一种混合酶随机引物标记方法
    5.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118240919A

    公开(公告)日:2024-06-25

    申请号:CN202410409554.0

    申请日:2024-04-07

    Abstract: 本发明公开了一种混合酶随机引物标记方法,该方法是采用模板DNA,随机引物,含有标记的dNTP混合液,DNaseⅠ,DNA聚合酶Ⅰ以及缓冲液配制随机引物标记体系,置于PCR仪上进行反应即可。其中,随机引物为六至十核苷酸随机引物,反应条件为:37℃4小时,75℃10分钟,4℃保持。该方法可以直接标记长模板DNA,标记前长模板DNA无需片段化及纯化;标记产物序列较短,无需片段化及纯化;模板DNA添加量少,节约模板DNA;标记时间相对较短,节约实验时间。

    一种检测土壤中盐生链霉菌特异性引物及其设计方法和应用

    公开(公告)号:CN118006804A

    公开(公告)日:2024-05-10

    申请号:CN202311709007.6

    申请日:2023-12-13

    Applicant: 辽宁大学

    Abstract: 本发明属于微生物技术领域,具体涉及一种检测土壤中盐生链霉菌特异性引物及其设计方法和应用。首先通过高通量测序技术获得盐生链霉菌菌株(Streptomyces sp.Lnu‑12)全基因组序列,将全基因组序列在NCBI数据库中逐一对比,找到与其他基因组完全不匹配的特异性序列,根据特异性序列设计特异性引物,并通过亲缘关系相近的菌株检测引物的特异性,通过在土壤中添加不同次方的菌株检测引物的灵敏度,最终筛选到最特异性和灵敏度最好的引物F3。本发明明确了具有广谱抑菌活性的生防菌株盐生链霉菌Lnu‑12特异性引物的设计方法,可检测植物根际Lnu‑12的定殖数量,指导生产实践。

    一种制备二代测序接头的方法

    公开(公告)号:CN113981043B

    公开(公告)日:2024-04-16

    申请号:CN202111384997.1

    申请日:2021-11-22

    Abstract: 本发明属于测序技术领域,具体涉及一种制备二代测序接头的方法,本发明提供了一种制备二代测序接头的方法,该方法中的接头由酶切消化产生,相比于合成方法制备的接头,将产生更多有效的5’端磷酸基团,可以提高接头的链接效率;同时,本发明采用长模板退火,降低退火过程中简并碱基与其它固定序列(分子内或分子间)的结合,提高接头生成效率;此外,退火后直接消化,避免了其它方法中(如酶学方法)由于在链延伸步骤因为效率问题而导致的接头生成效率降低。可见,本发明采用酶切消化的方法制备接头,不仅制备过程更为简洁,而且产生有效接头的效率更高。

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