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公开(公告)号：CN107557451A
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201710879446.X
申请日：2017-09-26
Applicant: 苏州大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6811 , C12Q1/6851 , C12Q1/686
Abstract: 本发明提供了荧光定量PCR检测KIR2DS1-mRNA的试剂盒所用扩增引物的制备方法，包括以下步骤：（1）DNA抽提；（2）将步骤（1）中提取的DNA标本运用PCR-SSO方法进行KIR基因分型筛选出KIR2DS1阳性DNA标本；（3）将筛选出的DNA标本进行PCR扩增，电泳分析，分离纯化；（4）将步骤（3）得到的KIR2DS1基因与T载体进行连接，转化，挑选菌群后，抽取质粒，测序；（5）采用软件对所得产物进行引物及荧光探针设计。本方法可以直接找到KIR2DS1的特征性序列，进而设计引物探针，成功避免了与其同源性极高的KIR2DL1基因序列对引物及探针设计的干扰。
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公开(公告)号：CN102636655B
公开(公告)日：2014-07-23
申请号：CN201210143662.5
申请日：2012-05-10
Applicant: 苏州大学附属第一医院
IPC: G01N33/96
Abstract: 本发明涉及免疫学领域，公开了一种荧光原位微量淋巴毒检测方法和试剂盒。该方法将受者血清中IgG抗体的Fab段与供者淋巴细胞表面抗原结合，洗板后加入由补体和抗人IgG轻链的二抗组成的混合液孵育，使所述二抗的Fab段与受者血清中IgG抗体结合，补体与二抗的Fc段结合，然后由补体介导细胞杀伤效应杀死靶细胞，接着进行荧光染色并利用计数法统计供者淋巴细胞的死亡率。本发明所述检测方法增加了抗人IgG轻链的二抗，以其为桥梁提高了补体结合机率，弥补了传统CDC方法由于受者血清抗体滴度较低而导致补体难以结合IgG抗体的缺陷，提高了检测淋巴细胞毒性的准确性和灵敏度，能够应用于器官移植前的配型检测中。
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公开(公告)号：CN102636655A
公开(公告)日：2012-08-15
申请号：CN201210143662.5
申请日：2012-05-10
Applicant: 苏州大学附属第一医院
IPC: G01N33/96
Abstract: 本发明涉及免疫学领域，公开了一种荧光原位微量淋巴毒检测方法和试剂盒。该方法将受者血清中IgG抗体的Fab段与供者淋巴细胞表面抗原结合，洗板后加入由补体和抗人IgG轻链的二抗组成的混合液孵育，使所述二抗的Fab段与受者血清中IgG抗体结合，补体与二抗的Fc段结合，然后由补体介导细胞杀伤效应杀死靶细胞，接着进行荧光染色并利用计数法统计供者淋巴细胞的死亡率。本发明所述检测方法增加了抗人IgG轻链的二抗，以其为桥梁提高了补体结合机率，弥补了传统CDC方法由于受者血清抗体滴度较低而导致补体难以结合IgG抗体的缺陷，提高了检测淋巴细胞毒性的准确性和灵敏度，能够应用于器官移植前的配型检测中。
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公开(公告)号：CN111793681A
公开(公告)日：2020-10-20
申请号：CN202010758304.X
申请日：2020-07-31
Applicant: 苏州大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6881 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种HLA-B位点等位基因分型试剂盒及其检测方法，该试剂盒包括用于扩增覆盖HLA-B位点第2,3,4外显子区域的扩增引物，以及分别针对第2,3,4外显子区域的特异性测序引物。该检测方法通过扩增引物对DNA样本进行扩增，然后分别使用针对HLA-B位点第2,3,4外显子区域的测序引物对扩增产物中的第2,3,4外显子进行测序，将得到的测序结果与数据库比对得到HLA-B位点等位基因型。该方法可以使用扩增引物直接针对HLA-B位点进行扩增及使用测序引物第2,3,4外显子区域进行测序，获得B位点上各种等位基因型，避免了与其同源性极高的HLA-A,C位点基因序列的干扰，提高了分型结果的准确性。
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公开(公告)号：CN111793681B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202010758304.X
申请日：2020-07-31
Applicant: 苏州大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6881 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种HLA‑B位点等位基因分型试剂盒及其检测方法，该试剂盒包括用于扩增覆盖HLA‑B位点第2,3,4外显子区域的扩增引物，以及分别针对第2,3,4外显子区域的特异性测序引物。该检测方法通过扩增引物对DNA样本进行扩增，然后分别使用针对HLA‑B位点第2,3,4外显子区域的测序引物对扩增产物中的第2,3,4外显子进行测序，将得到的测序结果与数据库比对得到HLA‑B位点等位基因型。该方法可以使用扩增引物直接针对HLA‑B位点进行扩增及使用测序引物第2,3,4外显子区域进行测序，获得B位点上各种等位基因型，避免了与其同源性极高的HLA‑A,C位点基因序列的干扰，提高了分型结果的准确性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111613269A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010424265.X
申请日：2020-05-19
Applicant: 苏州大学附属第一医院
Abstract: 本发明公开了一种预测HLA相合机率及错配类型的方法，包括以下步骤：（1）构建HLA数据库；（2）录入并提交待比对基因型；（3）将步骤（2）录入的等位基因的格式转换成与HLA数据库中的格式相匹配；（4）将步骤（3）经格式转换后的基因型进行排列组合，得出单倍型组合；（5）将步骤（4）得出的单倍型组合与步骤（1）构建的HLA数据库进行比对；（6）通过比对得到预测结果。本发明所述方法有助于临床选择10/10相合机率更大的初筛供者进行确认分型，并在8-9/10错配供者中选择可允许错配最优无关供者，节省患者检测费用，对减少移植并发症及提高移植生存均有着重要影响。
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公开(公告)号：CN106318960A
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201510341439.5
申请日：2015-06-18
Applicant: 苏州大学附属第一医院
IPC: C12N15/70 , C12N15/66 , C12N1/21 , C07K14/74 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及重组表达载体、宿主及其构建方法以及动物模型的构建方法。该重组表达载体由编码可溶性人源化HLA-A2蛋白的核苷酸和原核表达载体构成。特有的原核表达体系合成“足量”可溶性人源化HLA-A2蛋白；采用纯化后的HLA-A2蛋白作为免疫原，从而确保实验的“精确性”；不同浓度的HLA-A2蛋白可引起受鼠产生不同滴度的预存抗HLA-A2抗体，使预存抗体的产生强度变为“可控型”；成功观察预存抗体动物模型中“骨髓和脾脏中淋巴细胞”的变化。
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公开(公告)号：CN108949963A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201810938969.1
申请日：2018-08-17
Applicant: 苏州大学附属第一医院
IPC: C12Q1/6883 , C12Q1/6851 , C12N15/11
CPC classification number: C12Q1/6883 , C12Q1/6851 , C12Q2600/118 , C12Q2531/113 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明属于生物检测领域，具体涉及一种KIR2DL2 mRNA的荧光定量PCR检测方法及其检测试剂盒，引物和探针的设计方法包括以下步骤：（1）运用PCR‑SSOP方法对DNA样本进行KIR基因分型，筛选出KIR2DL2阳性DNA；（2）将阳性DNA样本进行PCR扩增、电泳；（3）提取KIR2DL2特异性DNA条带，经割胶、纯化后与T载体连接，经转化、挑选菌群后抽取质粒测序；（4）测序结果与KIR/IPD数据库进行比对，证实其为特征性基因序列；（5）根据特征性KIR2DL2基因序列，运用引物设计软件，设计出引物和探针。使用设计出的引物和探针进行基因检测。该方法提高了PCR检测的特异性和准确率。
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公开(公告)号：CN102676638B
公开(公告)日：2014-06-04
申请号：CN201110054421.9
申请日：2011-03-08
Applicant: 苏州大学附属第一医院
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，公开了用于检测BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变位点的扩增引物，其上游引物核苷酸序列如SEQ？ID？No.1或如SEQ？ID？No.2所示，下游引物核苷酸如SEQID？No.3所示。本发明还公开一种检测BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变位点的方法及试剂盒。本发明经一步法PCR扩增CML患者的BCR/ABL融合基因，再用特异性测序引物进行测序，在一个反应体系中可以检测二十多种常见的BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变，降低了实验的成本，极大的提高了基因测序结果的准确性和灵敏度，有着大规模推广应用的前景。
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公开(公告)号：CN102676638A
公开(公告)日：2012-09-19
申请号：CN201110054421.9
申请日：2011-03-08
Applicant: 苏州大学附属第一医院
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，公开了用于检测BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变位点的扩增引物，其上游引物核苷酸序列如SEQ ID No.1或如SEQ ID No.2所示，下游引物核苷酸如SEQID No.3所示。本发明还公开一种检测BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变位点的方法及试剂盒。本发明经一步法PCR扩增CML患者的BCR/ABL融合基因，再用特异性测序引物进行测序，在一个反应体系中可以检测二十多种常见的BCR/ABL融合基因ABL激酶区耐药突变，降低了实验的成本，极大的提高了基因测序结果的准确性和灵敏度，有着大规模推广应用的前景。
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