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公开(公告)号：CN115896045A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202210825925.4
申请日：2022-07-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种杜梨E3泛素连接酶基因PbrATL18在植物抗干旱和炭疽病遗传改良中的应用，属于基因工程技术领域。PbrATL18基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，通过在植物中超表达所述PbrATL18基因或提高所述蛋白活力，以提高植物抗干旱和/或炭疽病性能。本发明通过分别构建基因超表达拟南芥转化载体和基因沉默杜梨幼苗转化载体，获得阳性植株苗进行干旱和炭疽病处理，结果发现过表达E3泛素连接酶基因PbrATL18能够有效维持细胞内活性氧的平衡，保持细胞渗透势稳定，可显著提高植物抗旱和抗炭疽病性能，为梨树的高耐旱抗病育种提供新的思路。
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公开(公告)号：CN114814056A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210435462.0
申请日：2022-04-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种碳酸二甲酯在提取植物表皮蜡质中的应用；本发明利用分析纯碳酸二甲酯提取植物表皮蜡质。碳酸二甲酯与氯仿提取相比，蜡质组分未发生明显改变，两种处理效果相当；同时该溶剂具有低毒、环保、绿色等特点，可有效用于植物表皮蜡质提取。
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公开(公告)号：CN108642166B
公开(公告)日：2022-07-19
申请号：CN201810483192.4
申请日：2018-05-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6881 , C12Q1/6869 , G16B20/30 , G16B30/10 , G16B30/20
Abstract: 本发明公开了利用梨花粉单细胞进行基因组单倍型组装的方法，利用体外花粉生长的特性结合酶法去除细胞壁制备单个无细胞壁的花粉原生质体，利用动物单细胞扩增技术对单倍型的单个花粉细胞进行全基因组扩增并测序。利用测序所获得的单倍型花粉基因组信息，采用‘12位二进制码’对38,304条人工染色体进行编号的方式建立每条人工染色体与‘砀山酥梨’两个亲本之间的联系。最后结合大部分BAC在锚定参考基因组中的定位情况，分别对砀山酥梨34条单倍型的染色体进行了独立的单倍型组装。这种方法有助于后续果树植物基因组的研究，为后续的分子育种提供新的基因资源，为实施绿色农业提供新的遗传资源。
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公开(公告)号：CN112794887B
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202110016563.X
申请日：2021-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了杜梨转录因子PbrWRKY40及其在提高植物总酸含量和抗盐遗传改良中的应用，属于基因工程技术领域。含PbrWRKY40编码基因的拟南芥转化植株的抗盐能力显著高于野生型植株，体内总酸含量也显著高于野生型；另外阳性植株钠离子含量、电导率、过氧化氢含量和超氧阴离子含量均低于野生型拟南芥。将杜梨幼苗体内的PbrWRKY40转录因子沉默后，野生型杜梨幼苗的抗盐能力优于沉默的杜梨幼苗，表明PbrWRKY40转录因子的沉默使杜梨幼苗的抗盐性减弱，体内总酸含量降低。因此，本发明提供了杜梨转录因子PbrWRKY40在提高植物总酸含量和抗盐遗传改良中的应用。
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公开(公告)号：CN113789343A
公开(公告)日：2021-12-14
申请号：CN202110904455.6
申请日：2021-08-06
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种体内检测ROP蛋白活性的方法，包括(1)构建融合蛋白表达载体并转化农杆菌感受态细胞；(2)植物叶片注射；(3)植物活体成像仪定性检测荧光强度；(4)酶标仪定量检测荧光素酶活性：使用酶标仪进行荧光扫描，以显示荧火素酶分解底物后产生荧光的强度来判断荧光素酶活性的强弱，从而检测目标蛋白AtROP1的活性强弱的程度。该方法基于RIC1作为ROP蛋白的下游效应子能特异地与活性形式的ROP结合这一特点，通过荧火素酶互补实验，借助烟草瞬时表达系统，利用植物活体成像仪和酶标仪进行定性定量检测荧光强度，从而实现体内检测ROP蛋白的活性。同时该方法还具有高灵敏度、可视化、可定量化和操作简单高效等特点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113621040A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202111019293.4
申请日：2021-09-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种杜梨耐盐基因PbHSF3A及其在植物耐盐遗传改良中的应用，属于基因工程技术领域，PbHSF3A基因为一种从杜梨(Pyrus betulifolia)中分离、克隆出的热激蛋白，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。将该基因构建植物超表达载体，并通过农杆菌介导的遗传转化将其分别导入拟南芥和杜梨中，获得转基因植株，经生物学功能验证，表明本发明所克隆的PbHSF3A基因具有提高植物耐盐性的功能。该基因的发现，为植物抗逆分子设计育种提供新的基因资源，能有效提高植物对于非生物逆境的抗性。
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公开(公告)号：CN111690046B
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN202010632107.3
申请日：2020-07-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了梨转录因子PbHB.G7.2及其在促进果实成熟中的应用，属于植物基因工程技术领域，提供了一种如SEQ ID No.1所示的具有促进果实乙烯的合成，加速果实成熟过程功能的转录因子PbHB.G7.2基因。将所述梨转录因子PbHB.G7.2瞬时转化到梨果实中获得的超表达系梨果实的乙烯释放量明显高于对照系，成熟过程也加快，经生物学功能验证，表明转录因子PbHB.G7.2能够结合并激活PbACS1b启动子，提高PbACS1b基因表达水平，具有提高梨果实乙烯合成量，能够促进梨果实成熟的功能。为促进梨果实成熟的分子育种提供新的基因资源，该遗传资源的开发有利于增加农民收入和降低农业成本。
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公开(公告)号：CN112067724B
公开(公告)日：2021-06-18
申请号：CN202010985806.6
申请日：2020-09-18
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种梨果实中可溶性糖酸的定性检测方法，属于有机检测技术领域。本发明中可溶性糖酸的测定采用超高效液相色谱检测(UPLC)，本发明通过精确限定了超高效液相色谱检测的条件，实现了可溶性糖和有机酸的定性检测，且该方法中可溶性糖的测定可控制在14min内出峰完全，有机酸的测定可控制在5min内出峰完全，比目前常规的高效液相色谱法(HPLC)(可溶性糖在20min出峰，有机酸在15min出峰)更节约时间，自动化程度高、重复性好，可推广到今后果实糖酸含量及组分的研究中，能够实现梨果实中糖酸含量大批量检测。
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公开(公告)号：CN112899286A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110040938.6
申请日：2021-01-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了PbrLRX.A2.1和PbrLRX.A2.2功能基因及其应用，本发明利用植物基因克隆技术从‘鸭梨’花粉中克隆得到两个新基因PbrLRX.A2.1、PbrLRX.A2.2，其核苷酸序列为SEQ ID No.1和SEQ ID No.3所示；其编码的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2和SEQ ID No.4所示。本发明体外表达的PbrLRX.A2.1、PbrLRX.A2.2重组蛋白在促进梨花粉生长，抵抗S‑RNase作用，减少劳动力，提高授粉效率方面提供了广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN112461632A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011370534.5
申请日：2020-11-30
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种从梨花粉管中提取纤维素的方法。该方法通过体外培养花粉，对花粉管纤维素的粗提取、有机试剂对纤维素的纯化、蒽酮比色法测定纤维素含量定。通过本发明的方法，对于研究花粉管的生长、花粉管细胞壁组成成分含量、细胞骨架、纤维素合成酶的翻译后修饰、转录因子调控、外界环境因素及激素等方面的因素影响下花粉管细胞壁纤维素对应含量变化具有重要意义。同时本发明中所涉及到的花粉管提取纤维素的方法可用于其他蔷薇科植物，其他不同品种可以借鉴使用。
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