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公开(公告)号：CN118272428A
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202410562568.6
申请日：2024-05-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种发根农杆菌介导的芸薹属作物高效遗传转化和基因编辑方法。本发明通过发根农杆菌介导ZmWUS2、AtIPT和AtPLT5三个生长发育调控因子实现芸薹属作物的遗传转化和基因编辑体系的建立，通过发根农杆菌介导ZmWUS2、AtIPT和AtPLT5三个生长发育调控因子诱导外植体形成愈伤，直接形成芽，解决了芸薹属作物根再生困难的问题，使得根再生能力差的物种实现了高效转化。
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公开(公告)号：CN116286946A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310103908.4
申请日：2023-02-13
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/113
Abstract: 本发明公开了一种无外源DNA的植物基因编辑方法，通过采用含有移动TLS(tRNA like sequence)基因编辑元件的发根农杆菌侵染植物的营养体，之后进行培养至营养体萌发出转基因毛状根，含有移动TLS基因编辑元件所转录的RNA在移动TLS的带动下从根部移动到营养体新生长的器官以编辑植物基因组。与现有方法相比，本发明的方法无需组培、嫁接和根诱导芽，不受基因型和物种限制的，操作简单，可应用到所有具有茎并能诱导毛状根的草本和木本植物，可以极大地促进CRISPR/Cas9、Cpf1等基因编辑技术在基因功能验证和基因工程育种的应用。
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公开(公告)号：CN115976255A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202211275100.6
申请日：2022-10-18
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种在苗期鉴定不结球白菜抽薹时间的方法，属于分子生物学技术领域。该方法以不结球白菜的基因组DNA为模板，采用引物组6943bp‑insert‑2F/2R通过聚合酶链式反应扩增该片段，根据目标条带的大小，即可快速鉴定不结球白菜早抽薹材料和品种。本发明提供的鉴定方法，可以在不结球白菜发育早期检测早抽薹的材料和品种，提高检测效率的同时节省了大量人力物力，进一步加快了不结球白菜的育种进程。
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公开(公告)号：CN113826642A
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN202010513572.5
申请日：2020-06-08
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种洋葱种子引发剂及其应用方法。洋葱种子引发剂，选自以下任意一种或多种:1％‑4％CaCl2、1％‑4％KH2PO4、0.5％‑2％KNO3、10％‑30％PEG或20‑80mg/LVC。所述的洋葱种子引发剂优选1％‑4％CaCl2。一种促进洋葱种子发芽的方法，在黑暗的条件下，用所述的洋葱种子引发剂处理洋葱种子，处理温度为20‑25℃，处理时间为5～10h；优选在黑暗的条件下，用所述的洋葱种子引发剂处理洋葱种子，处理温度为20℃，处理时间为8h。本发明洋葱种子引发剂通过引发处理，能够提高不同品种洋葱种子的发芽力，促进洋葱种子的萌发。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110547193A
公开(公告)日：2019-12-10
申请号：CN201910865660.9
申请日：2019-09-12
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种培育不结球白菜小孢子植株的方法。该方法包括如下步骤：(1)花蕾的选取；(2)培育小孢子胚胎：将花蕾消毒，清洗，1/2NLN-13培养基润洗；将润洗后的花蕾加入1/2NLN-13培养基，充分研磨，过滤，离心，黄绿色沉淀用NLN-13培养基稀释，用甲基磺酸乙酯处理后分装到培养皿中，向培养皿中加入活性炭，使其浓度为1mg/mL，热激处理，然后暗培养14天形成胚状体；(3)成熟胚萌发成植株：将胚状体振荡培养，将其中转绿的成熟胚转移到改良固体1/2MS培养基中培育40d，直接进行炼苗移栽。本发明所述方法在能够保证出胚率的情况下，简化操作步骤，大大减少了操作时间，提高了植株生产效率。
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公开(公告)号：CN108504769A
公开(公告)日：2018-09-07
申请号：CN201810592942.1
申请日：2018-06-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明选用早开花的油用型品种‘YS-143’与晚开花的芜菁品种‘VT-044’为试材，分别观察其在长日照和短日照两个条件下的开花时间。同时以两个材料为模板克隆这个基因的cDNA序列，并利用生物信息学技术对其氨基酸序列进行分析，发现早花型和晚花型白菜类作物CCA1基因上的差异位点，并通过生物信息学、测序比对等分析得到了初步确认，开发出一个InDel标记。所述InDel分子标记的核苷酸序列为ACCCTT，位于早花型白菜类作物CCA1基因的第六个外显子上，但不存在于晚花型白菜类作物CCA1基因编码区。最后通过验证，将其作为功能标记进行分子辅助育种工作。本发明的分子标记可简便、快速、高通量地应用于育种实践。
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公开(公告)号：CN107557381A
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201710949078.1
申请日：2017-10-12
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种白菜CRISPR-Cas9基因编辑体系的建立及其应用。设计两对sgRNA引物sGAvrIIF1/sGR1和sGF2/sGAvrIIR2，分别以pChimera sgRNA vector为模板进行PCR扩增，分别取纯化目的片段以sGAvrIIF1/sGAvrIIR2为引物进行融合PCR；将载体pCAS9-TPC与融合PCR产物酶切后融合连接，融合连接产物转化大肠杆菌，获得阳性菌落进行培养提取质粒得到植物基因编辑载体。通过本发明，可简单有效的实现了对白菜的基因编辑，对白菜转基因体系的建立也奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN101338341B
公开(公告)日：2013-05-22
申请号：CN200810123996.X
申请日：2008-06-16
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供了不结球白菜高Vc含量基因的分子标记方法，属于分子遗传学领域。对不结球白菜高Vc含量品种‘常州乌塌菜’和低Vc含量品种‘二青’进行RAPD分子标记的筛选，获得与不结球白菜高Vc含量基因连锁的一个标记AW5561，对该特异片段进行测序分析，并将其转化为稳定的SCAR标记，即SCAW5532。通过本发明提供的分子标记，可有效开展不结球白菜高Vc含量品种的选育，大大提高选择效率，从而加快育种进程。
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公开(公告)号：CN102165970A
公开(公告)日：2011-08-31
申请号：CN201110089510.7
申请日：2011-04-11
Abstract: 本发明公开了一种脱水蒜片的加工方法，属于大蒜精深加工关键技术领域。通过选料、切蒂、分瓣、去皮、切成厚度为1～2mm的蒜片。采用CaCl2浓度w/v为0.4％～0.8％、NaCl浓度w/v为0.6～1.0％、L-半胱氨酸浓度w/v为0.05～0.15％的护色液进行30分钟护色。沥干后，先用真空度为90～120KPa，功率300～450W的真空微波干燥20分钟，后用50～60℃热风干燥60分钟，得到最终含水量为5％的蒜片产品。本方法不仅缩短了蒜片干燥的时间，并且蒜片品质和外观都明显高于单一干燥方式的产品。
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