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公开(公告)号:CN115820707B
公开(公告)日:2024-08-27
申请号:CN202210978289.9
申请日:2022-08-16
Applicant: 南开大学
IPC: C12N15/78 , C12N1/21 , C12N15/64 , C12N15/60 , C07K14/165 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/385
Abstract: 本发明提供了一种无抗生素介入的细菌表达系统的构建方法及应用,涉及原核表达技术领域。本发明提供了以减毒铜绿假单胞菌PAK‑JΔ6菌株为基础菌,删除嘌呤合成关键基因purEK,获得腺嘌呤营养缺陷型铜绿假单胞菌PAK‑JΔ6(Ade)。本发明通过引入携带purEK操纵子的质粒pExoS54(Ade)回补PAK‑JΔ6(Ade)背景菌株的营养缺陷,使其可在无嘌呤的培养基中生长。本发明利用purEK操纵子替换掉质粒上原有的氨苄青霉素抗性(AmpR)基因盒,利用腺嘌呤营养限制作为pExoS54(Ade)质粒的维持压力,从而避免了抗生素的使用。
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公开(公告)号:CN115820707A
公开(公告)日:2023-03-21
申请号:CN202210978289.9
申请日:2022-08-16
Applicant: 南开大学
IPC: C12N15/78 , C12N1/21 , C12N15/64 , C12N15/60 , C07K14/165 , A61K39/215 , A61P31/14 , C12R1/385
Abstract: 本发明提供了一种无抗生素介入的细菌表达系统的构建方法及应用,涉及原核表达技术领域。本发明提供了以减毒铜绿假单胞菌PAK‑JΔ6菌株为基础菌,删除嘌呤合成关键基因purEK,获得腺嘌呤营养缺陷型铜绿假单胞菌PAK‑JΔ6(Ade)。本发明通过引入携带purEK操纵子的质粒pExoS54(Ade)回补PAK‑JΔ6(Ade)背景菌株的营养缺陷,使其可在无嘌呤的培养基中生长。本发明利用purEK操纵子替换掉质粒上原有的氨苄青霉素抗性(AmpR)基因盒,利用腺嘌呤营养限制作为pExoS54(Ade)质粒的维持压力,从而避免了抗生素的使用。
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公开(公告)号:CN102260495A
公开(公告)日:2011-11-30
申请号:CN201110148365.5
申请日:2011-06-03
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种荧光靶向纳米材料及其制备方法。制备方法是:以聚合物为纳米材料载体,并对其进行叠氮化修饰,然后借助点击化学反应,将靶向分子叶酸和荧光示踪化合物偶联到聚合物链上,得到荧光靶向偶合物,再经过超声分散得到稳定的靶向性荧光纳米材料。本发明得到的靶向荧光纳米材料,分布均匀,可以有效到达肿瘤部位,通过荧光化合物的示踪作用,在实验和检测过程中,直观方便的考察靶向作用及病变发生情况。本发明的优点是:制备方法简便;荧光纳米体系稳定;靶向分子叶酸可提高荧光材料的靶向性。
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公开(公告)号:CN102012425A
公开(公告)日:2011-04-13
申请号:CN201010610282.9
申请日:2010-12-29
Applicant: 南开大学
IPC: G01N33/533 , G01N21/64 , G01N21/76
Abstract: 一种新的免疫荧光标记方法。本发明分别合成了含有叠氮基团和炔基基团的两个关键化合物,将前者与抗体偶联获得叠氮化IgG,再与含有荧光基团的后者进行点击化学反应,实现荧光显色。采用该技术,在细胞水平进行染色分析,叠氮标记抗体可有效应用于免疫荧光染色分析;并且采用本发明开发的方法标记的抗体可与其他现有的免疫荧光技术同时使用,且结果互不干扰。本发明通过开发一种新型的抗体标记技术,建立了一种新的免疫荧光抗体分析方法,丰富了免疫荧光抗体检测手段,在未来的免疫研究中具备发展潜力和广泛应用前景。
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公开(公告)号:CN101640085A
公开(公告)日:2010-02-03
申请号:CN200910069541.9
申请日:2009-07-03
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种分离mRNA的纤维素磁性微米材料的制备及应用。本发明采用基因工程技术将浅紫灰链霉菌的链霉亲和素基因定向克隆至含有纤维素结合域标签的pET系列载体,构建了同时具有生物素结合活性和纤维素结合活性的双功能融合蛋白CBD-SA的载体,并转入E.coli BL21感受态菌株,经IPTG低温诱导表达,获得高含量的CBD-SA融合表达蛋白。利用CBD-SA作为生物桥联剂,以生物特异性偶联法代替传统的物理吸附法和化学键合法,使纤维素磁性微米材料活化,活化后能够高效率的结合生物素化的试剂,得到可用于蛋白或核酸分离的磁性微米材料。本发明提供的纤维素磁性微米材料可用于生物样品中mRNA的分离提取等。
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公开(公告)号:CN113694209A
公开(公告)日:2021-11-26
申请号:CN202111049590.3
申请日:2021-09-08
Applicant: 南开大学
IPC: A61K47/46 , A61K38/12 , A61K9/127 , A61P31/04 , A61K31/7052
Abstract: 本发明提供了一种递送体系及在制备抗感染药物中的应用,涉及生物医药技术领域。本发明提供了中性粒细胞在制备阿奇霉素和多粘菌素的共同递送载体中的应用以及中性粒细胞在制备抗感染药物中的应用,还提供了递送体系及其制备方法和应用,实验证实所述递送体系对抗生素阿奇霉素和多粘菌素进行感染部位的靶向递送,并增强抑菌活性,降低炎症反应,能够实现低剂量药物产生高疗效的效果。
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公开(公告)号:CN113151125A
公开(公告)日:2021-07-23
申请号:CN202110112107.5
申请日:2021-01-27
Applicant: 南开大学
Abstract: 本发明公开了一种减毒铜绿假单胞菌的构建方法和应用,过程包括:将铜绿假单胞菌PAK‑JΔSTY菌株基因组中ndk基因敲除和三型蛋白分泌系统T3SS抑制性基因popN敲除,获得减毒铜绿假单胞菌aPA‑Δ5,在aPA‑Δ5的基础上,敲除murI基因,获得生物安全性更高的减毒铜绿假单胞菌aPA‑Δ6。该方法构建得到的铜绿假单胞菌毒性较弱,将其用于制备疫苗中,可有效激活免疫细胞的应答。
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公开(公告)号:CN102210866A
公开(公告)日:2011-10-12
申请号:CN201110148433.8
申请日:2011-06-03
Applicant: 南开大学 , 天津中新药业集团股份有限公司隆顺榕制药厂
IPC: A61K45/08 , A61K47/38 , A61K47/40 , A61K31/7036 , A61K31/133 , A61K31/445 , A61P3/10 , A61P3/04
Abstract: 延缓α-糖苷酶抑制剂的吸收及增强降糖药效的α-糖苷酶抑制剂口服制剂。该制剂是在每种α-糖苷酶抑制剂(阿卡波糖、伏格列波糖、米格列醇、1-脱氧野尻霉素、1-脱氧野尻霉素提取物)中,添加一定比例的羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素、甲基纤维素或β-环糊精等粘合剂辅料,制成口服制剂。相对于单独服用α-糖苷酶抑制剂,这些粘合剂可以增加α-糖苷酶抑制剂在肠道内的作用时间,延缓药物和葡萄糖在肠道内的吸收,进一步降低血药浓度,从而提高降糖效果。可用于糖尿病、肥胖症、等疾病的预防和治疗。
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公开(公告)号:CN102140483A
公开(公告)日:2011-08-03
申请号:CN201110007890.5
申请日:2011-01-14
Applicant: 南开大学
IPC: C12P13/22
Abstract: 一种固定化酶合成L-色氨酸的方法。本发明以固定化的色氨酸酶为酶源,以L-半胱氨酸和吲哚为底物,经酶法转化反应产生L-色氨酸,过滤去除固定化酶后进一步分离获得L-色氨酸。本发明使用GE树脂对色氨酸酶固定化后,优化后的最佳催化反应条件为,pH8.5;反应时间3h;底物浓度,10g/L L-半胱氨酸+10g/L吲哚;酶源细胞浓度,20mL/L;辅酶磷酸吡哆醛浓度,0.15g/L。在最适反应条件下,底物半胱氨酸的转化率为81.5%。由于采用固定化酶直接进行酶法合成,方便易行,催化效率高,发酵成本低,产物容易分离,因此本发明在L-色氨酸的工业化生产领域具有良好的产业化前景。
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公开(公告)号:CN101367873B
公开(公告)日:2011-05-04
申请号:CN200810152147.7
申请日:2008-10-08
Applicant: 南开大学
IPC: C07K14/605 , A61K38/26 , A61P3/10 , A61P3/04
Abstract: 本发明涉及一类胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的改构多肽及其修饰物,具体的,该改构多肽是在胰高血糖素样肽-1的N端前面添加一个赖氨酸,所述的胰高血糖素样肽-1包括天然的GLP-1(7-36)酰胺或GLP-1(7-37),及其部分氨基酸取代的衍生物。本发明提供的GLP-1改构多肽及其修饰物不但显示了促胰岛素分泌和降血糖作用,而且与天然的GLP-1相比,其对蛋白水解酶的稳定性和体内作用时间有明显的提高,可用于制备治疗糖尿病或肥胖症的药物。
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