一种基于双参数邻位连接反应精准灵敏检测肿瘤源外泌体方法

    公开(公告)号:CN117630369A

    公开(公告)日:2024-03-01

    申请号:CN202311689572.0

    申请日:2023-12-08

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 一种基于双参数邻位连接反应精准灵敏检测肿瘤源外泌体方法,1)通过迈克尔加成反应将曲率敏感肽和马来酰亚胺基团修饰的寡核苷酸链连接以合成曲率敏感肽探针;2)在具有外泌体和大囊泡的样品中加入适配体探针并孵育,加入曲率敏感肽探针并孵育,再进行稀释操作;3)将步骤2)的稀释样品与连接器、T4连接酶、T4连接酶缓冲液等试剂进行连接反应,得到连接反应产物;4)对步骤3)的连接反应产物与探针法qPCR预混液、正向引物、反向引物、TaqMan探针等试剂进行qPCR反应,实现对样品的高选择性和高灵敏度检测。本发明方法可以对肿瘤源外泌体进行高特异性鉴定和精确定量,在癌症的精确性和非侵入性诊断方面具有潜在的研究价值。

    一种对靶细胞进行定向保护的方法

    公开(公告)号:CN115141788A

    公开(公告)日:2022-10-04

    申请号:CN202210761852.7

    申请日:2022-06-30

    Abstract: 本发明公开了一种对靶细胞进行定向保护的方法,其包括如下步骤:使用至少两种的包含DNA序列的识别分子、核酸连接序列、HCR活性组件,所述识别分子包含可触发杂交链式反应的关联足趾DNA序列,所述HCR活性组件可与关联足趾DNA序列发生杂交链式反应,所述HCR活性组件包含DNA发卡链,至少一种所述DNA发卡链末端包含有一个以上偶联有含羧基聚合物;所述步骤包含所述识别分子对所述靶细胞进行靶向识别结合,所述至少两种识别分子在结合至所述靶细胞表面后通过所述核酸连接序列杂交连接,并触发所述识别分子与所述HCR活性组件进行杂交链式反应,在所述靶细胞外围形成壳层。本发明能够细胞表面形成保护层,加强了细胞的保护作用。

    一种用于精准组装单微粒的微流控芯片及单微粒组装方法

    公开(公告)号:CN113070107B

    公开(公告)日:2022-03-29

    申请号:CN202110203290.X

    申请日:2021-02-23

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于精准组装单微粒的微流控芯片及单微粒组装方法。所述微流控芯片结构包括通道层和封闭层。其中通道层结构包含两条并行独立的通道,分别含有捕获通道、环形旁路、组装腔室。其操作步骤包括:(1)进行单微粒的捕获(2)通过反向通溶液,转移单微粒到组装腔体(3)经过多次的捕获和转移,实现多细胞的组装。该芯片基于流体力学原理可以实现高效的单细胞捕获,通过流体流向的控制,操纵单微粒的组装,经过多次重复捕获和组装,即可实现精准的单微粒组装。该发明可应用于单细胞RNA测序、单细胞共培养、细胞分泌蛋白检测、单细胞相互作用分析等研究应用领域。

    SARS-CoV-2 S蛋白或RBD蛋白的核酸适配体及其应用

    公开(公告)号:CN111849994B

    公开(公告)日:2021-11-16

    申请号:CN202010246548.X

    申请日:2020-03-31

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种SARS‑CoV‑2 S蛋白或RBD蛋白的核酸适配体,所述的核酸适配体包括如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列。本发明的核酸适体能够提供SARS‑CoV‑2 S蛋白或RBD蛋白的快速、精准检测,同时适配体与血管紧张素转换酶(ACE2)有竞争作用,高效阻断SARS‑CoV‑2 S蛋白或RBD蛋白和ACE2结合,从而抑制病毒感染细胞,可作为药物用于防御和治疗SARS‑CoV‑2相关疾病,成为抗病毒的潜在药物。满足家庭、社区等多种应用场景的筛查需求,减少非必要的患者聚集,补充现有诊断和治疗体系。

    一种在人血浆中筛选的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110004147B

    公开(公告)日:2021-01-08

    申请号:CN201910164327.5

    申请日:2019-03-05

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种在人血浆中筛选的上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体及其制备方法和应用,提供在人血浆复杂生理环境中能够高特异性识别、高亲和力结合上皮细胞粘附分子EpCAM的核酸适体,发展了以人血浆模拟复杂生理环境的核酸适体筛选方法,可获得直接应用于外周血中捕获CTCs的核酸适体;最终获得的核酸适体具有易获得、成本低、不易失活、非免疫原性和无毒性等特点,并且利用该些序列实现了EpCAM蛋白、表达EpCAM蛋白的肿瘤细胞系的特异性识别及CTCs的捕获;另外,该些核酸适体在人血浆中具有高亲和力,确保其在生物分析和临床医学中的应用,并有望作为CTCs检测的分子识别工具而应用于液体活检。

    一种从孕妇外周血中分离游离胎儿细胞的方法

    公开(公告)号:CN108535228A

    公开(公告)日:2018-09-14

    申请号:CN201810289478.9

    申请日:2018-04-03

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明涉及一种从孕妇外周血中分离游离胎儿细胞的方法。该方法利用微流控芯片的细胞分离作用以及特异性亲和识别原理,实现了孕妇外周血中游离胎儿细胞(胎儿有核红细胞、滋养层细胞等)的高效率、高纯度捕获分离。在微流控芯片内,设计了具有特定几何排布方式的微阵列结构,以及修饰上具有亲和识别作用的分子基团如核酸适体、抗体、多肽等。调节微阵列结构的参数,可以调控不同尺寸的胎儿细胞与微阵列的碰撞效率,进而实现不同尺寸胎儿细胞的捕获富集。

    一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法

    公开(公告)号:CN108318694A

    公开(公告)日:2018-07-24

    申请号:CN201810084575.4

    申请日:2018-01-29

    Applicant: 厦门大学

    CPC classification number: G01N33/6854

    Abstract: 本发明公开了一种采用免疫试纸条对抗原进行定量检测的方法。所述方法包括如下步骤:(1)在铂纳米颗粒表面修饰抗体;(2)在硝酸纤维素膜上划上待测抗原的包被抗体作为检测线,划上二抗作为质控线,并干燥处理;(3)铂标抗体喷涂到聚酯纤维膜上,真空干燥;(4)将吸水纸、硝酸纤维素膜、聚酯纤维膜和玻璃纤维膜顺序贴在PVC胶板上组装成试纸条;(5)将试纸条插入待测液中或者将待测液滴加到结合垫上,进行移液反应,剪下相应的含有检测线的试纸条片段,与H2O2反应产气并测量气压,所得气压差值与抗原浓度呈正相关关系。该方法具有灵敏、便携、廉价和易于操作等优点。

    一种单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法

    公开(公告)号:CN103911432B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201410076295.0

    申请日:2014-03-04

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 单克隆表面展示核酸适体快速筛选方法。涉及一种核酸适体筛选技术,建立快速、高效的单克隆表面展示核酸适体筛选新方法。所述方法包括如下步骤:(1)将氨基修饰的正向引物通过NHS-氨基反应偶联到NHS修饰的微球表面;(2)将寡核苷酸文库通过液滴单分子微乳PCR以单克隆的形式扩增到偶联有正向引物的微球表面,每个微球上仅展示一种核酸序列;(3)通过单克隆微球库与靶标相关作用,可视化地考察表面展示序列与靶标的结合程度;(4)直接挑选获得能和靶标分子结合的单克隆微球,获取微球上的DNA序列,即可获得高质量核酸适体。该方法快速、高效、经济,实现了分子识别可视化监测,并可在无需克隆、测序、合成的条件下实现了富集库中核酸适体的快速筛选,获得选择性好、亲和力强的核酸适体。

    一种金纳米棒上快速修饰HS-DNA的方法

    公开(公告)号:CN104759620A

    公开(公告)日:2015-07-08

    申请号:CN201510193295.3

    申请日:2015-04-22

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种在金纳米棒上快速修饰HS-DNA的方法。所述方法包括如下步骤:(1)在CTAB存在下,通过种子生长的方法合成CTAB双分子层稳定的金纳米棒;(2)通过离心再用mPEG-SH和Tween20混合液重悬的方法取代金纳米棒表面的CTAB分子,在金纳米棒上修饰上mPEG-SH和Tween20;(3)向修饰有mPEG-SH和Tween20的金纳米棒溶液中加入HS-DNA和高浓度的酸或盐,20-40℃老化1小时;(4)通过离心再用缓冲液重悬去除游离的HS-DNA就能够获得修饰有HS-DNA的金纳米棒。该方法快速、高效、经济,使金纳米棒具有很高的稳定性,避免了缓慢增加盐浓度的老化过程,使金纳米棒上修饰HS-DNA的修饰步骤简化、修饰时间缩短。

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