-
公开(公告)号:CN117630369A
公开(公告)日:2024-03-01
申请号:CN202311689572.0
申请日:2023-12-08
Applicant: 厦门大学
IPC: G01N33/574 , G01N33/569 , C12Q1/686 , C12Q1/6888 , C12Q1/6886
Abstract: 一种基于双参数邻位连接反应精准灵敏检测肿瘤源外泌体方法,1)通过迈克尔加成反应将曲率敏感肽和马来酰亚胺基团修饰的寡核苷酸链连接以合成曲率敏感肽探针;2)在具有外泌体和大囊泡的样品中加入适配体探针并孵育,加入曲率敏感肽探针并孵育,再进行稀释操作;3)将步骤2)的稀释样品与连接器、T4连接酶、T4连接酶缓冲液等试剂进行连接反应,得到连接反应产物;4)对步骤3)的连接反应产物与探针法qPCR预混液、正向引物、反向引物、TaqMan探针等试剂进行qPCR反应,实现对样品的高选择性和高灵敏度检测。本发明方法可以对肿瘤源外泌体进行高特异性鉴定和精确定量,在癌症的精确性和非侵入性诊断方面具有潜在的研究价值。