一种表达鹅细小病毒VP3蛋白的重组杆状病毒的构建方法

    公开(公告)号:CN116286989A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310132143.7

    申请日:2023-02-20

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种表达鹅细小病毒VP3蛋白的重组杆状病毒的构建方法,属于生物技术领域;包括以下步骤:(1)构建GPV‑VP3基因重组杆状病毒表达载体。(2)表达重组GPV蛋白的杆状病毒包装和传代。(3)将带有GPV‑VP3基因的重组杆状病毒质粒转染sf9,28℃培养5‑7天,待70%细胞出现病变时收集细胞裂解上清,作为第一代重组杆状病毒种毒并保存,之后进行病毒传代,传至第三代时扩大培养。本发明所述的鹅细小病毒VP3蛋白利用杆状病毒载体表达,表达量高且带有易于纯化的His标签,可以制备成GPV亚单位疫苗,也可以建立基于VP3蛋白的鹅细小病毒间接免疫荧光方法。

    猪传染性胃肠炎病毒PLA检测试剂盒

    公开(公告)号:CN110607402B

    公开(公告)日:2023-01-03

    申请号:CN201910961479.8

    申请日:2019-10-11

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种猪传染性胃肠炎病毒PLA检测试剂盒。所述试剂盒包括(1)两株生物素标记的抗体:抗TGEV抗体1A2、抗TGEV抗体2B1;(2)探针;(3)连接液;(4)PCR mix:Universal PCR Assay、2×Fast Master Mix。将两株生物素标记的针对猪传染性胃肠炎病毒SA蛋白的特异性单克隆抗体稀释到工作浓度、与探针孵育进行连接,最后采用实时定量PCR扩增目的单链DNA,成功检测到猪传染性胃肠炎病毒。本发明解决了现有技术时间长、工作量大、灵敏度低、非特异性、操作复杂等缺陷;具有不涉及放射性物质,试剂与样品消耗量小,灵敏度高,无需特殊设备,操作简单的优点。

    猪传染性胃肠炎病毒PLA检测试剂盒

    公开(公告)号:CN110607402A

    公开(公告)日:2019-12-24

    申请号:CN201910961479.8

    申请日:2019-10-11

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明涉及一种猪传染性胃肠炎病毒PLA检测试剂盒。所述试剂盒包括(1)两株生物素标记的抗体:抗TGEV抗体1A2、抗TGEV抗体2B1;(2)探针;(3)连接液;(4)PCR mix:Universal PCR Assay、2×Fast Master Mix。将两株生物素标记的针对猪传染性胃肠炎病毒SA蛋白的特异性单克隆抗体稀释到工作浓度、与探针孵育进行连接,最后采用实时定量PCR扩增目的单链DNA,成功检测到猪传染性胃肠炎病毒。本发明解决了现有技术时间长、工作量大、灵敏度低、非特异性、操作复杂等缺陷;具有不涉及放射性物质,试剂与样品消耗量小,灵敏度高,无需特殊设备,操作简单的优点。

    具有预防和治疗小鹅瘟作用的单克隆抗体

    公开(公告)号:CN104357402A

    公开(公告)日:2015-02-18

    申请号:CN201410607122.7

    申请日:2014-10-31

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: Y02A50/407

    Abstract: 本发明公开了一种涉及两株能分泌具有预防和/或治疗作用的抗小鹅瘟病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株,细胞株利用纯化的小鹅瘟病毒免疫小鼠制备得到,分别命名为GPV-Mab-6D8和GPV-Mab-4E7,细胞保藏编号分别为CGMCC NO.9577和CGMCC NO.9578。一种具有预防和治疗小鹅瘟作用的单克隆抗体,所述单克隆抗体由保藏编号CGMCC NO.9577和CGMCC NO.9578的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明利用两株杂交瘤所制备的单克隆抗体不但可以在体外中和小鹅瘟病毒的感染,在动物实验中还能够预防和/或治疗小鹅瘟。

    耐药基因TetKLAMP检测试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN103773891A

    公开(公告)日:2014-05-07

    申请号:CN201410067290.1

    申请日:2014-02-26

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12Q1/6844 C12Q2531/119

    Abstract: 本发明涉及一种用环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测耐药基因TetK的试剂盒及检测方法。本发明含有10X等温反应缓冲液、Bst?DNA聚合酶8Μ/μL、l0mM?dNTP、100mM硫酸镁、10μM内引物1、10μM内引物2、l0μM外引物1、10μM外引物2和4M甜菜碱的反应液A、反应液B(50mM?MgCl2)和反应液C(100X的荧光染料SYBR?GreenⅠ)。通过对细菌基因组DNA提取、耐药基因TetK的环介导等温扩增、扩增产物的显色检测,从而检测出耐药基因TetK。解决了现有技术时间长、工作量大、交叉污染、操作复杂等缺陷。本发明具有特异性强、灵敏度高、快速且成本低、操作方法更简单,适于现场快速检测。

    一种淋巴组织特异性基因表达调控序列

    公开(公告)号:CN100510082C

    公开(公告)日:2009-07-08

    申请号:CN200710024386.X

    申请日:2007-06-18

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 一种淋巴组织特异性基因表达调控序列及其构建方法,本发明涉及基因表达调控和基因工程领域,提供了用于淋巴细胞中特异性高表达的基因调控DNA序列。具有马立克氏病病毒编码的vIL8基因淋巴组织特异性基因表达正调控的启动子-470-+10的DNA序列。人们可用该基因序列构建相应的表达载体,驱动目的基因在靶器官组织中的特异性表达,用这些调控DNA序列在特定组织,调控一些抑制肿瘤的基因,包括有调理作用或诱导凋亡、抑制细胞生长信号传导,从而达到抑制、消灭肿瘤的目的,用这些调控DNA序列进行免疫增强和调节的药物研究与开发。

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