORF5中,含有该质粒的大肠杆菌Escherichia coli DH5α/pcDNA3.1-SynORF5,保藏在CCTCC,保藏号为CCTCC NO:M208112。本发明还公开了该基因在制备猪繁殖与呼吸综合征DNA疫苗中的应用。

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