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公开(公告)号:CN103667334A
公开(公告)日:2014-03-26
申请号:CN201310542901.9
申请日:2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA及制备方法与应用。本发明以羊布鲁氏菌M5基因组为模板,PCR得到znuA基因的上、下游同源臂,并将其连接,得到片段ΔznuA;将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上,得到重组质粒pRE-ΔznuA;将该质粒导入羊布鲁氏菌M5-Δbp26细胞中,分别通过氯霉素和蔗糖选择培养基筛选,得到同源重组双交换子,为重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA。该菌株较M5亲本菌株,生长特性一致,遗传稳定使其不易返祖,毒力小且免疫效果保持良好,并因bp26基因缺失标记可应用于区分检测自然感染或人工免疫。因此,该菌株可作为一种效果更佳的标记疫苗应用于临床。
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公开(公告)号:CN102399909B
公开(公告)日:2013-05-01
申请号:CN201110416855.9
申请日:2011-12-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用。该可视化试剂盒包含引物组和显色物质;引物为如SEQ ID NO:1~4所示的序列,显色物质为钙黄绿素和氯化锰。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、钙黄绿素、氯化锰、MgSO4、FIP引物、BIP引物组、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;接着将反应体系于61~65℃恒温反应,灭活;通过自然光照下或紫外光下判读结果或是二者结合判读:在自然光下反应产物为绿色,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒;在紫外光下反应产物呈现明显的绿色荧光,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒。
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公开(公告)号:CN102512694A
公开(公告)日:2012-06-27
申请号:CN201210004296.5
申请日:2012-01-06
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K48/00 , A61K31/713 , A61K39/235 , A61K35/76 , C12N15/113 , C12N15/861 , C12N7/01 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一种抗口蹄疫病毒复制与感染的生物制剂及其制备方法与应用。该生物制剂的活性部分为siRNA-VP1和siRNA-2B;siRNA-VP1的转录模板的正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;siRNA-2B的转录模板的正义链的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过将siRNA-VP1的转录模板和siRNA-2B的转录模板分别与U6启动子连接,克隆入人复制缺陷型5型腺病毒质粒载体pAdeno-X,得到能分别转录、串联结构的质粒;接着通过包装细胞包装,得到该重组腺病毒Adeno-2B-VP1。通过实验证实,重组腺病毒Adeno-2B-VP1的防治效果优于重组腺病毒Adeno-2B和Adeno-VP1分别单独应用或联合应用的效果。该生物制剂能有抑制口蹄疫病毒复制和抗口蹄疫病感染。
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公开(公告)号:CN116218909B
公开(公告)日:2024-08-09
申请号:CN202310104792.6
申请日:2023-02-13
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/866 , C12N5/10 , A61K39/12 , A61K39/245 , A61P31/22 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及表达IBRV‑gD和BVDV‑E2的重组杆状病毒表达系统、构建方法及应用,属于生物技术领域,本发明利用杆状病毒表达系统成功表达重组蛋白gD、rgD、E2和E2BT,并对重组蛋白进行免疫原性分析。结果表明,rgD+E2BT二联亚单位疫苗可以诱导小鼠产生高水平的体液和细胞免疫应答,而且抗原表位的引入,增强了小鼠的体液和细胞免疫应答水平。本研究可为我国IBR和BVD的新型基因工程疫苗的研制提供新策略。
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公开(公告)号:CN118286396A
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202410499509.9
申请日:2024-04-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域,特别涉及一种TFEB蛋白及其编码基因在制备调控口蹄疫病毒复制产品中的应用。本发明将TFEB基因构建至pCAGGS‑flag‑N真核表达载体中获得TFEB‑flag质粒,该质粒转染进PK‑15细胞中成功表达TFEB蛋白。本发明发现过表达宿主TFEB基因,能显著降低口蹄疫病毒在PK‑15细胞中的复制水平,以TFEB为靶标的siRNA序列,通过靶向干扰TFEB基因,使得PK‑15细胞中FMDV的蛋白表达量和病毒滴度与对照组相比有所升高,表明TFEB蛋白具有抑制口蹄疫病毒复制的作用。
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公开(公告)号:CN118165988A
公开(公告)日:2024-06-11
申请号:CN202410422468.3
申请日:2024-04-09
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12N7/01 , C12N5/10 , A61K31/713 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种shRNA,特别涉及一种抑制HK2基因表达的shRNA及在制备抑制FMDV复制产品中的应用。本发明以HK2作为靶点,成功构建了猪源shHK2慢病毒干扰重组表达载体,并将其包装进HEK‑293T细胞,且稳转进PK‑15细胞,进而成功构建PK‑15shHK2稳转细胞系,本发明进一步发现干扰HK2表达后,可下调HK2基因表达,显著降低FMDV感染PK‑15细胞后的病毒滴度以及病毒蛋白表达水平,表明HK2干扰慢病毒具有抑制FMDV复制的作用,可用于制备抗FMDV病毒感染的药物,用于抑制FMDV病毒的增殖。
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公开(公告)号:CN114277191B
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202111670783.0
申请日:2021-12-31
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物组合物及应用。所述引物组合物含有核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示的引物;所述应用为核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示的引物在制备检测非洲猪瘟和/或猪瘟的试剂盒中的应用。本发明提供了检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物,并建立了非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒双重RAA琼脂糖凝胶电泳法的检测方法。通过使用本发明提供的引物对待测样本的基因组DNA和/或cDNA进行重组酶介导的等温扩增,再进行琼脂糖凝胶电泳检测,可快速、准确地检测出是否存在非洲猪瘟病毒和/或猪瘟病毒,具有操作简便、检测效率高等优点,对防控非洲猪瘟和猪瘟以及促进养猪业的发展具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN110029116B
公开(公告)日:2022-09-13
申请号:CN201910185932.0
申请日:2019-03-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/40 , C07K14/18 , C12N15/866 , C12N7/01 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种分泌表达多抗原表位猪瘟病毒E2基因的重组病毒及制备方法与应用。本发明根据密码子的偏爱性,人工设计合成了含多个抗原表位的重组CSFV C株的免疫原性基因E2并构建了含有上述E2基因的重组杆状病毒,提高了E2基因在杆状病毒中表达水平和免疫原性。利用本发明的重组杆状病毒所表达rE2蛋白制备亚单位疫苗,免疫日猪后,可诱导机体产生特异性免疫反应,并免受CSFV石门株的攻击;同时所述亚单位疫苗免疫动物后,还可用于鉴别诊断区分疫苗免疫和野毒感染动物,具有较大的应用前景。
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公开(公告)号:CN110029116A
公开(公告)日:2019-07-19
申请号:CN201910185932.0
申请日:2019-03-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/40 , C07K14/18 , C12N15/866 , C12N7/01 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种分泌表达多抗原表位猪瘟病毒E2基因的重组病毒及制备方法与应用。本发明根据密码子的偏爱性,人工设计合成了含多个抗原表位的重组CSFV C株的免疫原性基因E2并构建了含有上述E2基因的重组杆状病毒,提高了E2基因在杆状病毒中表达水平和免疫原性。利用本发明的重组杆状病毒所表达rE2蛋白制备亚单位疫苗,免疫日猪后,可诱导机体产生特异性免疫反应,并免受CSFV石门株的攻击;同时所述亚单位疫苗免疫动物后,还可用于鉴别诊断区分疫苗免疫和野毒感染动物,具有较大的应用前景。
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公开(公告)号:CN108841996A
公开(公告)日:2018-11-20
申请号:CN201810354518.3
申请日:2018-04-19
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开一种检测新城疫病毒的重组酶常温扩增(RT-RPA)核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7所示的引物及探针和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法为:首先配置RT-RPA反应体系,进行常温恒温反应;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内;阴性结果仅在质控区一条红色条带,在检测区内无红色条带出现。本发明首次采用RPA-核酸试纸条技术建立快速检测新城疫病毒的方法,具有操作简单,特异性高,且反应结果易于观察,安全无污染等特点,非常适用于临床现场检测。
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