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公开(公告)号:CN118006690A
公开(公告)日:2024-05-10
申请号:CN202410035165.6
申请日:2024-01-10
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/866 , A61K39/295 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12N15/62 , C07K19/00 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于基因工程和疫苗开发技术领域,公开了三种猪致病性冠状病毒主要保护性蛋白串联表达载体的构建及应用,选取PEDV、PDCoV、TGEV的中和抗原表位基因,按一定顺序与pFastBacHTA昆虫表达载体连接,通过对不同位点的酶切及测序验证是否串联成功;而后通过重组杆状病毒真核表达系统对串联基因进行融合蛋白表达,以间接免疫荧光、Western Blot验证融合蛋白表达效果;将表达融合蛋白的重组病毒免疫小鼠并通过间接免疫荧光验证其免疫原性;并以串联重组病毒感染Sf9细胞后获得的病变细胞的破碎上清作为包被抗原,建立了针对三种冠状病毒主要保护性蛋白的ELISA检测方法。本发明为预防致猪腹泻的三种冠状病毒提供了一种行之有效的方法,为冠状病毒新型疫苗的开发提供了新思路。
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公开(公告)号:CN112760320B
公开(公告)日:2023-11-28
申请号:CN202011394290.4
申请日:2020-12-02
Applicant: 扬州大学
Inventor: 金文杰 , 朱亭帆 , 钱金涵 , 沈子君 , 秦爱建 , 邵红霞 , 钱琨 , 叶建强 , 刘金彪 , 王倩倩 , 王建 , 王姣 , 柴文娴 , 周小兵 , 邓建中 , 郑建高
IPC: C12N15/113 , C12N5/10 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程和生物制品研究领域,具体涉及有效抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的外源性人工miRNA,所述外源性人工miRNA是下述1)或2)的双链核苷酸:1)正义链和反义链的序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;2)正义链和反义链的序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。与针对PEDV蛋白编码基因的siRNA相比,本发明筛选的针对病毒N基因保守序列的人工miRNA能抑制PEDV复制,不仅可作为抗PEDV的新型生物制剂进行开发,而且可用于抗病猪品系培育。
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公开(公告)号:CN118086305B
公开(公告)日:2024-12-10
申请号:CN202410322987.2
申请日:2024-03-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程和疫苗开发研究技术领域,具体涉及一种抑制猪轮状病毒的amiRNA及其应用。本发明提供了一种抑制猪轮状病毒的amiRNA,包括amiRNA‑323或amiRNA‑345。本发明所提供的amiRNA能够有效抑制猪轮状病毒,特别是PORV‑GD‑01‑2015毒株,经实施例验证,本发明所提供的amiRNA能有效抑制猪轮状病毒PORV‑GD‑01‑2015毒株的复制和增殖,也可与抗病毒药物联合使用并用于猪轮状病毒抗病体系的培育,为amiRNA疫苗开发治疗猪轮状病毒提供了一种行之有效的方法,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN118086305A
公开(公告)日:2024-05-28
申请号:CN202410322987.2
申请日:2024-03-21
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程和疫苗开发研究技术领域,具体涉及一种抑制猪轮状病毒的amiRNA及其应用。本发明提供了一种抑制猪轮状病毒的amiRNA,包括amiRNA‑323或amiRNA‑345。本发明所提供的amiRNA能够有效抑制猪轮状病毒,特别是PORV‑GD‑01‑2015毒株,经实施例验证,本发明所提供的amiRNA能有效抑制猪轮状病毒PORV‑GD‑01‑2015毒株的复制和增殖,也可与抗病毒药物联合使用并用于猪轮状病毒抗病体系的培育,为amiRNA疫苗开发治疗猪轮状病毒提供了一种行之有效的方法,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN115820638B
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202211207679.2
申请日:2022-09-30
Applicant: 扬州大学
Inventor: 金文杰 , 钱金涵 , 朱亭帆 , 秦爱建 , 邵红霞 , 羊扬 , 闫彩虹 , 叶建强 , 钱琨 , 王倩倩 , 邓建中 , 王建 , 郑建高 , 金松 , 洪枫 , 王培永 , 张文成 , 卞红春
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA及其应用,涉及基因工程技术领域。本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA,是针对水禽源ARV的L2基因保守序列设计得到。经试验证实可知,所述外源性人工miRNA不仅能够抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制及增殖,而且能够作为一种新的基因治疗手段,应用于抗水禽源禽呼肠孤病毒新型药物的研制,同时也可以用于水禽源禽呼肠孤病毒致病机制的研究以及转基因动物的制备,从而减少水禽源禽呼肠孤病毒对养禽业造成的经济损失。
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公开(公告)号:CN115820638A
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202211207679.2
申请日:2022-09-30
Applicant: 扬州大学
Inventor: 金文杰 , 钱金涵 , 朱亭帆 , 秦爱建 , 邵红霞 , 羊扬 , 闫彩虹 , 叶建强 , 钱琨 , 王倩倩 , 邓建中 , 王建 , 郑建高 , 金松 , 洪枫 , 王培永 , 张文成 , 卞红春
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA及其应用,涉及基因工程技术领域。本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA,是针对水禽源ARV的L2基因保守序列设计得到。经试验证实可知,所述外源性人工miRNA不仅能够抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制及增殖,而且能够作为一种新的基因治疗手段,应用于抗水禽源禽呼肠孤病毒新型药物的研制,同时也可以用于水禽源禽呼肠孤病毒致病机制的研究以及转基因动物的制备,从而减少水禽源禽呼肠孤病毒对养禽业造成的经济损失。
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公开(公告)号:CN112760320A
公开(公告)日:2021-05-07
申请号:CN202011394290.4
申请日:2020-12-02
Applicant: 扬州大学
Inventor: 金文杰 , 朱亭帆 , 钱金涵 , 沈子君 , 秦爱建 , 邵红霞 , 钱琨 , 叶建强 , 刘金彪 , 王倩倩 , 王建 , 王姣 , 柴文娴 , 周小兵 , 邓建中 , 郑建高
IPC: C12N15/113 , C12N5/10 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于基因工程和生物制品研究领域,具体涉及有效抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)复制的外源性人工miRNA,所述外源性人工miRNA是下述1)或2)的双链核苷酸:1)正义链和反义链的序列分别如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;2)正义链和反义链的序列分别如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。与针对PEDV蛋白编码基因的siRNA相比,本发明筛选的针对病毒N基因保守序列的人工miRNA能抑制PEDV复制,不仅可作为抗PEDV的新型生物制剂进行开发,而且可用于抗病猪品系培育。
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