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公开(公告)号：CN118006534A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410204556.6
申请日：2024-02-24
Applicant: 扬州大学 , 吉林和元生物工程股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种表面表达非洲猪瘟IrrE蛋白的大肠杆菌重组菌的培育方法，包括以下步骤：S1、材料准备：IrrE重组大肠杆菌材料，限制性内切酶；T4连接酶，卡那霉素，蛋白电泳主要溶液、蛋白上样缓冲液以及培养基；S2、培养基配制：采用LB培养基，LB液体培养基内部配置有精解蛋白胨1.0％，酵母浸出粉0.5％，氯化钠1.0％，接着并搅拌使之完全溶解，该培育方法通过在对IrrE重组大肠杆菌生长中，持续添加新的营养物质，确保IrrE重组大肠杆菌的正常、快速的生长繁殖，解决了目前大肠杆菌重组菌在重组培育过程中营养液成分单一、造成局部大肠杆菌重组菌营养含量不足的问题，以此提升实验成品的品质，有利于后续非洲猪瘟疫苗的研制工作。
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公开(公告)号：CN119258280A
公开(公告)日：2025-01-07
申请号：CN202411165141.9
申请日：2024-08-23
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种CIMNP/Aln@Alg复合水凝胶的制备方法，包括，将乌贼墨囊加水揉捏搅拌至溶解，过滤得悬液；将所得悬液离心后取上清液继续离心，在沉淀中加水搅拌混匀，超声后重复离心三次得沉淀，将沉淀溶于蔗糖水中，冻干后得到乌贼墨纳米颗粒CIMNP；将乌贼墨纳米颗粒加入到海藻酸钠溶液中得到CIMNP@Alg溶液，将阿仑膦酸钠溶于葡萄糖酸钙溶液后加入到CIMNP@Alg溶液中，搅拌后得到CIMNP/Aln@Alg复合水凝胶。本发明制备的水凝胶有良好的的机械性能(如压缩模量、储能模量等)，能更好地适应骨缺损部位的力学环境。能在骨缺损部位提供稳定的支撑和力学环境，有助于防止移植物移位或塌陷，确保骨再生过程的顺利进行。
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公开(公告)号：CN118576569A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410551384.X
申请日：2024-05-07
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种具有靶向缓释功能的纳米细胞药物及其在骨质疏松治疗中的应用，包括，利用PLGA包被NO供体，延长NO供体的半衰期。其次，提取人脐静脉内皮细胞膜，用其包被PLGA‑SN，提高药物的靶向能力，并通过生物正交点击化学偶联到ADSC，形成具有骨质疏松靶向和缓释作用的ADSC‑SNNP纳米细胞药物。然后将其与OC前体细胞共诱导培养，明确其对OC分化和骨吸收的影响。同时与成骨样前体细胞MC3T3‑E1共培养，明确其对成骨细胞分化和骨形成的影响。然后注射到骨质疏松模型的大鼠体内，检测其对骨质疏松的治疗作用，并通过检测关键蛋白通路，阐明其作用的分子机制。
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公开(公告)号：CN118006690A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410035165.6
申请日：2024-01-10
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/866 , A61K39/295 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12N15/62 , C07K19/00 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于基因工程和疫苗开发技术领域，公开了三种猪致病性冠状病毒主要保护性蛋白串联表达载体的构建及应用，选取PEDV、PDCoV、TGEV的中和抗原表位基因，按一定顺序与pFastBacHTA昆虫表达载体连接，通过对不同位点的酶切及测序验证是否串联成功；而后通过重组杆状病毒真核表达系统对串联基因进行融合蛋白表达，以间接免疫荧光、Western Blot验证融合蛋白表达效果；将表达融合蛋白的重组病毒免疫小鼠并通过间接免疫荧光验证其免疫原性；并以串联重组病毒感染Sf9细胞后获得的病变细胞的破碎上清作为包被抗原，建立了针对三种冠状病毒主要保护性蛋白的ELISA检测方法。本发明为预防致猪腹泻的三种冠状病毒提供了一种行之有效的方法，为冠状病毒新型疫苗的开发提供了新思路。
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公开(公告)号：CN116375823B
公开(公告)日：2024-02-23
申请号：CN202211587776.9
申请日：2022-12-09
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/205 , C12N15/31 , C12N15/74 , C12N1/21 , C07K16/12 , G01N33/569 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了携带幽门螺杆菌Hp毒力因子CagA和VacA的B细胞表位靶标抗原（TBEA）及其分别在鸡伤寒沙门氏菌SadA类型和YaiU类型的T5SS展呈表达及其检测Hp凝集抗体中的应用。本发明的特异性TBEA分别来自CagA和VacA，分别利用两种类型的T5SS展呈表达。通过间接凝集试验，验证菌体表面能展呈两种TBEAs，两种TBEAs精准识别和结合针对Hp抗体，形成TBEA‑抗体复合物聚合体，肉眼清晰可见，从而实现特异、敏感、快速的Hp凝集抗体检测。本发明能够特异性检测特异性凝集抗体，且该敏感性显著高于基于蛋白质抗原的传统血清学检测技术，且能定量检测特异性凝集抗体效价。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117229421A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202311372841.0
申请日：2023-10-23
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K19/00 , C07K14/01 , C07K16/08 , C12N15/34 , C12N15/62 , C12N15/74 , C12N1/21 , G01N33/569 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒外囊膜蛋白CD2v胞外区靶标抗原特定表位及其核酸分子和应用。本发明所述的CD2v胞外区靶标抗原特定表位的表达序列来自非洲猪瘟CD2v表达毒株的外囊膜蛋白CD2v胞外区靶标抗原的特定B细胞表位，插入鸡白痢沙门氏菌Peg菌毛实现融合菌毛表面展呈表达。本发明具有特异、敏感、便捷等优势，有望成为非洲猪瘟CD2v表达毒株感染和非洲猪瘟病毒CD2v基因缺失株感染诊断和鉴别诊断的重要技术和方法。
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公开(公告)号：CN110218668A
公开(公告)日：2019-09-10
申请号：CN201910424369.8
申请日：2019-05-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N1/20 , G01N33/569 , C12R1/42
Abstract: 本发明涉及一种惰性载体沙门氏菌及其潜在应用，其有望开发成一种新型惰性载体菌，可应用于简便快速检测抗原或感染抗体的间接凝集试验检测方法的开发。所述惰性载体沙门氏菌目前已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心（CGMCC)，保藏地址为中国北京，保藏编号为CGMCCNo.17340，保藏日期为2019年3月18日，分类命名为沙门氏菌（Salmonella sp.），菌株代号S9。该沙门氏菌分离自健康鸡群，其惰性载体特性是在较高的工作浓度下的细菌数量与不同遗传背景的多种鸡源血清不发生任何肉眼可见的凝集反应，即与鸡源血清不产生非特异性凝集反应，我们称该沙门氏菌为惰性载体沙门氏菌。本发明为开发新型简便快速间接凝集检测方法提供了一种惰性载体菌和其潜在应用。
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公开(公告)号：CN101979664A
公开(公告)日：2011-02-23
申请号：CN201010574869.9
申请日：2010-12-06
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及K88大肠杆菌不同血清型的检测方法。该方法是先对待测样本进行PCR特异性检测，出现750bp条带的为待测样本为K88大肠杆菌，再分别用3对特异性引物对K88大肠杆菌DNA进行PCR扩增，根据扩增产物的500bp条带判断血清型。本发明的方法不仅分型结果准确无误，且没有假阳性和相互交叉反应的发生，还具有操作简便，可同时检测多个样品，成本较低的优点。
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公开(公告)号：CN119060995B
公开(公告)日：2025-04-01
申请号：CN202410948053.X
申请日：2024-07-16
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/70 , C07K16/40 , C07K16/06 , G01N33/573
Abstract: 本发明公开了一种兔抗鸡P4HB蛋白多克隆抗体的制备方法及其应用，包括，利用PCR方法扩增了鸡P4HB基因，并将其同源重组至pCOLDII载体中，构建了原核重组表达质粒pCOLDII‑P4HB。将重组质粒转化E.coli BL21(DE3)并用IPTG进行诱导表达，利用Ni‑NTA亲和层析方法进行蛋白纯化，将纯化的HIS‑P4HB蛋白与等体积的弗氏完全佐剂混合乳化后，将纯化的蛋白免疫新西兰大白兔，采用颈背部多点皮下注射，该抗体经ProteinA+G亲和层析纯化后冻存于‑80℃冰箱。原核表达的HIS‑P4HB蛋白表达在感受态细胞上清中，分子质量约为25KDa；实验兔4次免疫P4HB重组蛋白后采血并分离血清，经过纯化，该抗体能够通过Western blot和IF鉴定天然构象和线性化的P4HB蛋白的表达和细胞定位。
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公开(公告)号：CN118620037B
公开(公告)日：2024-12-13
申请号：CN202410652934.7
申请日：2024-05-24
Applicant: 扬州大学
IPC: C07K14/01 , C07K16/08 , G01N33/569 , C12N5/20
Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒（ASFV）外囊膜p12蛋白表面B细胞中和表位及其筛选验证方法和应用，具体公开了ASFV外囊膜蛋白p12中两种筛选的B细胞表位GN08和MA11，其中抗表位GN08的单克隆抗体产生的杂交瘤细胞（保藏号CCTCC NO:C2023192），其分泌的细胞上清液和小鼠源腹水，利用ASFV病毒感染猪原代肺巨噬细胞（PAM）的细胞中和试验验证其具备中和ASFV病毒的活性，而抗MA11表位的杂交瘤细胞分泌的细胞上清液和小鼠源腹水不具备中和ASFV病毒活性。因此，GN08表位是ASFV外囊膜p12蛋白表面B细胞的中和表位，具备开发成为中和病毒表位靶点的应用潜力。
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