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公开(公告)号：CN102417900A
公开(公告)日：2012-04-18
申请号：CN201110365097.2
申请日：2011-11-17
Applicant: 天津启仁医药科技有限公司 , 南开大学
IPC: C12N9/90 , C12N15/61 , C12N15/63 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P41/00 , C12P13/12 , C12R1/38 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种ATC消旋酶和编码基因序列及其重组表达蛋白质的制备及应用。本发明所提供的来源于假单胞菌（保藏号CGMCC No.5315）的ATC消旋酶是序列表中SEQIDNo.1的氨基酸残基序列或将SEQ ID No.1的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的替代、缺失或添加具有与SEQ ID No.1相同活性的由SEQ ID No.1衍生的蛋白质。编码基因序列是序列表中SEQ ID No.2的核苷酸序列。本发明将来源于假单胞菌ATC消旋酶基因克隆并表达制备重组酶，可用于生物法将DL-ATC催化拆分成L-ATC，生成的L-ATC作为底物，可用于酶法生产L-半胱氨酸。
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公开(公告)号：CN102140483A
公开(公告)日：2011-08-03
申请号：CN201110007890.5
申请日：2011-01-14
Applicant: 南开大学
IPC: C12P13/22
Abstract: 一种固定化酶合成L-色氨酸的方法。本发明以固定化的色氨酸酶为酶源，以L-半胱氨酸和吲哚为底物，经酶法转化反应产生L-色氨酸，过滤去除固定化酶后进一步分离获得L-色氨酸。本发明使用GE树脂对色氨酸酶固定化后，优化后的最佳催化反应条件为，pH8.5；反应时间3h；底物浓度，10g/L L-半胱氨酸+10g/L吲哚；酶源细胞浓度，20mL/L；辅酶磷酸吡哆醛浓度，0.15g/L。在最适反应条件下，底物半胱氨酸的转化率为81.5%。由于采用固定化酶直接进行酶法合成，方便易行，催化效率高，发酵成本低，产物容易分离，因此本发明在L-色氨酸的工业化生产领域具有良好的产业化前景。
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公开(公告)号：CN101367873B
公开(公告)日：2011-05-04
申请号：CN200810152147.7
申请日：2008-10-08
Applicant: 南开大学
IPC: C07K14/605 , A61K38/26 , A61P3/10 , A61P3/04
Abstract: 本发明涉及一类胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的改构多肽及其修饰物，具体的，该改构多肽是在胰高血糖素样肽-1的N端前面添加一个赖氨酸，所述的胰高血糖素样肽-1包括天然的GLP-1(7-36)酰胺或GLP-1(7-37)，及其部分氨基酸取代的衍生物。本发明提供的GLP-1改构多肽及其修饰物不但显示了促胰岛素分泌和降血糖作用，而且与天然的GLP-1相比，其对蛋白水解酶的稳定性和体内作用时间有明显的提高，可用于制备治疗糖尿病或肥胖症的药物。
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公开(公告)号：CN101139569B
公开(公告)日：2010-05-19
申请号：CN200710058410.1
申请日：2007-07-27
Applicant: 南开大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/31 , C07K4/04 , C07K1/34 , C07K1/22 , A61K38/16 , A61P3/10 , A61P3/04 , A23L1/305
Abstract: 一株α-淀粉酶抑制剂生产菌及α-淀粉酶抑制剂的制备方法与应用。该α-淀粉酶抑制剂生产菌保藏号为CGMCC No.2097。该菌经发酵，使其发酵液中积累一定量的α-淀粉酶抑制剂；用一级膜分离系统，去除菌丝体，培养基中的可溶性蛋白和大分子，以及部分色素，得到澄清滤液；再用二级膜分离系统，进一步浓缩，并脱盐脱色，除去部分单糖，大量无机盐等小分子杂质，得到澄清浓缩液；经树脂吸附α-淀粉酶抑制剂后洗脱，用纳滤膜浓缩α-淀粉酶抑制剂溶液，减压干燥等处理后得到α-淀粉酶抑制剂混合物精制品。该α-淀粉酶抑制剂能强烈抑制哺乳动物来源的α-淀粉酶，对餐后高血糖的形成有明显改善作用，可用于制备治疗糖尿病、肥胖症的药物或功能性食品。
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公开(公告)号：CN102286563B
公开(公告)日：2013-11-06
申请号：CN201110202072.0
申请日：2011-07-19
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种采用固定化酶制备L-鸟氨酸的方法。采用构建的精氨酸酶基因工程菌BL21(DE3)-pET35b-Arg，将其诱导表达，破碎细胞，收集上清液，对精氨酸酶的最适反应条件和固定化条件进行了研究。将自制的纤维素微球载体加入到细胞裂解液中，通过CBD的特异性吸附，实现精氨酸酶的固定化，采用交联剂交联之后，优化催化反应条件，最佳的催化反应条件为，pH8；反应时间2h；底物L-精氨酸浓度，40g/L；固定化酶浓度，2mL/L；Mn2+浓度，1mM。在最适反应条件下，重复使用10次，底物L-精氨酸的转化率均达到90%以上。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102703370A
公开(公告)日：2012-10-03
申请号：CN201210177959.3
申请日：2012-06-01
Applicant: 南开大学
Abstract: 一株组成型表达精氨酸酶的基因工程菌株及其应用。通过自杀质粒pRE112构建组成型表达精氨酸酶的基因工程菌菌株E.coliDH5α-ARG，其筛选后获得的高活性菌株酶活力为873U/g，该菌株与实验室保存的诱导型表达的菌株相比，酶活力没有显著性差异。优化的最佳催化反应条件为：反应温度，60℃；pH9.0；Mn2+浓度，0.5mM。最适反应条件下，以2g/L细胞为酶源，当底物L-精氨酸浓度为100g/L时，反应12h，底物L-精氨酸的转化率为98.17%。利用该酶源在该条件下转化10gL-精氨酸可制备L-鸟氨酸7.48g，纯度为98.9%，拆分20gDL-精氨酸可制备L-鸟氨酸7.44g和D-精氨酸9.71g，二者纯度均达98.1%以上。
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公开(公告)号：CN102286563A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110202072.0
申请日：2011-07-19
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种采用固定化酶制备L-鸟氨酸的方法。采用构建的精氨酸酶基因工程菌BL21(DE3)-pET35b-Arg，将其诱导表达，破碎细胞，收集上清液，对精氨酸酶的最适反应条件和固定化条件进行了研究。将自制的纤维素微球载体加入到细胞裂解液中，通过CBD的特异性吸附，实现精氨酸酶的固定化，采用交联剂交联之后，优化催化反应条件，最佳的催化反应条件为，pH8；反应时间2h；底物L-精氨酸浓度，40g/L；固定化酶浓度，2mL/L；Mn2+浓度，1mM。在最适反应条件下，重复使用10次，底物L-精氨酸的转化率均达到90%以上。
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公开(公告)号：CN101640085B
公开(公告)日：2011-06-01
申请号：CN200910069541.9
申请日：2009-07-03
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种分离mRNA的纤维素磁性微米材料的制备及应用。本发明采用基因工程技术将浅紫灰链霉菌的链霉亲和素基因定向克隆至含有纤维素结合域标签的pET系列载体，构建了同时具有生物素结合活性和纤维素结合活性的双功能融合蛋白CBD-SA的载体，并转入E.coli BL21感受态菌株，经IPTG低温诱导表达，获得高含量的CBD-SA融合表达蛋白。利用CBD-SA作为生物桥联剂，以生物特异性偶联法代替传统的物理吸附法和化学键合法，使纤维素磁性微米材料活化，活化后能够高效率的结合生物素化的试剂，得到可用于蛋白或核酸分离的磁性微米材料。本发明提供的纤维素磁性微米材料可用于生物样品中mRNA的分离提取等。
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公开(公告)号：CN102260495A
公开(公告)日：2011-11-30
申请号：CN201110148365.5
申请日：2011-06-03
Applicant: 南开大学
Abstract: 一种荧光靶向纳米材料及其制备方法。制备方法是：以聚合物为纳米材料载体，并对其进行叠氮化修饰，然后借助点击化学反应，将靶向分子叶酸和荧光示踪化合物偶联到聚合物链上，得到荧光靶向偶合物，再经过超声分散得到稳定的靶向性荧光纳米材料。本发明得到的靶向荧光纳米材料，分布均匀，可以有效到达肿瘤部位，通过荧光化合物的示踪作用，在实验和检测过程中，直观方便的考察靶向作用及病变发生情况。本发明的优点是：制备方法简便；荧光纳米体系稳定；靶向分子叶酸可提高荧光材料的靶向性。
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公开(公告)号：CN102012425A
公开(公告)日：2011-04-13
申请号：CN201010610282.9
申请日：2010-12-29
Applicant: 南开大学
IPC: G01N33/533 , G01N21/64 , G01N21/76
Abstract: 一种新的免疫荧光标记方法。本发明分别合成了含有叠氮基团和炔基基团的两个关键化合物，将前者与抗体偶联获得叠氮化IgG，再与含有荧光基团的后者进行点击化学反应，实现荧光显色。采用该技术，在细胞水平进行染色分析，叠氮标记抗体可有效应用于免疫荧光染色分析；并且采用本发明开发的方法标记的抗体可与其他现有的免疫荧光技术同时使用，且结果互不干扰。本发明通过开发一种新型的抗体标记技术，建立了一种新的免疫荧光抗体分析方法，丰富了免疫荧光抗体检测手段，在未来的免疫研究中具备发展潜力和广泛应用前景。
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