公开(公告)号：CN107557381A

公开(公告)日：2018-01-09

申请号：CN201710949078.1

申请日：2017-10-12

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 张昌伟 ,  杨洋 ,  侯喜林 ,  刘同坤 ,  张茹佳 ,  高立伟 ,  李英 ,  肖栋 ,  王建军 ,  胡春梅

IPC: C12N15/82 ,  C12N1/21 ,  A01H5/02

Abstract: 本发明公开了一种白菜CRISPR-Cas9基因编辑体系的建立及其应用。设计两对sgRNA引物sGAvrIIF1/sGR1和sGF2/sGAvrIIR2，分别以pChimera sgRNA vector为模板进行PCR扩增，分别取纯化目的片段以sGAvrIIF1/sGAvrIIR2为引物进行融合PCR；将载体pCAS9-TPC与融合PCR产物酶切后融合连接，融合连接产物转化大肠杆菌，获得阳性菌落进行培养提取质粒得到植物基因编辑载体。通过本发明，可简单有效的实现了对白菜的基因编辑，对白菜转基因体系的建立也奠定了良好的基础。