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公开(公告)号：CN113549617B
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202110618334.5
申请日：2021-06-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开编辑不结球白菜CENH3基因的sgRNA及其CRISPR/Cas9载体和应用，本发明设计了不结球白菜CENH3基因的sg RNA，构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，将连接了目的DNA片段的CRISPR/Cas9载体转入不结球白菜基因组中，通过基因编辑实现对不结球白菜CENH3基因的定点突变。本发明使用花粉纳米磁转化技术结合CRISPR/Cas9技术对不结球白菜内源基因CENH3进行编辑，通过植株抗性筛选、PCR检测、基因测序筛选得到CENH3单倍体诱导系，为在不结球白菜双单倍体育种中利用CENH3介导的染色体消除机制获得单倍体奠定基础。
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公开(公告)号：CN101536671A
公开(公告)日：2009-09-23
申请号：CN200910026489.9
申请日：2009-04-24
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种苋菜优良种质的创新方法，属于植物育种技术领域。在30℃条件下，用倒浸法以0.5‰的秋水仙素浸泡苋菜幼苗茎尖生长点24小时，将浸过的幼苗移栽至选种圃培养，经诱变株筛选和培养获得诱变第一代，再连续分离4代，筛选获得优良的诱变株系。本方法用来培养优质多抗苋菜新品种和新资源，可降低诱变投入50％－75％，进一步提高了蔬菜诱变率，加快育种速度，操作简便，诱变群体大，安全性高。本发明处理得到的苋菜与常规品种相比，产量提高约25％－33％，其品质、抗逆性和抗病性等多种性状，均有显著提高，有重要的推广价值，并必将产生较大的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号：CN113564201B
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202110886126.3
申请日：2021-08-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种十字花科作物花粉电击遗传转化方法，以不结球白菜的成熟花粉细胞作为受体材料，把质粒DNA在电场的作用下，导入花粉中，结合常规的人工授粉，得到转基因种子。通过对电转染花粉的培养观察，以及获得的后代植株进行转基因检测，证明电击转化法可以成功的在不结球白菜上应用。本发明首次在不结球白菜上应用电击转化技术作为基因编辑的方法，与目前农杆菌转化，基因枪法等转基因方法相比，操作相对简洁，成本较低，可以进一步研究建立遗传转化体系，为不结球白菜的遗传育种提供更好的工具。
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公开(公告)号：CN115725777A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202211540771.0
申请日：2022-12-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种苗期鉴定不结球白菜花瓣花色的方法。该方法以不结球白菜品种DNA作为模板，采用引物组wF35通过聚合酶链反应（PCR）扩增该片段，根据电泳后目的条带的大小，可在抽薹开花前初步推断不结球白菜品种花瓣颜色，筛选相应花色品种。本发明提供的方法，可以快速检测不结球白菜品种花色，实现对花色的早期精准预测，极大的节约时间和资源，大大提高选择效率，从而加快育种进程，在生产实践中也具有重要作用。
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公开(公告)号：CN115399216A
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202110579433.7
申请日：2021-05-26
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 为解决落叶处理问题，草炭和岩棉所带来的环境污染和资源枯竭问题，本发明提供一种改良粘壤土的制备方法，包括：(1)筛选菌株：收集悬铃木落叶，收集悬铃木落叶上的菌种，涂布培养、纯化，对菌种进行初筛，挑选出纤维素降解能力强的菌株进行生长曲线的测定，取最佳生长状态的菌株后进行纤维素酶活测定的复筛，筛选得到菌株；(2)制备菌剂：将菌株制成固体菌剂；(3)制备改良粘壤土：将固体菌剂与粉碎的悬铃木落叶混合进行有氧发酵，有氧发酵完成后得到有机基质，将有机基质与粘壤土混合，制备得到改良粘壤土。本发明解决了城市落叶难以处理等难题，采用本发明提供的改良粘壤土能够显著提高不结球白菜的生物产量、根系活力、可溶性糖含量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110590729B
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN201910904189.X
申请日：2019-09-24
Applicant: 南京农业大学
IPC: C07D311/62 , A61K47/42 , A61K31/352
Abstract: 本发明属于提高白菜花色苷热稳定性领域，涉及一种采用核桃肽提高白菜花色苷热稳定性的方法。包括以下步骤：选择生长状况良好的白菜，洗净备用；选取酸化的乙醇作为提取剂，将提取液和白菜在超声条件下提取花色苷，获得提取液；提取液离心来，分离上清液得到花色苷的粗提取液；浓缩来，得到花色苷粗提取浓缩液；将花色苷粗提取浓缩液中浸泡2.5‑4小时，后再用蒸馏水冲洗大孔树脂，再用解吸液解吸大孔树脂，收集解吸液并浓缩，得到纯化的花色苷溶液；花色苷溶液中加入核桃肽溶液并加热来。本发明通过低浓度的核桃肽的作用来保存花色苷，并且能够较为显著的提高花色苷在一定温度的保存率，这对未来花色苷的保存和开发利用具有积极的作用。
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公开(公告)号：CN108504769B
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201810592942.1
申请日：2018-06-08
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6869 , C12N15/11
Abstract: 本发明选用早开花的油用型品种‘YS‑143’与晚开花的芜菁品种‘VT‑044’为试材，分别观察其在长日照和短日照两个条件下的开花时间。同时以两个材料为模板克隆这个基因的cDNA序列，并利用生物信息学技术对其氨基酸序列进行分析，发现早花型和晚花型白菜类作物CCA1基因上的差异位点，并通过生物信息学、测序比对等分析得到了初步确认，开发出一个InDel标记。所述InDel分子标记的核苷酸序列为ACCCTT，位于早花型白菜类作物CCA1基因的第六个外显子上，但不存在于晚花型白菜类作物CCA1基因编码区。最后通过验证，将其作为功能标记进行分子辅助育种工作。本发明的分子标记可简便、快速、高通量地应用于育种实践。
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公开(公告)号：CN109652455A
公开(公告)日：2019-04-19
申请号：CN201910121665.0
申请日：2019-02-19
Applicant: 南京农业大学 , 南京市蔬菜科学研究所
IPC: C12N15/87
Abstract: 为解决不结球白菜再生率低，受基因型影响大，使得转化效率低的技术问题，本发明提供一种磁性纳米载体介导的不结球白菜高效遗传转化方法，包括将含有外源基因的质粒与具有顺磁性、表面覆盖一层PEI薄膜的Fe3O4的磁性纳米载体以质量比1：1连接，得到基因—磁性纳米载体复合物；在花粉培养基中混合基因—磁性纳米载体与待转化植物花粉，在0.1～0.5T的磁场介导下进行磁转化，直接递送基因—磁性纳米载体复合物进入花粉细胞；然后通过植物授粉和受精过程实现待转化植物的外源基因遗传转化。本发明花粉培养基配方、磁性纳米粒子和质粒DNA的质量比、磁转化时间三者的组合，能够保证不结球白菜的花粉活力并有效提高磁转化效率，建立简单高效的遗传转化体系。
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公开(公告)号：CN113549617A
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN202110618334.5
申请日：2021-06-03
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开编辑不结球白菜CENH3基因的sgRNA及其CRISPR/Cas9载体和应用，本发明设计了不结球白菜CENH3基因的sg RNA，构建CRISPR/Cas9基因编辑载体，将连接了目的DNA片段的CRISPR/Cas9载体转入不结球白菜基因组中，通过基因编辑实现对不结球白菜CENH3基因的定点突变。本发明使用花粉纳米磁转化技术结合CRISPR/Cas9技术对不结球白菜内源基因CENH3进行编辑，通过植株抗性筛选、PCR检测、基因测序筛选得到CENH3单倍体诱导系，为在不结球白菜双单倍体育种中利用CENH3介导的染色体消除机制获得单倍体奠定基础。
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公开(公告)号：CN110907413A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911051541.6
申请日：2019-10-31
IPC: G01N21/64
Abstract: 本发明属于叶绿素技术鉴定领域，具体涉及一种利用叶绿素荧光技术鉴定芥兰耐盐性的方法。包括以下步骤：1）芥兰材料准备：选择籽粒饱满的芥兰种子进行催芽，待种子露白后种植于穴盘中，待芥兰材料长成幼苗，将幼苗作为实验材料进行后续实验；2）盐胁迫诱导：收集健壮的芥兰植株进行盐胁迫处理，作为处理组，同时以进行盐胁迫处理为空白对照分；3）叶绿素荧光参数检测：用叶绿素荧光仪分别对处理组的盐胁迫处理1-21d的芥兰植株及对照进行叶绿素荧光参数测定绿素荧光参数Fo、qP、NPQ、Fv/Fm和Y(II)来评估不同盐胁迫处理对芥兰叶绿素荧光参数变化的影响。本发明利用叶绿素荧光参数实现无损、快速的评估不同芥兰材料对盐胁迫的响应能力并鉴定其耐盐性。
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