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公开(公告)号:CN114717299B
公开(公告)日:2024-04-19
申请号:CN202111320426.1
申请日:2021-11-09
Applicant: 厦门大学
IPC: C12Q1/686
Abstract: 本发明公开了一种糖基化外泌体PD‑L1的检测方法,包括如下步骤:1)分离外泌体;2)连接第一偶合物与第一DNA,所述的第一偶合物能够与外泌体的糖基结合;3)加入第一偶合物与第一DNA的偶联物;4)加入PD‑L1适配体;5)稀释反应溶液;6)加入连接臂DNA;7)在连接臂的作用下DNA连接酶将第一DNA与PD‑L1适配体连接;8)对与连接臂互补的第一DNA与PD‑L1适配体连接部分进行扩增,检测扩增信号。本发明方法特异性检测糖基化的外泌体PD‑L1,无需分离释放糖蛋白,检测灵敏度高,检测限为1.09pg/mL,适用于多种生物体系。
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公开(公告)号:CN114717299A
公开(公告)日:2022-07-08
申请号:CN202111320426.1
申请日:2021-11-09
Applicant: 厦门大学
IPC: C12Q1/686
Abstract: 本发明公开了一种糖基化外泌体PD‑L1的检测方法,包括如下步骤:1)分离外泌体;2)连接第一偶合物与第一DNA,所述的第一偶合物能够与外泌体的糖基结合;3)加入第一偶合物与第一DNA的偶联物;4)加入PD‑L1适配体;5)稀释反应溶液;6)加入连接臂DNA;7)在连接臂的作用下DNA连接酶将第一DNA与PD‑L1适配体连接;8)对与连接臂互补的第一DNA与PD‑L1适配体连接部分进行扩增,检测扩增信号。本发明方法特异性检测糖基化的外泌体PD‑L1,无需分离释放糖蛋白,检测灵敏度高,检测限为1.09pg/mL,适用于多种生物体系。
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公开(公告)号:CN113252616A
公开(公告)日:2021-08-13
申请号:CN202110127881.3
申请日:2021-01-29
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种外泌体的糖基化研究方法,包括如下步骤:1)将分泌外泌体的细胞与非天然单糖共培养,细胞泌出含有非天然单糖的外泌体;2)将功能性探针标记到非天然糖上,所述的功能性探针具有第一标记;3)检测第一标记,获取外泌体信息。本发明方法操作简单,无需复杂的样品前处理;且无需裂解外泌体。
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公开(公告)号:CN114354913A
公开(公告)日:2022-04-15
申请号:CN202111675939.4
申请日:2021-12-31
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种外泌体PD‑L1糖基化检测方法,包括如下步骤:1)用PD‑L1适体即序列PDL1‑S‑T1,标记外泌体PD‑L1;2)通过修饰环炔基DBCO的DNA即序列DBCO‑S‑T2,与代谢标记的外泌体表面糖上叠氮的无铜环加成反应标记外泌体的糖;3)加入DNA连接臂,所述的连接臂分别具有和序列PDL1‑S‑T1的至少一段互补的序列以及和序列DBCO‑S‑T2的至少一段互补的序列;4)加入探针H1和H2,其中,所述的探针H1和探针H2互补,且其中一探针分别具有和序列PDL1‑S‑T1的至少一段互补的序列以及和序列DBCO‑S‑T2的至少一段互补的序列;5)扩增,检测扩增信号,得到外泌体PD‑L1糖基化信息。
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公开(公告)号:CN113219180A
公开(公告)日:2021-08-06
申请号:CN202110125651.3
申请日:2021-01-29
Applicant: 厦门大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种外泌体PD‑L1的研究方法,包括如下步骤:1)将细胞与非天然糖共培养,细胞泌出含有非天然糖的外泌体;2)将功能性探针标记到非天然糖上,所述的功能性探针具有第一标记;3)适体识别外泌体表面的蛋白,所述的适体具有第二标记;4)第一标记同第二标记相互作用,检测该相互作用的效果,从而检测外泌体蛋白的糖基化信息。即可原位检测外泌体PD‑L1的糖基化,操作简单,无需裂解细胞等侵入性操作,保持细胞的完整性和功能。
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公开(公告)号:CN114354913B
公开(公告)日:2024-07-19
申请号:CN202111675939.4
申请日:2021-12-31
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明公开了一种外泌体PD‑L1糖基化检测方法,包括如下步骤:1)用PD‑L1适体即序列PDL1‑S‑T1,标记外泌体PD‑L1;2)通过修饰环炔基DBCO的DNA即序列DBCO‑S‑T2,与代谢标记的外泌体表面糖上叠氮的无铜环加成反应标记外泌体的糖;3)加入DNA连接臂,所述的连接臂分别具有和序列PDL1‑S‑T1的至少一段互补的序列以及和序列DBCO‑S‑T2的至少一段互补的序列;4)加入探针H1和H2,其中,所述的探针H1和探针H2互补,且其中一探针分别具有和序列PDL1‑S‑T1的至少一段互补的序列以及和序列DBCO‑S‑T2的至少一段互补的序列;5)扩增,检测扩增信号,得到外泌体PD‑L1糖基化信息。
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公开(公告)号:CN114250221A
公开(公告)日:2022-03-29
申请号:CN202010995577.6
申请日:2020-09-21
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/10 , C12N15/115 , G01N33/569 , A61K31/7088 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种SARS‑CoV‑2 RBD中和核酸适体的筛选方法及核酸适体,其包括如下序列中的至少一种:SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:15。本发明的核酸适体更容易与RBD蛋白结合并“击垮”RBD蛋白与受体ACE2之间的相互作用,其对SARS‑CoV‑2具有很强的中和效应以及高度的结合亲和力,能够有效地抑制病毒对细胞的侵染。由于本发明的核酸适体特有的生产周期短、生产成本低、免疫原性低等优点,使其在检测、预防和治疗新冠病毒方面很好地节约了时间成本,对于目前新冠病毒的防治具有重要意义,并且在临床上亦有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN111849994A
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN202010246548.X
申请日:2020-03-31
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/115 , G01N33/569 , A61K31/7088 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种SARS-CoV-2 S蛋白或RBD蛋白的核酸适配体,所述的核酸适配体包括如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:8所示的核苷酸序列。本发明的核酸适体能够提供SARS-CoV-2 S蛋白或RBD蛋白的快速、精准检测,同时适配体与血管紧张素转换酶(ACE2)有竞争作用,高效阻断SARS-CoV-2 S蛋白或RBD蛋白和ACE2结合,从而抑制病毒感染细胞,可作为药物用于防御和治疗SARS-CoV-2相关疾病,成为抗病毒的潜在药物。满足家庭、社区等多种应用场景的筛查需求,减少非必要的患者聚集,补充现有诊断和治疗体系。
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公开(公告)号:CN111443197A
公开(公告)日:2020-07-24
申请号:CN202010143064.2
申请日:2020-03-04
Applicant: 厦门大学
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种肝癌循环肿瘤细胞表型分析方法,包括如下步骤,1)构建包括两个处理单元的微流控芯片,其中,每个处理单元包括:由多个横截面为三角形的微柱组成的微阵列、以及位于该三角形微阵列入口一侧的两个进样口和位于该三角形微阵列出口一侧的两个出样口;两个处理单元分别修饰上皮细胞粘附分子EpCAM抗体和去唾液酸糖蛋白受体ASGPR抗体2)样品分别从两个处理单元的入口进入,并从出口流出;3)对两个处理单元捕获后的循环肿瘤细胞通过免疫染色法鉴定上皮表型与非上皮表型。本发明方法能够提高肝癌循环肿瘤细胞的捕获效率、纯度和检出率,并可对肝癌循环肿瘤细胞进行表型分析。
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公开(公告)号:CN114250221B
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202010995577.6
申请日:2020-09-21
Applicant: 厦门大学
IPC: C12N15/10 , C12N15/115 , G01N33/569 , A61K31/7088 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种SARS‑CoV‑2 RBD中和核酸适体的筛选方法及核酸适体,其包括如下序列中的至少一种:SEQ ID NO:1‑SEQ ID NO:15。本发明的核酸适体更容易与RBD蛋白结合并“击垮”RBD蛋白与受体ACE2之间的相互作用,其对SARS‑CoV‑2具有很强的中和效应以及高度的结合亲和力,能够有效地抑制病毒对细胞的侵染。由于本发明的核酸适体特有的生产周期短、生产成本低、免疫原性低等优点,使其在检测、预防和治疗新冠病毒方面很好地节约了时间成本,对于目前新冠病毒的防治具有重要意义,并且在临床上亦有很好的应用前景。
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